用于治疗癌症的IL-15融合肽制造技术

本发明专利技术涉及一种融合多肽，所述多肽包含：a.白细胞介素

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗癌症的IL
‑
15融合肽
[0001]本专利技术涉及多肽治疗剂，例如用于治疗癌症的多肽治疗剂。
[0002]癌症是一个严重的持续公共卫生问题，在2005年全球5800万例死亡病例中占760万。此后，癌症发病率每年都在增加，预计到2030年将有1140万人死于癌症。
[0003]实体瘤占上述癌症的大部分。实体瘤起源于异常组织块，不包含囊肿或液体区域。这样的肿瘤可以是良性的(非癌性的)，但是在实体瘤癌症的情况下，实体瘤是恶性的(癌性的)。根据组成实体瘤的细胞类型，可将实体瘤分为三组：肉瘤；癌；和淋巴瘤。淋巴瘤在淋巴系统的腺体或淋巴结中逐渐形成，与被称为液体癌的白血病不同。肉瘤是起源于支持和结缔组织的癌症，例如骨、肌腱、软骨、肌肉和脂肪。癌是指上皮起源的恶性新生物或身体内或外壁(膜)(internal or external lining)的癌症。换言之，癌是上皮组织的恶性肿瘤。癌占所有癌症病例的80
‑
90％。
[0004]一种这样的癌是前列腺癌。前列腺癌是男性最常见的癌症，年龄是一个关键风险因素，因为约99％的病例发生在50岁以上的男性中。早期前列腺癌通常无症状，但可能存在排尿功能障碍症状，例如尿频/排尿困难/尿痛、血尿和夜尿。随着前列腺癌的进展，症状可能包括性功能障碍。晚期前列腺癌与癌细胞转移相关，通常会导致骨和淋巴结中的继发性肿瘤。症状可包括骨痛、刺痛、腿部无力以及大小便失禁。前列腺癌经常通过各种筛查程序在早期局部阶段检测到，包括检测前列腺特异性抗原(PSA)、前列腺成像、直肠指检和活检。在化学疗法、激素疗法和放射疗法之后或之前进行手术切除可能是有效的，并且已成为常规临床实践。然而，副作用可能仍然存在，包括免疫抑制、中性粒细胞减少和血小板增多。此外，超过50％的接受前列腺切除术的前列腺癌患者会出现泌尿生殖系统损伤。前列腺癌可能特别难治，特别是前列腺癌微环境具有免疫抑制性，从而降低了免疫系统靶向和破坏前列腺癌细胞的有效性。因此，需要改进的通常治疗癌症的治疗剂，特别是治疗前列腺癌的治疗剂。
[0005]TH1细胞因子，包括白细胞介素
‑
2(IL
‑
2)和白细胞介素
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15(IL
‑
15)已被用于治疗癌症。
[0006]IL
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15是细胞因子四
‑
α
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螺旋束家族的成员，在通过与细胞表面受体结合介导的先天性和适应性免疫中发挥作用。所述受体包括三个亚基：IL
‑
15受体(IL
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15R)α、IL
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2Rβ(也称为IL
‑
15Rβ、CD122和p75)和γ
C
(也称为CD132和p65)。IL
‑
15已被证明以反式发挥作用，其中受体由第一细胞的IL
‑
15Rα亚基和第二细胞的IL
‑
2Rβ和γ
C
亚基形成，或者以顺式发挥作用，其中受体由相同细胞上的IL
‑
15Rα亚基、IL
‑
2Rβ亚基和γ
C
亚基形成。
[0007]IL
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15已被证明是一种特别有效的治疗剂，但与许多缺点相关，包括全身毒性。因此，需要一种具有改进功效的IL
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15治疗剂，从而允许以较低剂量施用并降低全身毒性。
[0008]本专利技术克服了一个或多个上述问题。
[0009]本专利技术人惊奇地发现，将白细胞介素
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15与IL
‑
15活性促进肽融合改善了IL
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15的活性。不希望受理论束缚，据信本专利技术的IL
‑
15活性促进肽稳定IL
‑
15与其受体之间的相互作用，任选地，为IL
‑
15分子(以顺式或者反式构型)与其受体相互作用时提供了更大的移动自由。有利地，这允许在癌症治疗中施用较低剂量的本专利技术的融合多肽，从而减少使用野生
型IL
‑
15相关的副作用，例如全身毒性。
[0010]在一个方面，本专利技术提供了一种融合多肽(例如用于治疗癌症)，所述多肽包含：
[0011]a.白细胞介素
‑
15(IL
‑
15)；和
[0012]b.IL
‑
15活性促进序列，其中所述序列：
[0013]长度为10至60个氨基酸残基；和
[0014]通过IL
‑
15增加了CD8+T细胞的增殖。
[0015]本专利技术的融合多肽包含白细胞介素
‑
15。优选地，IL
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15是成熟的IL
