荧光素衍生物及其合成方法技术

本公开涉及荧光素衍生物和荧光素衍生物的合成方法。合成荧光素衍生物的方法包括通过使用有毒酚衍生物作为底物进行第一反应，并通过使用耐热脱卤酶、一组自由基清除酶、一组多酚氧化酶和FADH2生成系统在缓冲溶液中使有毒酚衍生物反应以获得苯醌。FADH2生成系统能够生成FADH2，其是耐热脱卤酶的底物。此外，在衍生的苯醌和D

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】荧光素衍生物及其合成方法


[0001]本专利技术涉及萤光素衍生物和萤光素衍生物的合成方法。更具体地说，萤光素衍生物还具有600
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700nm的发射波长。

技术介绍

[0002]萤光素是萤火虫中发现的一种天然物质。萤光素是生物发光反应的底物。反应发出的光通常为黄绿色，并且同样是可见的。由于萤光素与萤火虫萤光素酶之间的特殊反应，生物发光可用于生物医学研究、检测装置、食品工业等各个领域。
[0003]目前，通常在萤火虫中发现的荧光素可以通过化学工艺合成。然而，这还不够，也不能满足研究人员的需要，尤其是医学和药物研究的需要。这些研究需要新的荧光素衍生物用于复杂的医学研究，例如在实验动物中用作模型来诊断许多疾病，包括癌症、脑部疾病和遗传疾病等。他们的需求是寻找具有发光活性的新的荧光素衍生物，这种的新的荧光素衍生物在与萤火虫萤光素酶反应时会发射波长大于600nm的光，导致发射波长红移。为了获得红光，需要合成萤光素衍生物和萤火虫萤光素酶的酶工程，以同时修饰萤光素酶的内部结构，从而产生萤光素衍生物与萤火虫萤光素酶反应的特异性。现在，萤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包含以下结构的荧光素衍生物：其中R1、R2和R3的一个或组合被卤素基、硝基、氨基、甲基、乙基和甲氧基取代。2.根据权利要求1所述的荧光素衍生物，其特征在于，所述卤素基选自氟、氯、溴和碘中的一种。3.根据权利要求1所述的荧光素衍生物，其特征在于，所述荧光素衍生物的发射波长为600
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700nm。4.一种合成荧光素衍生物的方法，包括通过使用耐热脱卤酶、一组自由基清除酶、一组多酚氧化酶和FADH2生成系统，在缓冲溶液中的苯酚衍生物底物之间进行第一反应，用于获得苯醌；和在苯醌和D
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半胱氨酸之间进行第二反应以获得所述荧光素衍生物。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述耐热脱卤酶为HadA G513T。6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述HadA G513T的氨基酸序列载于SEQ ID NO.1中。7.根据权利要求4
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6中任一权利要求所述的方法，其特征在于，所述耐热脱卤酶的氨基酸序列与SEQ ID NO.1至少50％相同。8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，该组自由基清除酶选自过氧化氢酶和超氧化物歧化酶中的一种。9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，该组多酚氧化酶选自酪氨酸酶、漆酶和过氧化物酶中的一种。10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述FADH2生成系统选自以下一种：第一FADH2生成系统，包括用于直接反应的FADH2；第二FADH2生成系统，包括NADH、FAD和一组黄素还原酶，其中NADH是一还原剂和一组黄素还原酶的底物，用于从FAD生成FADH2；第三FADH2生成系统，包括G
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PD、葡萄糖
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磷酸、NAD
+
、一组黄素还原酶和FAD，其中葡萄糖
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磷酸和...

【专利技术属性】
技术研发人员：皮姆蔡，
申请(专利权)人：维迪亚西里梅迪科学技术研究所，
类型：发明
国别省市：