利用PD-1激动剂的靶向免疫耐受制造技术

用于赋予位点特异性或局部免疫赦免的方法和多肽。法和多肽。法和多肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】利用PD
‑
1激动剂的靶向免疫耐受
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年8月19日提交的美国临时申请号62/888,694和2020年5月20日提交的美国临时申请号63/027,449的优先权，其每个均通过援引以整体并入本文。
[0003]本申请涉及于2018年8月23日提交的美国临时申请号62/721,644、于2018年5月24日提交的美国临时申请号62/675,972、于2017年12月6日提交的美国临时申请号62/595,357、于2017年12月6日提交的美国临时申请号62/595,348、于2018年8月23日提交的美国非临时申请号16/109,875、于2018年8月23日提交的美国非临时申请号16/109,897、于2018年5月24日提交的美国非临时申请号15/988,311、于2018年5月24日提交的PCT申请号PCT/US2018/034334以及于2018年11月28日提交的PCT/US2018/062780，其各自通过援引以整体并入本文。


[0004]本文提供的实施方式涉及例如用于局部或靶向免疫赦免的方法和组合物。

技术介绍

[0005]有害的免疫应答的实例(例如在移植组织的排斥中或在自身免疫性疾患中)构成了全世界数百万人的主要健康问题。器官移植的长期结果通常以慢性排斥和移植器官的最终衰竭为特征。已知超过20种自身免疫性疾患，基本上影响身体的每个器官，并且仅在北美就影响超过5000万人。在这两种情况下用于对抗致病性免疫应答的广泛活性免疫抑制药物都有严重的副作用。

技术实现思路

[0006]本文公开了提供位点特异性免疫赦免的方法和治疗化合物。本文公开的实施方式通过援引并入本部分。
[0007]在一些实施方式中，治疗化合物包括工程化的多特异性化合物，例如工程化的双特异性分子，例如工程化的双特异性抗体分子，包括：
[0008]1)选自以下的特异性靶向部分：
[0009]a)供体特异性靶向部分，其例如优先结合供体靶标(同与接受者抗原的结合相比优先)，并且可用于为来自供体的移植组织(例如器官)提供位点特异性免疫赦免；或
[0010]b)组织特异性靶向部分，其例如优先结合受试者靶组织(与受试者非靶组织相比优先)，并且可用于为遭受不必要的免疫攻击的受试者组织(例如，在自身免疫性疾患中)提供位点特异性免疫赦免；和
[0011]2)选自以下的效应物结合/调节部分：
[0012](a)免疫细胞抑制性分子结合/调节部分(在本文中称为ICIM结合/调节部分)；
[0013](b)免疫抑制性免疫细胞结合/调节部分(在本文中称为IIC结合/调节部分)；
[0014](c)作为治疗化合物的一部分促进免疫抑制性局部微环境的效应物结合/调节部
分，例如通过在靶标附近提供抑制或最小化免疫系统对靶标的攻击的物质(在本文中称为SM结合/调节部分)；或
[0015](d)免疫细胞刺激分子结合/调节部分(在本文中称为ICSM结合/调节部分)，其中ICSM通过例如阻断共刺激分子与其反结构之间的相互作用来抑制免疫激活。
[0016]效应物结合/调节部分可以属于类别a、b和c中的多于一类。例如，如下所示的，CTLA
‑
4结合分子属于类别a和b两者。
[0017]在一些实施方式中，治疗化合物包括ICIM结合/调节部分。在一些实施方式中，ICIM结合/调节分子结合并激动抑制性分子，例如抑制性免疫检查点分子，或以其他方式抑制或降低免疫细胞(例如细胞毒性T细胞、B细胞、NK细胞或骨髓细胞例如中性粒细胞或巨噬细胞)的活性。
[0018]在一些实施方式中，治疗化合物包括工程化的多特异性化合物，例如工程化的双特异性分子，例如工程化的双特异性抗体分子，包括：
[0019]1)特异性靶向部分，例如供体特异性靶向部分(其结合供体靶标并且可用于为来自供体的移植组织例如器官提供位点特异性免疫赦免)或组织特异性靶向部分(其结合受试者组织靶标并且可用于为遭受有害的免疫攻击(例如在自身免疫性疾患中)的受试者组织提供位点特异性免疫赦免)；和
[0020]2)效应物结合/调节部分，包括ICIM结合/调节部分，其与免疫细胞上的效应物分子，例如抑制性受体，例如PD
‑
