Lpp或其突变体作为分子伴侣在大肠杆菌中分泌表达重组蛋白的应用制造技术

本发明专利技术公开了Lpp或其突变体作为分子伴侣在大肠杆菌中分泌表达重组蛋白的应用。本发明专利技术发明专利技术人意外发现Lpp作为目的蛋白的分子伴侣，有利于包含分子伴侣和目的蛋白的重组蛋白的分泌表达，产量高，且对大肠杆菌菌体生长的影响小，无显著的菌体裂解情况，易于实现高密度发酵，便于工业化生产。通过该应用，本发明专利技术还提供了一种用于大肠杆菌分泌表达的融合蛋白以及一种大肠杆菌分泌表达融合蛋白的方法。及一种大肠杆菌分泌表达融合蛋白的方法。及一种大肠杆菌分泌表达融合蛋白的方法。

【技术实现步骤摘要】
protein in Klebsiella planticola owing to induced secretion into the culture medium)、角质酶(重组Thermobifida fusca角质酶的高效胞外表达及其分子机制)、外膜蛋白OmpF(Excretion of Human
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Endorphin into Culture Medium by Using Outer Membrane Protein F as a Fusion Partner in Recombinant Escherichia coli)等通过共表达或融合蛋白可促进外源蛋白分泌至发酵液上清。Lpp'
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OmpA'(Display of beta
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lactamase on the Escherichia coli surface:outer membrane phenotypes conferred by Lpp'
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OmpA'
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beta
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lactamase fusions)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Lpp或其突变体作为分子伴侣在大肠杆菌中分泌表达重组蛋白的应用，其特征在于：所述的重组蛋白的结构如下：A
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B
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C；其中，A为分子伴侣，选自Lpp或mLpp，m表示突变体；B为缺失或用于蛋白酶识别的连接肽；C为目的蛋白。2.根据权利要求1所述Lpp或其突变体作为分子伴侣在大肠杆菌中分泌表达重组蛋白的应用，其特征在于：所述的Lpp的氨基酸序列如下所示：MKATKLVLGAVILGSTLLAGCSSNAKIDQLSSDVQTLNAKVDQLSNDVNAMRSDVQAAKDDAARANQRLDNMATKYRK。3.根据权利要求1所述Lpp或其突变体作为分子伴侣在大肠杆菌中分泌表达重组蛋白的应用，其特征在于：所述的用于蛋白酶识别的连接肽为DDDDK。4.根据权利要求1所述Lpp或其突变体作为分子伴侣在大肠杆菌中分泌表达重组蛋白的应用，其特征在于：所述的目的蛋白是长度为20～50个氨基酸的目的蛋白；进一步是长度为27～31个氨基酸的目的蛋白；包括但不限于GLP
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1或其类似物、胰岛素类、蛋白酶类。5.一种用于大肠杆菌分泌表达的融合蛋白，其特征在于：是基于权利要求1～4任一项所述的应用设计得到；所述的融合蛋白的结构式如下：A
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B
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C；其中，A为分子伴侣，选自Lpp或mLpp，m表示突变体；B为缺失或用于蛋白酶识别的连接肽；C为目的蛋白。6.一种大肠杆菌分泌表达融合蛋白的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书二页说明书九页序列表六页附图四页，
申请(专利权)人：珠海联邦制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：