一种CD25靶向多肽、分子探针及应用制造技术

本发明专利技术属于核医学显像剂领域，涉及一种CD25靶向多肽、分子探针及应用。所述多肽的氨基酸序列如下：i)X1X2X3X4X5；或ii)在i)的N端或C端连接标签形成的氨基酸序列；其中，X1为精氨酸、赖氨酸、组氨酸；X2为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸；X3为精氨酸、赖氨酸、组氨酸；X4为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸；X5为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸。本发明专利技术提供的CD25多肽及其核素标记探针具有明显的肿瘤摄取，瘤本比清晰，有效提高了在影像诊断过程中的信噪比，具有较高应用价值。有较高应用价值。有较高应用价值。

A CD25 targeted polypeptide, molecular probe and Application

【技术实现步骤摘要】
一种CD25靶向多肽、分子探针及应用


[0001]本专利技术属于核医学显像剂领域，具体地，涉及一类可用于靶向CAR
‑
T细胞CD25靶点的多肽类衍生物、分子探针及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]CAR
‑
T（Chimeric Antigen Receptor T Cell）治疗，即嵌合抗原受体T细胞疗法，是目前临床肿瘤治疗的研究前沿热点。据Clinical Trials官网统计，世界范围内有数百项的CAR
‑
T临床试验正在开展之中，其中不仅包括以CD19、CD20等为靶点的血液系统肿瘤CAR
‑
T疗法，还包括靶向间皮素（Mesothelin，MSLN）、人表皮生长因子受体
‑
2（HER
‑
2）等靶点的实体瘤CAR
‑
T疗法。
[0003]尽管在临床试验中取得了巨大成功，但在部分患者体内，CAR
‑
T细胞的存活和持续扩增能力有限，或者产生过度的克隆性增殖，这对CAR
‑
T的疗效和安全性评价提出了巨大挑战。目前，与CAR
‑
T细胞的增殖和良好的临床反应相关的预测指标和机制尚未完全清楚，并且有研究表明，CAR
‑
T的疗效与患者年龄、早期治疗、p53基因突变、CAR
‑
T细胞数量和其它风险因素并无显著相关性。但在预后良好的绝大部分患者中，回输CAR
‑
T细胞的两周内伴随着CAR
‑
T细胞大量激活扩增的现象。此外，CAR
‑
T治疗的副作用包括细胞因子释放综合征，神经系统毒性以及脱靶效应等，都与CAR
‑
T细胞在体内的激活扩增有关。因此，评价CAR
‑
T细胞的激活与扩增，有望实现对于CAR
‑
T疗效的早期预测，并在指导CAR
‑
T疗法的开发中起到一定的作用。
[0004]现阶段临床评价患者对于CAR
‑
T治疗的响应通常采用全血细胞计数和骨髓穿刺活检等手段，往往给患者带来较大的痛苦，且不能充分评价CAR
‑
T细胞在体内的分布情况和激活状态。目前国内外在评价T细胞激活状态的研究中通常采用长半衰期核素如
89
Zr、
64
Cu等标记抗体分子进行免疫显像，显像周期较长，且在CAR
‑
T细胞激活增殖后信号被稀释，因此限制了其应用。
[0005]CD25是白介素2（interleukin
‑
2，IL
‑
2）受体的α链，其在未激活的T细胞表面几乎没有表达，但在T细胞经抗原刺激激活之后大量表达。因此，CD25是优异的活化T细胞特异性显像靶点。在目前的研究中，利用各种放射性核素如
68
Ga、
18
F标记IL
‑
2分子进行CD25显像是较为成熟的技术。但是由于IL
‑
2是一种生物活性分子，其经静脉注射进入人体后会产生一定的生物学效应，且在注射后可能会给患者带来疼痛、发热等不适感。且由于IL
‑
2分子量相对较大，其在体内的清除速度相对较为缓慢，利用短半衰期核素标记IL
‑
2分子，难以在短时间内获得优质的显像效果。小分子探针具有体内代谢清除快、脏器本底摄取低、生物安全性高、易于进行放射性标记、成本低等优点，设计CD25特异性的小分子探针，对于在体、无创和定量评价T细胞的体内分布及激活状态具有重要意义。