1结合，其中，在特异性靶向部分与其靶标结合并且ICIM结合/调节部分与免疫细胞上的效应物分子的结合后，免疫细胞活性(例如免疫细胞发动免疫攻击的能力)下调，例如，通过依赖于免疫细胞上效应物分子聚集的抑制性信号。在一些实施方式中，工程化的多特异性化合物包括额外的结合部分使得其结合超过两种特异性分子，诸如但不限于3种或4种。
[0021]在一些实施方式中，治疗化合物包括ICIM结合/调节部分并具有以下特性中的一种或两种：(a)当治疗化合物与其靶标结合时免疫细胞的下调水平大于当治疗化合物未与其靶标结合时；以及(b)当与免疫细胞上的细胞表面抑制性受体例如PD
‑
1接合时，治疗化合物不抑制或基本上不抑制细胞表面抑制性受体结合内源性配体的能力。
[0022]在一些实施方式中，当治疗化合物与其靶标结合时免疫细胞的下调水平大于治疗化合物未与其靶标结合时。在实施方式中，靶标结合的治疗化合物的下调水平等于或为未与其靶标结合时所见的水平的1.5倍、2倍、4倍、8倍或10倍。在实施方式中，当治疗化合物未与靶标结合时，它不或不显著下调免疫细胞。因此，抑制性受体例如PD
‑
1的无差别或有害的激动被最小化或消除。例如，当治疗化合物与免疫细胞结合但未与靶向部分结合时，治疗化合物与抑制性免疫检查点分子的接合不会导致下调或不会导致显著下调，例如，治疗化合物结合的免疫细胞上的抑制性受体未聚集或未充分聚集以产生足以下调或显著抑制免疫细胞的抑制性信号。
[0023]在实施方式中，当与免疫细胞上的细胞表面抑制性受体例如PD
‑
1接合时，治疗化合物不抑制或基本上不抑制细胞表面抑制性受体结合内源性配体的能力。在一些实施方式中，治疗化合物可以结合PD
‑
1上的PD
‑
L1/2结合位点。因此，抑制性受体例如PD
‑
1的无差别或有害的拮抗被最小化或消除。在实施方式中，治疗化合物与免疫细胞上的抑制性受体例如PD
‑
1的结合不妨碍或基本上不妨碍抑制性受体结合天然配体例如PD
‑
L1的能力。在实施
方式中，治疗化合物与免疫细胞上的免疫抑制性受体例如PD
‑
1的结合比在没有治疗化合物的情况下所见的天然配体例如PD
‑
L1的结合减少小于50、40、30、20、10或5％。在一些实施方式中，部分是与PD
‑
1结合的抗体。在一些实施方式中，抗体是PD
‑
1激动剂。在一些实施方式中，抗体在可溶性PD
‑
1拮抗剂测定本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种包括抗MAdCAM抗体和抗PD
‑
1抗体的多肽，其中所述多肽包括第一多肽和第二多肽，其中：所述第一多肽包括和所述第二多肽的可变轻链结构域一起与PD
‑
1结合的可变重链结构域，直接或间接连接至所述抗MAdCAM抗体；并且所述第二多肽包括和所述第一多肽的可变重结构域一起与PD
‑
1结合的所述可变轻链结构域。2.根据权利要求1所述的多肽，其中：所述第一多肽具有下式：V
H
‑
H
c
‑
接头
‑
C1，其中：V
H
是和所述可变轻链结构域一起与PD
‑
1结合的所述可变重结构域；H
c
是包括CH1
‑
CH2
‑
CH3结构域的抗体的重链，所述接头是肽接头，并且C1是所述抗MAdCAM抗体，以及。3.根据权利要求1和2所述的多肽，其中，所述第二多肽具有下式：V
L
‑
L
c
，其中：V
L
是可变轻链结构域；并且Lc是轻链结构域。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的多肽，其中，所述肽接头是甘氨酸/丝氨酸接头。5.根据权利要求4所述的多肽，其中所述甘氨酸/丝氨酸接头具有(GGGGS)
n
的氨基酸序列，其中n为1、2、3或4。6.根据权利要求1
‑
5中任一项所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体是scFV抗体。7.根据权利要求6所述的多肽，其中所述scFV抗体具有下式：VH
SC
‑
L
SC
‑
VL
SC
，其中：VH
SC
包括和所述VL
SC
一起与MAdCAM结合的可变重链结构域；L
SC
是肽接头；并且VL
SC
包括和所述VH
SC
一起与MAdCAM结合的可变轻链结构域。8.根据权利要求1所述的多肽，其中：所述第一多肽具有下式：V
H
‑
H
c
‑
接头
‑
C1，其中：V
H
是和所述可变轻链结构域一起与PD
‑
1结合的所述可变重结构域；H
c
是包括CH1
‑
CH2
‑
CH3结构域的抗体的重链，所述接头是肽接头，并且C1是所述抗MAdCAM抗体；以及所述第二多肽具有下式：V
L
‑
L
c
，其中：V
L
