一种多肽、含有其的蛋白及应用制造技术

本发明专利技术涉及一种多肽、含有其的蛋白及应用。多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.13、SEQ ID No.20和SEQ ID No.27所示中的至少一种，其具有细胞膜粘附功能。有细胞膜粘附功能。有细胞膜粘附功能。

A polypeptide, a protein containing it and its application

【技术实现步骤摘要】
一种多肽、含有其的蛋白及应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学领域，特别涉及一种具有细胞膜粘附功能的多肽。

技术介绍

[0002]活性氧(ROS)是细胞代谢中已知的有毒产物。它主要由大多数哺乳动物细胞中的线粒体产生，充当信号分子，并在各种病毒感染期间参与氧化应激。
[0003]对于脊椎动物和无脊椎动物来说，生物体在正常状况下，细胞会陆续的产生ROS，也在不断地清除活性氧，因而不会造成自由基对机体的损伤。但是当生物体ROS含量过高时，会造成包括蛋白质，脂质和核酸在内的生物分子的氧化损伤，进而可能会导致细胞功能障碍和行为改变，例如：加速衰老，异常增殖，炎症反应失调等，严重的通常导致细胞死亡，例如：肿瘤，凋亡和自噬。现有技术发现，通过SODs可以降解过量的ROS，以使ROS保持在正常的水平下，维持细胞的稳态。然而，现有的SODs均需要ROS释放到细胞外才可实现降解，这会导致ROS被SODs降解到正常的水平前造成对周围细胞的不利影响。

技术实现思路

[0004]本专利技术之一提供了一种多肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.13、SEQ ID No.20和SEQ ID No.27所示中的至少一种。
[0005]本专利技术之二提供了一种含有如本专利技术之一所述多肽的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.5和SEQ ID No.9所示中的至少一种。
[0006]本专利技术之三提供了一种编码如本专利技术之一所述的多肽的核酸。
[0007]在一个具体实施方式中，所述核酸的碱基序列如SEQ ID No.14、SEQ ID No.21和SEQ ID No.28所示中的至少一种。
[0008]本专利技术之四提供了一种编码如本专利技术之二所述的蛋白的核酸。
[0009]在一个具体实施方式中，所述核酸的碱基序列如SEQ ID No.2、SEQ ID No.6和SEQ ID No.10所示中的至少一种。
[0010]本专利技术之五提供了根据本专利技术之一所述的多肽、本专利技术之二所述的蛋白、本专利技术之三和本专利技术之四中任意一项所述的核酸中的一种在用于细胞膜粘附中的应用。该细胞膜粘附功能，可以用于昆虫、昆虫细胞、动物、动物细胞、人或人源细胞，因此，当将其用于动物或人时，也可以表述为根据本专利技术之一所述的多肽、本专利技术之二所述的蛋白、本专利技术之三和本专利技术之四中任意一项所述的核酸中的一种在用于制备用于细胞膜粘附的药物中的应用。
[0011]本专利技术之六提供了根据本专利技术之二所述的蛋白或本专利技术之四中所述的核酸在用于制备降解存在于细胞内的ROS的药物中的应用。
[0012]本专利技术的有益效果：
[0013]本专利技术首次发现MbSOD49、MbSOD58或MbSOD67可以将含量过高的ROS降解在细胞内，以使ROS保持在正常的水平下，维持细胞的稳态。
[0014]本专利技术进一步发现MbSOD49、MbSOD58或MbSOD67之所以能够将ROS降解在细胞内是
由于MbSOD49、MbSOD58或MbSOD67上的一段多肽能够粘附在细胞膜上，从而使MbSOD49、MbSOD58或MbSOD67整个蛋白粘附在细胞膜上，并进一步通过MbSOD49、MbSOD58或MbSOD67蛋白中膜结合区域以外的部分将含量过高ROS降解在细胞内。
附图说明
[0015]图1显示了pIZT/V5
‑
His
‑
MbSOD49重组质粒、pIZT/V5
‑
His
‑
MbSOD58和pIZT/V5
‑
His
‑
MbSOD67重组质粒在High Five细胞中表达的Western blot。
[0016]图2显示了免疫荧光实验检测MbSOD49、MbSOD58和MbSOD67在High Five细胞中的表达情况。图中显示随着时间的延长三种蛋白在细胞质中的量逐渐减少。
[0017]图3显示了MbSOD49 Spli221细胞膜蛋白的Western blot。
[0018]图4显示了MbSOD58 Spli221细胞膜蛋白的Western blot。
[0019]图5显示了MbSOD67 Spli221细胞膜蛋白的Western blot。
[0020]图6显示了MbSOD49、MbSOD58、MbSOD67对MbBV感染的Spli221细胞中胞内ROS的降解情况。
[0021]图7 Western Blot检测pIZT/V5
‑
His
–
MbSOD49
ΔBIg
、pIZT/V5
‑
His
–
MbSOD58
ΔBIg
、pIZT/V5
‑
His
–
MbSOD67
ΔBIg
的表达及表达蛋白的分泌性。
[0022]图8显示了MbSOD49
ΔBIg Spli221、MbSOD58
ΔBIg Spli221、MbSOD67
ΔBIg Spli221细胞膜蛋白的Western blot。
[0023]图9显示了MbSOD49
ΔBIg
、MbSOD58
ΔBIg
和MbSOD67
ΔBIg
对MbBV感染的Spli221细胞中胞内ROS的降解情况。
[0024]图10显示了MbSOD49、MbSOD58和MbSOD67转录水平的qRT
‑
PCR检测图。
[0025]图11显示了沉默MbSOD49、MbSOD58和MbSOD67后斜纹夜蛾幼虫血淋巴细胞中的ROS含量。
[0026]图12显示了MbSOD49、MbSOD58和MbSOD67在人正常肺上皮(BEAS 2B)细胞中的表达。
[0027]图13显示了MbSOD49、MbSOD58、MbSOD67对CBX刺激宣威肺癌细胞产生的胞内ROS的降解情况。
具体实施方式
[0028]以下通过优选的实施案例的形式对本专利技术的上述内容作进一步的详细说明，但其不构成对本专利技术的限制。
[0029]如无特别说明，本专利技术的实施例中的试剂均可通过商业途径购买。
[0030]实施例1
[0031]1.MbSOD49、MbSOD58和MbSOD67全长的克隆
[0032]双斑侧沟茧蜂的MbSOD49蛋白共172个氨基酸，如SEQ ID No.1所示；MbSOD49的cDNA共531bp，如SEQ ID No.2所示。扩增MbSOD49全长的特异引物为49
‑
F(如SEQ ID No.3所示)和49
‑
R(如SEQ ID No.4所示)。
[0033]双斑侧沟茧蜂的MbSOD58蛋白共205个氨基酸，如SEQ ID No.5所示；MbSOD58的cDNA共630bp，如SEQ 本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其氨基酸序列如SEQ ID No.13、SEQ ID No.20和SEQ ID No.27所示中的至少一种。2.一种含有如权利要求1所述多肽的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.5和SEQ ID No.9所示中的至少一种。3.一种编码如权利要求1所述的多肽的核酸。4.根据权利要求3所述的核酸，其特征在于，所述核酸的碱基序列如SEQ ID No.14、SEQ ID No.21和SEQ ID No.28所示...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗开珺，孟江慧，张力丹，龙瑾，
申请(专利权)人：云南大学，
类型：发明
国别省市：