技术实现思路

[0006]为了克服现阶段CAR
‑
T显像探针通常为长半衰期核素标记的各类抗体分子，显像
周期较长且存在信号稀释的缺陷，本专利技术提供了一类靶向CD25多肽、靶向CD25多肽显像剂及其应用。
[0007]本专利技术的第一方面提供一种CD25靶向多肽，所述多肽的氨基酸序列如下：i) X1X2X3X4X5（SEQ ID NO：1）；或ii) 在i)的N端或C端连接标签形成的氨基酸序列；其中，X1为精氨酸、赖氨酸、组氨酸；X2为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸；X3为精氨酸、赖氨酸、组氨酸；X4为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸；X5为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸。
[0008]根据本专利技术一种优选实施方式，所述多肽中至少有一个氨基酸为D型。其余氨基酸残基可以是L
‑
型，也可以是D
‑
型，或者是L
‑
型、D
‑
型的混合。
[0009]更优选地，X1、X5为L型，其余氨基酸中至少有一个为D型。
[0010]根据本专利技术一些实施方式，有1
‑
2个氨基酸为D型，其余均为L型。
[0011]本专利技术的CD25靶向多肽中，所述标签通常指保护基，优选为羟基保护基，例如苄基。
[0012]本专利技术的第二方面提供一种分子探针，所述分子探针为具有放射性同位素标记的所述CD25靶向多肽；所述放射性同位素直接标记在所述CD25靶向多肽上，或者通过
‑
L
‑
Ch标记在所述CD25靶向多肽上，其中L为桥接基团，Ch为核素螯合基团。放射性同位素与核素螯合基团结合。
[0013]所述分子探针可由包括以下步骤的方法制得：使所述CD25靶向多肽直接或通过共价连接放射性核素或含有放射性核素的基团。
[0014]具体地，
‑
L
‑
Ch可共价连接在所述CD25靶向多肽的N端、C端或反应性侧链上。所述反应性侧链是指所述CD25靶向多肽的侧链上的反应性基团，如氨基、羧基。具有类似性质的氨基酸如赖氨酸。根据本专利技术一种具体实施方式，当X3为赖氨酸时，所述
‑
L
‑
Ch共价连接在X3上。
[0015]根据本专利技术一种优选实施方式，所述桥接基团为寡肽或NH2‑
(PEG)
n
‑
COOH，更优选地，所述寡肽的氨基酸数目为1
‑
4，n为1
‑
4的整数。
[0016]所述核素螯合基团通常为双功能螯合剂形成的基团，所述双功能螯合剂可选自DOTA、NOTA、NODA、NODAGA、DOTP、TETA、ATSM、PTSM、EDTA、EC、HBEDCC、DTPA、SBAD、BAPEN、Df、DFO、TACN、NO2A/NOTAM、CB
‑
DO2A、Cyclen、NOTA
‑
AA、DO3A、DO3AP、HYNIC、MAS3、MAG3或异腈。
[0017]根据本专利技术，所述放射性核素优选为诊断用放射性核素；具体地，所述诊断用放射性核素为
68
Ga、
64
Cu、
18...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种CD25靶向多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如下：i) X1X2X3X4X5；或ii) 在i)的N端或C端连接标签形成的氨基酸序列；其中，X1为精氨酸、赖氨酸、组氨酸；X2为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸；X3为精氨酸、赖氨酸、组氨酸；X4为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸；X5为苯丙氨酸、酪氨酸、苄基酪氨酸、卤代苯丙氨酸。2.根据权利要求1所述的CD25靶向多肽，其中，所述多肽中至少有一个氨基酸为D型。3.根据权利要求2所述的CD25靶向多肽，其中，X1、X5为L型，其余氨基酸中至少有一个为D型。4.根据权利要求1所述的CD25靶向多肽，其中，所述标签为保护基。5.根据权利要求4所述的CD25靶向多肽，其中，所述标签为羟基保护基。6.一种分子探针，其特征在于，所述分子探针为具有放射性同位素标记的权利要求1
‑
5中任意一项所述的CD25靶向多肽；所述放射性同位素直接标记在所述CD25靶向多肽上，或者通过
‑
L
‑
Ch标记在所述CD25靶向多肽上，其中L为桥接基团，Ch为核素螯合基团。7.根据权利要求6所述的分子探针，其中，
‑
L
‑
Ch共价连接在所述CD25靶向多肽的N端、C端或反应性侧链上。8.根据权利要求6或7所述的分子探针，其中，所述桥接基团为寡肽或NH2‑
(PEG)
n
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨志，刘福涛，王帅亮，朱华，王培，王风，
申请(专利权)人：北京肿瘤医院北京大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：