一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法技术

本发明专利技术公开了一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法。具体地公开了一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法，所述方法包括将蔷薇属植物组织经液氮研磨后，进行连续三次裂解和提取的步骤，所述三次裂解和提取分别采用溶液A、溶液B和溶液C进行裂解，并公开了溶液A、溶液B和溶液C的组分。本发明专利技术方法有效解决了次生代谢物质、蛋白质、和DNA等对RNA提取的干扰问题，显著提高了蔷薇属植物组织总RNA的提取质量和效率。本发明专利技术方法具有高效率、高质量、低成本、周期短、稳定好、操作简单和易于广泛应用等优点，提取的总RNA完整性好、纯度高、得率高，可直接用于RT

A method for extracting total RNA from Rosa plant tissues

【技术实现步骤摘要】
一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法


[0001]本专利技术属于植物分子生物学
，具体涉及一种从蔷薇属植物根、茎、叶、花、果实等组织中提取高质量总RNA的方法。

技术介绍

[0002]植物组织总RNA的提取是开展基因的克隆、表达、功能及调控等分子生物学研究的实验基础。纯度高且完整性好的高质量总RNA是进行RT
‑
PCR、RT
‑
qPCR、Northern杂交、cDNA文库构建和转录组学分析等分子生物学实验的关键。RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶(ribonuclease，RNase)对RNA的降解，而且植物组织RNA的提取较动物和微生物困难，如酚类物质氧化后可使RNA活性丧失，多糖可形成难溶胶状物质与RNA一起被沉淀，所以细胞内RNA分子的多样性和易被降解决定了其提取过程的复杂性。目前植物组织总RNA的提取方法有很多，如常规的Trizol法、CTAB法、SDS法等通常用于普通植物组织总RNA的提取，针对复杂植物组织总RNA的提取，现本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从蔷薇属植物组织中提取总RNA的方法，其特征在于，所述方法包括将蔷薇属植物组织经液氮研磨得到粉末，将所述粉末进行三次裂解和提取后再进行氯仿抽提和异丙醇沉淀，得到蔷薇属植物组织总RNA，所述三次裂解和提取分别采用溶液A、溶液B和溶液C进行裂解提取，其中：所述溶液A的溶质由三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸、氯化钾、氯化钠、十六烷基三甲基溴化铵、β
‑
巯基乙醇和湿润剂P
‑
40组成；所述溶液B的溶质由三羟甲基氨基甲烷、氯化锂、十二烷基肌氨酸钠、聚乙二醇8000和聚乙烯吡咯烷酮组成；所述溶液C的溶质由异硫氰酸胍、醋酸钠、水饱和酚、8
‑
羟基喹啉和β
‑
巯基乙醇组成。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述溶液A的组成为：0.1M三羟甲基氨基甲烷、0.05M乙二胺四乙酸、0.5M氯化钾、1.5M氯化钠、20g/L十六烷基三甲基溴化铵、体积分数为4％的β
‑
巯基乙醇和体积分数为4％的湿润剂P
‑
40，其余为水。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述溶液B的组成为：0.1M三羟甲基氨基甲烷、2M氯化锂、20g/L十二烷基肌氨酸钠、100g/L聚乙二醇8000和40g/L聚乙烯吡咯烷酮，其余为水。4.根据权利要求1
‑
3中任一所述的方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：田雪军，韦如健，陈士，李仔叶，吴晶晶，李昊璞，徐佩琪，徐艳，熊兴鹏，
申请(专利权)人：荆楚理工学院，
类型：发明
国别省市：