靶向EPHA3及其用途制造技术

公开了至少可以特异性识别或结合EphA3的抗原结合分子和嵌合抗原受体(CAR)。还公开了医学治疗和预防方法。医学治疗和预防方法。医学治疗和预防方法。

Targeting EphA3 and its application

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】靶向EPHA3及其用途
[0001]本申请要求于2019年10月9日提交的澳大利亚专利申请第2019903802号的优先权，其内容和要素通过引用并入本文以用于所有目的。


[0002]本专利技术涉及分子生物学领域，更具体地涉及抗体技术。更具体地，本专利技术涉及至少能够特异性识别或结合EphA3的抗体或嵌合抗原受体(CAR)。本专利技术还涉及医学治疗和预防方法。

技术介绍

[0003]已发现Ephrin A型受体3(EphA3)在来自多种人实体瘤和白血病的肿瘤细胞上过度表达或异常表达，包括结肠癌、乳腺癌、慢性髓性白血病(CML)和多形性胶质母细胞瘤(GBM)。GBM是最具侵袭性的实体脑肿瘤之一。标准治疗包括最大程度的手术切除、放疗以及替莫唑胺的伴随和辅助化疗。然而，即使采用最佳治疗，初次诊断后的中位生存期也少于15个月(1)。使用检查点阻断的最新进展改善了一些人癌症的结果，但GBM似乎对单独的这种治疗方法具有抗性(2)。尽管如此，仍然需要开发不仅针对GBM，而且针对更广泛的癌症的新疗法。

