一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法，包括以下步骤，供试品溶液的制备、对照品参照物溶液的制备、各单味饮片参照物溶液的制备、各阴性对照溶液的制备、色谱条件和测试，分别精密吸取供试品溶液、对照品参照物溶液、各单味饮片参照物溶液和各阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明专利技术具有稳定性好、精密度高、重现性好、便捷且易于掌握等优点。于掌握等优点。于掌握等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法


[0001]本专利技术属于中药检测
，具体涉及一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法。

技术介绍

[0002]古代经典名方是组方合理、疗效确切、具有明显特色与优势的古代中医典籍所记载的方剂，是我国医学先贤留给后人的宝贵财富，也是我国中医药宝库的重要组成部分，至今仍广泛使用。但因其调配、携带、煎煮、汤液味苦量大等不便因素，严重影响其临床应用，不能适应现代人的生活要求。为了保持汤剂的优势，克服汤剂的种种不足，在国家科技部“重大新药创制”科技重大专项项目的大力支持下及院士、行业专家的反复探讨后，以经典名方标准汤的质量属性为评价指标，生产出与其在质量及药效基本保持一致的标准颗粒剂。
[0003]乌药汤作为国家《古代经典名方目录(第一批)》收载的品种，载于《兰室秘藏》(金
·
李东垣)，由乌药、木香、香附子(炒)、当归、甘草5味药组成，本方行气和血止痛，“治妇人血海疼痛”，常用于血气凝滞之痛经。方中乌药、香附二药共为君药，乌药善理胸腹寒冷逆滞之气，并通行上下，散寒止痛，香附辛苦入肝胆二经，开郁散结，疏肝络之郁气，辅以木香除胀消痞，调胃肠气机，结合乌药共奏行气止痛之效。当归既可补血又可活血，通调肝脾之气血而调经止痛，甘草益气缓急，调和诸药。文献报道，该方及其加味方在治疗原发性痛经、溃疡性结肠炎、慢性萎缩性胃炎胃节律过缓等疾病中均有良好疗效。目前乌药汤标准颗粒及其复方制剂现有的质量研究较少，缺少一种有效手段对其进行质量控制。

