RFC基因80GA突变位点的检测方法、试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术提供一种RFC基因80GA突变位点的检测方法，依据RFC基因80GA突变位点设计PCR引物组合以及特异检测荧光探针，对待测样品进行实时荧光定量PCR，从而对RFC基因在80GA位点碱基突变类型进行分型。本发明专利技术还提出所述PCR引物组合以及特异检测荧光探针在制备用于检测RFC基因80GA突变位点中的应用。本发明专利技术还提供用于检测RFC基因80GA突变位点的试剂盒。检测RFC基因80GA突变位点的试剂盒。检测RFC基因80GA突变位点的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
RFC基因80GA突变位点的检测方法、试剂盒及其使用方法


[0001]本专利技术涉及基因突变位点检测
，具体涉及一种RFC 基因80GA突变位点的检测方法、试剂盒及其使用方法。

技术介绍

[0002]基因组DNA在某一特定的核苷酸序列上发生转换、颠倒、插入或缺失，并且在群体中出现频率≥1%，称为基因多态性。基因多态性可能与某些生理代谢功能，药物敏感性有关，分子水平的诊断可以给予患者疾病预防，个体化治疗，预后判断等指导。
[0003]目前，RFC多态性基因型分析大多采用sanger测序法，或PCR
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PFLP检测技术，由于PCR
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PFLP技术依赖于限制性核酸内切酶消化以及电泳分析，往往会产生一些结果的误判。Sanger测序法则测序周期长，通量较低，需要昂贵的设备和复杂的操作，也不适用于大规模筛查或快速给出诊断结果，难以大规模推广。
[0004]人体内叶酸跨生物膜的运输主要通过三种方式介导：叶酸受体α（FRα; FOLR1），质子偶联叶酸转运蛋白（PCFT; SLC46A1）和还原性叶酸载本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.RFC 基因80GA突变位点的检测方法，其特征在于，所述方法为，依据RFC 基因80GA突变位点设计的PCR引物组合和特异检测荧光探针，对样本进行实时荧光定量PCR，进而鉴定RFC基因的野生型、纯合突变型和杂合型中的任意一种。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述PCR引物组合为：正向引物RFC
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F：5
’‑
CTGACTCCACCCCTCCT
‑3’
；反向引物RFC
‑
R：5
’‑
GGCGGCCGCCCGGCACCC
‑3’
。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述特异检测荧光探针为：探针1：荧光基团5
’‑
CGGCACCTCGTGTGCTAC
‑3’
淬灭基团；探针2：荧光基团5
’‑
CGGCGCCTCGTGTGCTAC
‑3’
淬灭基团。4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述PCR引物组合5
’
端所使用的荧光基团为适用于荧光PCR定量分析的荧光报告基团，包括FAM、VIC,、TET、HEX和ROX中的任意一种或多种；所述PCR引物组合3
’
淬灭的基团为MGB。5.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括RFC 基因80GA突变位点设计的PCR引物组合和特异检测荧光探针；所述PCR引物组合为：正向引物RFC
‑
F：5
’‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘健喆，任玉冰，王营，何强强，刘理顺，刘程章，
申请(专利权)人：深圳泰乐德医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：