是可变轻链结构域；并且Lc是轻链结构域。9.根据权利要求8所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体是scFV抗体。10.根据权利要求9所述的多肽，其中所述scFV抗体具有下式：
VL
SC
‑
L
SC
‑
VH
SC
，其中：VH
SC
包括和所述VL
SC
一起与MAdCAM结合的可变重链结构域；L
SC
是肽接头；并且VL
SC
包括和所述VH
SC
一起与MAdCAM结合的可变轻链结构域。11.根据权利要求1
‑
10中任一项所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体与细胞上表达的MAdCAM结合。12.根据权利要求1
‑
11中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体在与PD
‑
1结合时是PD
‑
1激动剂。13.根据权利要求12所述的多肽，其中，所述激动剂在PD
‑
1拮抗测定中对PD
‑
1不具有任何显著的拮抗活性。14.根据权利要求1
‑
13中任一项所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体包括如MAdCAM抗体表1或2中所示的序列。15.根据前述权利要求中任一项的多肽，其中，所述PD
‑
1抗体包括如PD
‑
1抗体表4或PD
‑
1抗体表5中所示的序列。16.根据权利要求2所述的多肽，其中，所述恒定结构域是IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恒定结构域。17.根据权利要求1
‑
16中任一项所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体重链可变区包括如MAdCAM Ab表2中提供的重链可变区。18.根据权利要求17所述的多肽，其中，所述重链可变区是MAdCAM Ab表2的克隆ID:6、75或79的重链可变区。19.根据权利要求17所述的多肽，其中，所述重链可变包括MAdCAM Ab表2的6、75或79的重结构域的CDR。20.根据权利要求17所述的多肽，其中，所述重链可变区包括SEQ ID NO:414、SEQ ID NO:591、或SEQ ID NO:599的序列。21.根据权利要求17所述的多肽，其中，所述重链可变区包括：SEQ ID NO:359的第一CDR、SEQ ID NO:170的第二CDR和SEQ ID NO:360的第三CDR；SEQ ID NO:90的第一CDR、SEQ ID NO:91的第二CDR和SEQ ID NO:92的第三CDR；或SEQ ID NO:135的第一CDR、SEQ ID NO:381的第二CDR和SEQ ID NO:382的第三CDR。22.根据权利要求1
‑
21中任一项所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体重链可变区连接至PD
‑
1抗体链的C末端。23.根据权利要求1所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体包括轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQ ID NO:415、SEQ ID NO:592或SEQ ID NO:600的序列或如MAdCAM Ab表2中提供的VL序列。24.根据权利要求22所述的多肽，其中，所述抗MAdCAM抗体轻链可变区：SEQ ID NO:361的第一CDR、SEQ ID NO:362的第二CDR和SEQ ID NO:363的第三CDR；SEQ ID NO:93的第一CDR、SEQ ID NO:87的第二CDR和SEQ ID NO:94的第三CDR；或SEQ ID NO:383的第一CDR、SEQ ID NO:384的第二CDR以及SEQ ID NO:385的第三CDR。25.根据权利要求16所述的多肽，其中，所述恒定结构域包括SEQ ID NO:45的序列。26.根据权利要求1
‑
25中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体重链可变区是如
PD
‑
1抗体表4中提供的重链可变区。27.根据权利要求1
‑
25中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体重链可变区是PD
‑