技术实现思路

[0004]为解决前述问题，本专利技术提供一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法，全面反映乌药汤及其复方制剂的质量水平，为生产出与传统汤剂在质量及药效基本保持一致的标准颗粒剂提供指导。
[0005]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0006]一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0007](1)、供试品溶液的制备：取乌药汤标准汤剂粉末1g，精密称定，置锥形瓶中，加入95％乙醇25mL，超声30min，至室温后再加95％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；
[0008](2)、对照品参照物溶液的制备：取木香烃内酯、去氢木香烃内酯和甘草苷对照品适量，精密称定，加95％乙醇制成每1mL含0.2mg木香烃内酯、每1mL含0.5mg去氢木香烃内酯和每1mL含0.2mg甘草苷的溶液；
[0009](3)、各单味饮片参照物溶液的制备：分别取乌药标准汤剂粉末、木香标准汤剂粉末、炒香附标准汤剂粉末、当归标准汤剂粉末、甘草标准汤剂粉末各1g，精密称定，置锥形瓶中，加入95％乙醇25mL，超声30min，至室温后再加95％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，
分别得到乌药参照物溶液、木香参照物溶液、炒香附参照物溶液、当归参照物溶液、甘草参照物溶液；
[0010](4)、各阴性对照溶液的制备：取95％乙醇滤过，取续滤液，作为不含有乌药汤的空白阴性对照溶液；另分别取不含有乌药的乌药汤第一阴性对照标准汤剂、不含有木香的乌药汤第二阴性对照标准汤剂、不含有炒香附的乌药汤第三阴性对照标准汤剂、不含有当归的乌药汤第四阴性对照标准汤剂、不含有甘草的乌药汤第五阴性对照标准汤剂各1g，精密称定，置锥形瓶中，加入95％乙醇25mL，超声30min，至室温后再加95％乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，分别得到不含有乌药的乌药汤第一阴性对照溶液、不含有木香的乌药汤第二阴性对照溶液、不含有炒香附的乌药汤第三阴性对照溶液、不含有当归的乌药汤第四阴性对照溶液、不含有甘草的乌药汤第五阴性对照溶液；
[0011](5)、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为210nm
‑
365nm；柱温：25℃
‑
35℃；流速：0.8
‑
1.2mL/min；流动相：乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度脱洗；
[0012](6)、测试：分别精密吸取供试品溶液、对照品参照物溶液、各单味饮片参照物溶液和各阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0013]优选的，步骤(1)中，所述乌药汤标准汤剂粉末制备方法为：取乌药20g、木香20g、炒香附80g、当归20g、甘草20g，混合粉碎过2号筛得粗粉，取粗粉20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得。
[0014]优选的，步骤(3)中，所述乌药标准汤剂粉末、木香标准汤剂粉末、炒香附标准汤剂粉末、当归标准汤剂粉末和甘草标准汤剂粉末制备方法为：
[0015]乌药标准汤剂粉末制备：取乌药20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；
[0016]木香标准汤剂粉末制备：取木香20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；
[0017]炒香附标准汤剂粉末制备：取炒香附20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；
[0018]当归标准汤剂粉末制备：取当归20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；
[0019]甘草标准汤剂粉末制备：取甘草20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得。
[0020]优选的，步骤(4)中，所述不含有乌药的乌药汤第一阴性对照标准汤剂、不含有木香的乌药汤第二阴性对照标准汤剂、不含有炒香附的乌药汤第三阴性对照标准汤剂、不含有当归的乌药汤第四阴性对照标准汤剂和不含有甘草的乌药汤第五阴性对照标准汤剂制备方法为：
[0021]不含有乌药的乌药汤第一阴性对照标准汤剂的制备：取木香20g、炒香附80g、当归20g、甘草20g，混合粉碎过2号筛得粗粉，取粗粉20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即
得；
[0022]不含有木香的乌药汤第二阴性对照标准汤剂的制备：取乌药20g、炒香附80g、当归20g、甘草20g，混合粉碎过2号筛得粗粉，取粗粉20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、供试品溶液的制备：取乌药汤标准汤剂粉末1g，精密称定，置锥形瓶中，加入95%乙醇25mL，超声30min，至室温后再加95%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，得到供试品溶液；（2）、对照品参照物溶液的制备：取木香烃内酯、去氢木香烃内酯和甘草苷对照品适量，精密称定，加95%乙醇制成每1mL含0.2mg木香烃内酯、每1mL含0.5mg去氢木香烃内酯和每1mL含0.2mg甘草苷的溶液；（3）、各单味饮片参照物溶液的制备：分别取乌药标准汤剂粉末、木香标准汤剂粉末、炒香附标准汤剂粉末、当归标准汤剂粉末、甘草标准汤剂粉末各1g，精密称定，置锥形瓶中，加入95%乙醇25mL，超声30min，至室温后再加95%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，分别得到乌药参照物溶液、木香参照物溶液、炒香附参照物溶液、当归参照物溶液、甘草参照物溶液；（4）、各阴性对照溶液的制备：取95%乙醇滤过，取续滤液，作为不含有乌药汤的空白阴性对照溶液；另分别取不含有乌药的乌药汤第一阴性对照标准汤剂、不含有木香的乌药汤第二阴性对照标准汤剂、不含有炒香附的乌药汤第三阴性对照标准汤剂、不含有当归的乌药汤第四阴性对照标准汤剂、不含有甘草的乌药汤第五阴性对照标准汤剂各1g，精密称定，置锥形瓶中，加入95%乙醇25mL，超声30min，至室温后再加95%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，分别得到不含有乌药的乌药汤第一阴性对照溶液、不含有木香的乌药汤第二阴性对照溶液、不含有炒香附的乌药汤第三阴性对照溶液、不含有当归的乌药汤第四阴性对照溶液、不含有甘草的乌药汤第五阴性对照溶液；（5）、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250 mm， 内径为4.6 mm，硅胶粒径为5 μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为210nm
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365nm；柱温：25℃
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35℃；流速：0.8
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1.2mL/min；流动相：乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度脱洗；（6）、测试：分别精密吸取供试品溶液、对照品参照物溶液、各单味饮片参照物溶液和各阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。2.根据权利要求1所述的一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于：步骤（1）中，所述乌药汤标准汤剂粉末制备方法为：取乌药20g、木香20g、炒香附80g、当归20g、甘草20g，混合粉碎过2号筛得粗粉，取粗粉20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得。3.根据权利要求1所述的一种乌药汤高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于：步骤（3）中，所述乌药标准汤剂粉末、木香标准汤剂粉末、炒香附标准汤剂粉末、当归标准汤剂粉末和甘草标准汤剂粉末制备方法为：乌药标准汤剂粉末制备：取乌药20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；木香标准汤剂粉末制备：取木香20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；炒香附标准汤剂粉末制备：取炒香附20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；当归标准汤剂粉末制备：取当归20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，合并滤液，冷冻干燥，即得；甘草标准汤剂粉末制备：取甘草20g的加入400mL水浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮
30min，过滤，再加水400mL，武火煮沸，文火煎...

【专利技术属性】
技术研发人员：周巧敏，胡昌江，张开元，黄美华，陈蓉，梅国荣，黄宇，孙纪元，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：