CD39的高亲和力抗体及其用途制造技术

本发明专利技术公开识别CD39的高亲和力抗体。所述抗体能够中和表达CD39的细胞上的CD39的ATP酶活性。这样的抗体可用于治疗由CD39活性介导的癌症和其他疾病。癌症和其他疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD39的高亲和力抗体及其用途
专利

[0001]本专利技术涉及识别CD39的新抗体，CD39也称为胞外核苷三磷酸二磷酸水解酶
‑
1(ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase
‑
1)或NTPDase 1。CD39抗体可用于治疗免疫性疾病和癌症。
[0002]专利技术背景
[0003]癌细胞的一个标志是，它们能够通过获得性表达免疫应答的多种负调节因子，来逃避免疫介导的破坏作用。这种现在常常称为“免疫检查点”的负调节因子包括表面受体，如CTLA
‑
4(CD152)和PD
‑
L1(CD274)。靶向免疫反应的这些关键调节因子已经成为一种新的治疗选择，来防止肿瘤介导的免疫抑制以及建立长效的癌症特异性免疫应答。Bonnefoy等，OncoImmunology，4：5，e1003015(2015)。抗体介导的这些免疫调节途径的阻断已导致有希望的临床结果。然而，由于在不到50％的患者中观察到客观反应并且这些反应是肿瘤依赖性的，因此鉴定可以在协同治疗关联方案中作为靶点的替代性非冗余抑制/免疫抑制途径，是十分有意义的。
[0004]在参与免疫应答调节的分子中，CD39(胞外核苷酸酶三磷酸二磷酸水解酶
‑
1，NTPDase1)是一种有希望的癌症免疫疗法的新靶标。CD39是一种膜整合型蛋白，具有两个跨膜结构域和一个大的胞外区(Maliszewski等，1994)，具有核苷三磷酸二磷酸水解酶活性(Wang和Guidotti，1996)。CD39在细胞表面上定位后具有催化活性，并且其糖基化对正确的蛋白质折叠、膜靶向和酶活性至关重要。(Smith等，Biochim.Biophys.Acta.，1386：65
‑
78(1998))。
[0005]CD39在脾、胸腺、肺和胎盘中组成型地表达(Enjyoji等，Nat.Med.，5：1010
‑
1017(1999)；Zimmermann H.，Trends Pharmacol.Sci.，20：231
‑
236(1999))；Mizumoto等，Nat.Med.，8：358
‑
365(2002)；Kapojos等，Eur.J.Pharmacol.，501：191
‑
198(2004))，并且在这些器官中，它主要与内皮细胞和免疫细胞群有关，所述免疫细胞群如B细胞、自然杀伤(NK)细胞、树突细胞、朗格汉斯细胞、单核细胞、巨噬细胞、肾小球系膜细胞、嗜中性白细胞和调节性T细胞(Treg)。(Dwyer等，Purinergic Signal，3：171
‑
180(2007))。CD39表达通过转录因子Sp1(Eltzschig等(2009)同上)、Stat3和锌指蛋白生长因子非依赖性
‑
1转录因子(Chalmin等，Immunity，36：362
‑
373(2012))，受几种促炎性细胞因子、氧化应激和缺氧的调节(Deaglio S.和Robson S.C.，Adv.Pharmacol.，61：301
‑
332(2011)；Eltzschig等，Blood，113：224
‑
232(2009))。此外，CD39的表达在几种实体肿瘤中增加，所述实体肿瘤例如结肠直肠癌、头颈癌和胰腺癌，以及慢性淋巴细胞性白血病，表明这种酶也参与了恶性疾病的发生和进展(Bastid等，Oncogene，32(24)：1743
‑
1751(2013))。已显示可溶性催化活性形式的CD39在人和鼠血液中循环(Yegutkin等，FASEB.J.，26：3875
‑
3883(2012))。
