经修饰的维生素D羟化酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一系列经修饰的维生素D羟化酶(Vdh)突变体，所述突变体包含一或多个位置的氨基酸取代，与其野生型Vdh相比，其中所述经修饰的Vdh具有更高效的将骨化二醇催化生成骨化三醇的活性。化三醇的活性。

【技术实现步骤摘要】
经修饰的维生素D羟化酶突变体及其应用


[0001]本专利技术涉及酶工程领域。具体而言，本专利技术涉及经修饰的维生素D羟化酶(Vdh)及其在生产骨化三醇中的应用。

技术介绍

[0002]维生素D3(胆钙化醇，Cholecalciferol，VD3)是动物生长、发育、繁殖、维持生命和保持健康必不可少的一种脂溶性维生素。其最主要的生理功能是促进肠道钙吸收，诱导骨质钙磷沉着，可用于治疗佝偻病及骨质软化病。近几十年来随着研究的深入，维生素D3还具有调节细胞生长的作用，包括诱导细胞的正常分化和抑制细胞的过渡增殖的作用，可降低常见癌症的发生率。实际上，VD3只是一种活性较低的激素前体，需要经肝、肾两步代谢转化为生理活性形式。活性维生素D3主要有阿法骨化醇(1
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羟基维生素D3，Alfacalcidol)、骨化二醇(25
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羟基维生素D3或Calcifediol)和骨化三醇(1，25
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二羟基维生素D3，Calcitriol)这3种形式。
[0003]动物内源合成的维生素D3是由暴露部位(皮肤)中的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种维生素D羟化酶突变体，所述突变体在P450酶的蛋白序列基础上，包含184、187、216、231、384位置的一个或多个特定残基处突变。2.如权利要求1所述的突变体，其特征在于，位置184取代为F、H或Y，位置187取代为A或V，位置216取代为C、D或S，位置231取代为S、C、T或N，位置384取代为A、L或H。3.如权利要求2所述的突变体，其特征在于，所述突变体为M184Y
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M231N、E216D
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M231T、M184Y
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E216S
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E384L、M184F
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M231C、L187A
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E216S
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E384H、M184Y
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L187V
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E216D
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E384L或M184Y
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L187A
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E216C
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M231C
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【专利技术属性】
技术研发人员：谢新开，范俊英，曾唯实，徐伟，
申请(专利权)人：苏州引航生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：