1抗体表4的克隆ID：PD1AB4(SEQ ID NO:637)、PD1AB30(SEQ ID NO:769)、PD1AB17(SEQ ID NO:704)、PD1AB18(SEQ ID NO:710)、PD1AB20(SEQ ID NO:724)、PD1AB25(SEQ ID NO:755)的重链可变区。28.根据权利要求1
‑
25中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体重链可变区包括PD
‑
1抗体表4的PD1AB4、PD1AB30、PD1AB17、PD1AB18、PD1AB20或PD1AB25的重链结构域的CDR。29.根据权利要求1
‑
25中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体重链可变区包括SEQ ID NO:639、757、706、712或726、757的第一CDR，SEQ ID NO:69、758、707、713、727或758的第二CDR，以及SEQ ID NO:640、759、708、714、728或759的第三CDR。30.根据权利要求1
‑
25中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体重链可变区包括：SEQ ID NO:639的第一CDR、SEQ ID NO:69的第二CDR和SEQ ID NO:640的第三CDR；SEQ ID NO:757的第一CDR、SEQ ID NO:758的第二CDR和SEQ ID NO:759的第三CDR；SEQ ID NO:706的第一CDR、SEQ ID NO:707的第二CDR和SEQ ID NO:708的第三CDR；SEQ ID NO:712的第一CDR、SEQ ID NO:713的第二CDR和SEQ ID NO:714的第三CDR；或SEQ ID NO:726的第一CDR、SEQ ID NO:727的第二CDR和SEQ ID NO:728的第三CDR。31.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体轻链可变区是PD
‑
1抗体表4的克隆ID：PD1AB4(SEQ ID NO:638)、PD1AB30(SEQ ID NO:756)、PD1AB17(SEQ ID NO:705)、PD1AB18(SEQ ID NO:711)、PD1AB20(SEQ ID NO:725)、PD1AB25(SEQ ID NO:756)的轻链可变区。32.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体轻链可变区包括PD
‑
1抗体表4的PD1AB4、PD1AB30、PD1AB17、PD1AB18、PD1AB20或PD1AB25的轻链结构域的CDR。33.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体轻链可变区包括SEQ ID NO:641、709、715、729或760的第一CDR，SEQ ID NO:362、716、420或378的第二CDR，以及SEQ ID NO:642、421、717、730或761的第三CDR。34.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体轻链可变区包括：SEQ ID NO:641的第一CDR、SEQ ID NO:362的第二CDR和SEQ ID NO:642的第三CDR；SEQ ID NO:709的第一CDR、SEQ ID NO:362的第二CDR和SEQ ID NO:421的第三CDR；SEQ ID NO:715的第一CDR、SEQ ID NO:716的第二CDR和SEQ ID NO:717的第三CDR；SEQ ID NO:729的第一CDR、SEQ ID NO:420的第二CDR和SEQ ID NO:730的第三CDR；或SEQ ID NO:760的第一CDR、SEQ ID NO:378的第二CDR和SEQ ID NO:761的第三CDR。35.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体包括：包括SEQ ID NO:639的第一CDR、SEQ ID NO:69的第二CDR和SEQ ID NO:640的第三CDR的重链可变区以及包括SEQ ID NO:641的第一CDR、SEQ ID NO:362的第二CDR和SEQ ID NO:642的第三CDR的轻链可变区；包括SEQ ID NO:757的第一CDR、SEQ ID NO:758的第二CDR和SEQ ID NO:759的第三CDR的重链可变区以及包括SEQ ID NO:760的第一CDR、SEQ ID NO:378的第二CDR和SEQ ID NO:
761的第三CDR的轻链可变区；包括SEQ ID NO:706的第一CDR、SEQ ID NO:707的第二CDR和SEQ ID NO:708的第三CDR的重链可变区以及包括SEQ ID NO:709的第一CDR、SEQ ID NO:362的第二CDR和SEQ ID NO:421的第三CDR的轻链可变区；包括SEQ ID NO:712的第一CDR、SEQ ID NO:713的第二CDR和SEQ ID NO:714的第三CDR的重链可变区以及包括SEQ ID NO:715的第一CDR、SEQ ID NO:716的第二CDR和SEQ ID NO:717的第三CDR的轻链可变区；包括SEQ ID NO:726的第一CDR、SEQ ID NO:727的第二CDR和SEQ ID NO:728的第三CDR的重链可变区以及包括SEQ ID NO:729的第一CDR、SEQ ID NO:420的第二CDR和SEQ ID NO:730的第三CDR的轻链可变区；或包括SEQ ID NO:757的第一CDR、SEQ ID NO:758的第二CDR和SEQ ID NO:759的第三CDR的重链可变区以及包括SEQ ID NO:760的第一CDR、SEQ ID NO:378的第二CDR和SEQ ID NO:761的第三CDR的轻链可变区。36.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体包括：包括SEQ ID NO:637、SEQ ID NO:769、SEQ ID NO:704、SEQ ID NO:710、SEQ ID NO:724或SEQ ID NO:755的序列的重链，以及包括SEQ ID NO:638、SEQ ID NO:756、SEQ ID NO:705、SEQ ID NO:711、SEQ ID NO:725或SEQ ID NO:756的序列的轻链可变区。37.根据权利要求1
‑
30中任一项所述的多肽，其中，所述抗PD
‑
1抗体包括：包括SEQ ID NO:637的序列的重链可变区以及包括SEQ ID NO:638的序列的轻链可变区；包括SEQ ID NO:704的序列的重链可变区以及包括SEQ ID NO:705的序列的轻链可变区；包括SEQ ID NO:710的序列的重链可变区以及包括SEQ ID NO:711的序列的轻链可变区；包括SEQ ID NO:724的序列的重链可变区以及包括SEQ ID NO:725的序列的轻链可变区；包括SEQ ID NO:755的序列的重链可变区以及包括SEQ ID NO:756的序列的轻链可变区；或包括SEQ ID NO:769的序列的重链可变区以及包括SEQ ID NO:756的序列的轻链可变区。38.一种多肽，具有下式：PD1VH
‑
ConstantDomain
‑
接头A
‑
MAdCAMscFv,其中，所述PD1VH是本文提供的任何PD
‑
1抗体的PD
‑
1重链可变结构域；所述ConstantDomain是IgG1恒定结构域，或任何其他恒定结构域，诸如IgG2、IgG3或IgG4；接头A是G/S或G/A接头，诸如本文提供的那些，MAdCAMscFv具有下式：MAdCAMVH
‑
接头B
‑
MAdCAMVK，其中MAdCAMVH是本文提供的MAdCAM重链可变结构域；
接头B是G/S或G/A接头，诸如本文提供的那些，并且MAdCAMVK是本文提供的轻链可变结构域。39.根据权利要求38所述的多肽，其中，所述PD
‑
1重链可变结构域是如PD
‑
1抗体表4中提供的重链可变区。40.根据权利要求38所述的多肽，其中，所述PD
‑
1重链可变结构域是PD
‑
1抗体表4的克隆ID：PD1AB4(SEQ ID NO:637)、PD1AB30(SEQ ID NO:769)、PD1AB17(SEQ ID NO:704)、PD1AB18(SEQ ID NO:710)、PD1AB20(SEQ ID NO:724)、PD1AB25(SEQ ID NO:755)的重链可变区。41.根据权利要求38所述的多肽，其中，所述PD
‑
1重链...

【专利技术属性】
技术研发人员：N，
申请(专利权)人：潘迪恩运营公司，
类型：发明
国别省市：