[0006]CD39与CD73一起通过将胞外三磷酸腺苷(ATP)和二磷酸腺苷(ADP)水解成一磷酸腺苷(AMP)(通过CD39)以及将AMP水解成腺苷(通过CD73)来调节嘌呤能信号的持续时间、规模和化学性质。CD39和CD73都在调节性T细胞(Treg，以前称为抑制性T细胞)上高度表达，调节性T细胞是一种有助于维持免疫系统的体内平衡的CD4+亚群。在CD39阳性Treg浸润的癌
症中，CD39起着关键作用，因为它通过启动腺苷的产生增加了肿瘤血管生成并抑制免疫抗肿瘤反应。(Stagg等，Proc.Natl.Acad.Sci USA，107(4)：1547
‑
1552(2010))
[0007]骨髓来源的抑制细胞(MDSCs)也通过CD39介导的机制促进肿瘤生长。例如，CD39表达在从癌症患者分离的MDSC上升高，并且与来自健康供体的MDSC相比，这些细胞显示出对于抗肿瘤T细胞的抑制作用。
[0008]此外，来自CD39敲除小鼠的Treg被组成型地激活，过度增殖，并且丧失了它们的抑制功能。与野生型小鼠相比，敲除小鼠中的黑素瘤生长以及肺转移、结肠转移和肉瘤也显著减少，还观察到了血管生成的严重缺陷。
[0009]CD39抑制是具有前景的克服天然抗肿瘤效应T细胞活性的Treg抑制的方法。施用CD39抑制剂，如抗CD39抗体和/或其抗原结合片段，可提供一种手段，恢复或支持在许多癌症中被抑制的抗肿瘤免疫应答。
[0010]鉴于通过募集免疫效应细胞应答和抑制对效应细胞激活的抑制，在研发治疗癌症的新方法方面中取得的进展，需要新的活性CD39抑制剂和方法。还不断需要研发针对CD39的疗法以及评估抗CD39抗体活性，所述治疗可以单独或结合其他免疫检查点抑制剂。
[0011]专利技术概述
[0012]本专利技术提供了以高亲和力结合CD39的新抗体。本专利技术的抗CD39抗体可用于在体外或体内检测人CD39、抑制CD39 NTPDase1活性，和/或中和人CD39介导的免疫抑制。
[0013]本专利技术还提供了制备和使用本文所述的抗CD39抗体和/或其抗原结合片段的方法、以及可用于检测样品中的CD39、或用于治疗或预防个体中与CD39活性相关的疾病的方法中的各种组合物。
[0014]本专利技术还提供了能够结合人CD39的新抗体，其中抗体的抗原结合结构域包含一组六个CDR，即CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3、CDR
‑
L1、CDR
‑
L2和CDR
‑
L3，选自以下定义的CDR组：
[0015][0016][0017]在一个实施方案中，根据本专利技术的抗CD39抗体包含VH和VL结构域，其中两个可变结构域包含选自以下的氨基酸序列：
[0018]SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:14SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:15SEQ ID NO本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种能够结合人CD39的抗体或其抗原结合部分，其中抗体的抗原结合部分包含一组六个CDR，CDR
‑
H1、CDR
‑
H2、CDR
‑
H3、CDR
‑
L1、CDR
‑
L2和CDR
‑
L3，选自如下的CDR组：
2.一种包含VH和VL结构域的抗CD39抗体，其中两个可变结构域包含选自以下的氨基酸序列：
3.根据权利要求1的抗体或其抗原结合片段，进一步包含Fc区，所述Fc区包含SEQ ID NO:18的残基104
‑
330的氨基酸序列。4.一种编码结合人CD39的单克隆抗体的核酸分子，其中编码重链的核苷酸序列包含编码选自如下的重链CDR组1
‑
6的CDR
‑
H1、CDR
‑
H2和CDR
‑
H3的核苷酸且其中编码轻链的核苷酸序列包含编码选自如下的轻链CDR组1
‑
6的CDR
‑
L1、CDR
‑
L2和CDR<...

【专利技术属性】
技术研发人员：任芳，宫世勇，吴辰冰，
申请(专利权)人：上海岸迈生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：