技术实现思路

[0004]本专利技术广泛地涉及一种抗
‑
EphA3结合剂，包括人或人源化的重组抗
‑
EphA3抗体，及其使用方法。本专利技术的一个具体形式进一步提供了一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含能够特异性结合EphA3的抗原结合结构域，以及其使用方法。
[0005]在广义上，本专利技术涉及包含本文所述的EphA3单克隆抗体的一个或多个CDR的EphA3结合剂和CAR。
[0006]在一个方面，本专利技术提供了一种EphA3结合剂，其包含至少一个互补决定区(CDR)，所述互补决定区具有SEQ ID NO：13
‑
72和/或表4
‑
7中所示的氨基酸序列，或与其至少70％同一性的氨基酸序列。
[0007]在一些实施方案中，EphA3结合剂包含：
[0008](a)重链免疫球蛋白可变区(VH)多肽，其包含CDR1、CDR和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：13
‑
17中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR具有与SEQ ID NO：18
‑
22中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：23
‑
27中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；和/或
[0009](b)轻链免疫球蛋白可变区(VL)多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：28
‑
32中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：33
‑
37中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：38
‑
42中任一者至少70％同一性的氨基酸序列。
[0010]对于这样的实施方案，VH多肽适当地包含SEQ ID NO：153所示的氨基酸序列或与
其至少70％同一性的氨基酸序列；和/或VL多肽适当地包含SEQ ID NO：154所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。
[0011]在一些相同的实施方案和一些其他实施方案中，EphA3结合剂包含：
[0012](a)VH多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：43
‑
47中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：48
‑
52中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：53
‑
57中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；和/或
[0013](b)VL多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：58
‑
62中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：63
‑
67中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：68
‑
72中任一者至少70％同一性的氨基酸序列。
[0014]在该方面，VH多肽能够包含SEQ ID NO：155所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列；和/或VL多肽能够包含SEQ ID NO：156所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。
[0015]适当地，EphA3结合剂是抗体或抗体片段。在一个实施方案中，抗体或抗体片段是3C3
‑
1或2D4
‑
1单克隆抗体或其片段。在某些实施方案中，EphA3结合剂是重组的、人的或人源化的抗体或抗体片段。
[0016]在另一方面，本专利技术在于包含抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域的嵌合抗原受体(CAR)，所述抗原结合结构域包括至少一个CDR，所述CDR具有SEQ ID NO：13
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72和/或表4
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7所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。
[0017]在一些实施方案中，抗原结合结构域包含以下、由其组成或基本上由其组成：
[0018](a)重链免疫球蛋白可变区(VH)多肽，其包含CDR1、CDR和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：13
‑
17中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR具有与SEQ ID NO：18
‑
22中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：23
‑
27中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；和/或
[0019](b)轻链免疫球蛋白可变区(VL)多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：28
‑
32中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：33
‑
37中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：38
‑
42中任一者至少70％同一性的氨基酸序列。
[0020]对于这样的实施方案，VH多肽可包含SEQ ID NO：153所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列；和/或VL多肽可包含SEQ ID NO：154所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。
[0021]在一些实施方案中，抗原结合结构域包含以下、由其组成或基本上由其组成：
[0022](a)VH多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：43
‑
47中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：48
‑
52中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种EphA3结合剂，任选地，一种分离的EphA3结合剂，其包含至少一个互补决定区(CDR)，所述互补决定区具有SEQ ID NO：13
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72和/或表4
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7中所示的氨基酸序列，或与其至少70％同一性的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的EphA3结合剂，其包含(a)重链免疫球蛋白可变区(VH)多肽，其包含CDR1、CDR和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：13
‑
17中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR具有与SEQ ID NO：18
‑
22中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：23
‑
27中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)轻链免疫球蛋白可变区(VL)多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：28
‑
32中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：33
‑
37中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：38
‑
42中任一者至少70％同一性的氨基酸序列。3.如权利要求2所述的EphA3结合剂，其中：(a)VH多肽包含SEQ ID NO：153所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)VL多肽包含SEQ ID NO：154所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。4.如权利要求1所述的EphA3结合剂，其包含(a)VH多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：43
‑
47中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：48
‑
52中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：53
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57中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)VL多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：58
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62中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：63
‑
67中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：68
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72中任一者至少70％同一性的氨基酸序列。5.如权利要求4所述的EphA3结合剂，其中：(a)VH多肽包含SEQ ID NO：155所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)VL多肽包含SEQ ID NO：156所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。6.如前述权利要求中任一项所述的EphA3结合剂，其中所述EphA3结合剂是抗体或抗体片段。7.如权利要求6所述的EphA3结合剂，其中所述抗体或抗体片段是3C3
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1或2D4
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1单克隆抗体或其片段。8.如权利要求6或7所述的EphA3结合剂，其中所述EphA3结合剂是重组的、人的或人源化的抗体或抗体片段。9.一种能够结合EphA3的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：(i)并入以下CDR的重链可变(VH)区：
具有SEQ ID NO：16的氨基酸序列的HC
‑
CDR1；具有SEQ ID NO：22的氨基酸序列的HC
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CDR2；具有SEQ ID NO：27的氨基酸序列的HC
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CDR3；和(ii)并入以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQ ID NO：32的氨基酸序列的LC
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CDR1；和具有SEQ ID NO：37的氨基酸序列的LC
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CDR2；具有SEQ ID NO：42的氨基酸序列的LC
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CDR3。10.一种能够结合EphA3的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：(i)并入以下CDR的重链可变(VH)区：具有SEQ ID NO：47的氨基酸序列的HC
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CDR1；具有SEQ ID NO：52的氨基酸序列的HC
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CDR2；具有SEQ ID NO：57的氨基酸序列的HC
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CDR3；(ii)并入以下CDR的轻链可变(VL)区：具有SEQ ID NO：62的氨基酸序列的LC
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CDR1；具有SEQ ID NO：67的氨基酸序列的LC
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CDR2；具有SEQ ID NO：72的氨基酸序列的LC
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CDR3。11.如权利要求9中任一所述的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：VH区，其包含与SEQ ID NO：153的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列；和VL区，其包含与SEQ ID NO：154的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。12.如权利要求10中任一所述的抗原结合分子，其中所述抗原结合分子包含：VH区，其包含与SEQ ID NO：155的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列；和VL区，其包含与SEQ ID NO：156的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。13.一种抗原结合分子，其包含(i)权利要求9
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12中任一项所述的抗原结合分子，和(ii)能够与EphA3以外的抗原结合的抗原结合分子。14.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含权利要求9
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13中任一项所述的抗原结合分子。15.一种嵌合抗原受体(CAR)，其包含抗原结合结构域、跨膜结构域和细胞内T细胞信号传导结构域，所述抗原结合结构域包括至少一个CDR，所述CDR具有SEQ ID NO：1
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12所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。16.如权利要求15所述的CAR，其中所述抗原结合结构域包含、由或基本上由以下组成：(a)重链免疫球蛋白可变区(VH)多肽，其包含CDR1、CDR和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：13
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17中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR具有与SEQ ID NO：18
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22中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：23
‑
27中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)轻链免疫球蛋白可变区(VL)多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：28
‑
32中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：33
‑
37中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：38
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42中任一者至少70％同一性的氨基酸序列。
17.如权利要求16所述的CAR，其中：(a)VH多肽包含SEQ ID NO：153所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)VL多肽包含SEQ ID NO：154所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。18.如权利要求15所述的CAR，其中所述抗原结合结构域包含、由或基本上由以下组成：(a)VH多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：43
‑
47中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：48
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52中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：53
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57中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)VL多肽，其包含CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有与SEQ ID NO：58
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62中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；所述CDR2具有与SEQ ID NO：63
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67中任一者至少70％同一性的氨基酸序列；并且所述CDR3具有与SEQ ID NO：68
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72中任一者至少70％同一性的氨基酸序列。19.如权利要求18所述的CAR，其中：(a)VH多肽包含SEQ ID NO：155所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列；和/或(b)VL多肽包含SEQ ID NO：156所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列。20.如权利要求15至19中任一项所述的CAR，其中所述抗原结合结构域包含接头，例如具有SEQ ID NO:158所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列的接头。21.如权利要求14至20中任一项所述的CAR，其还包含前导序列。22.如权利要求21所述的CAR，其中所述前导序列包含、由或基本上由SEQ ID NO:157所示的氨基酸序列或与其至少70％同一性的氨基酸序列组成。23.如权利要求14至22中任一项所述的CAR，其中所述跨膜结构域包括CD8跨膜结构域。24.如权利要求23所述的CAR，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：昆士兰医学研究所理事会，
类型：发明
国别省市：