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15，其缺少IL
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15前体的信号肽(例如氨基酸1
‑
29)和前肽(例如氨基酸30
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48)。参照人IL
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15前体在本文中显示为SEQ ID NO:1。
[0016]本文中的IL
‑
15可以是哺乳动物IL
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15或其功能片段，例如人IL
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15或其功能片段、灵长类IL
‑
15或其功能片段、或鼠IL
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15或其功能片段。IL
‑
15优选是人IL
‑
15或其功能片段。在一个实施方案中，IL
‑
15包含多肽序列，所述多肽序列与SEQ ID NO：2或3具有至少70％的序列同一性。优选地，IL
‑
15包含多肽序列，所述多肽序列与SEQ ID NO：2或3具有至少80％或90％的序列同一性。更优选地，IL
‑
15包含多肽序列，所述多肽序列与SEQ ID NO：2或3具有至少95％的序列同一性。在一个特别优选的实施方案中，IL
‑
15包含SEQ ID NO:2或3(更优选由其组成)，更优选地IL
‑
15包含SEQ ID NO:3(更优选由其组成)。
[0017]IL
‑
15可以包含多肽序列(或由其组成)，所述多肽序列与SEQ ID NO：25
‑
27中的任一个具有至少70％的序列同一性。在一个实施方案中，本专利技术的IL
‑
15包含多肽序列(或由其组成)，所述多肽序列与SEQ ID NO：25
‑
27中的任一个具有至少80％或90％的序列同一性。优选地，本专利技术的IL
‑
15包含多肽序列(或由其组成)，所述多肽序列与SEQ ID NO：25
‑
27中的任一个具有至少95％的序列同一性。更优选地，本专利技术的IL
‑
15包含SEQ ID NO：25
‑
27中的任一个(更优选地由其组成)。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种融合多肽，所述多肽包含：a.白细胞介素
‑
15(IL
‑
15)；和b.IL
‑
15活性促进序列，其中所述序列：长度为10至60个氨基酸残基；并且通过IL
‑
15增加CD8+T细胞的增殖。2.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列不增加受体非依赖性多肽与细胞表面的结合。3.根据权利要求1或2所述的融合多肽，其中所述IL
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15活性促进序列的长度为10至55个氨基酸残基。4.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列的长度为15至55个氨基酸残基。5.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列的长度为25至55个氨基酸残基。6.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列的长度为30至55个氨基酸残基。7.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列的长度为42至50个氨基酸残基。8.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述多肽包含N端IL
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15和C端IL
‑
15活性促进序列。9.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列包含与SEQ ID NO:4或9具有至少70％序列同一性的多肽序列。10.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列包含与SEQ ID NO:4或9具有至少80％序列同一性的多肽序列。11.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列包含与SEQ ID NO:4或9具有至少90％序列同一性的多肽序列。12.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列包含与SEQ ID NO:4或9具有至少95％序列同一性的多肽序列。13.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列包含SEQ ID NO:4或9。14.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15活性促进序列由SEQ ID NO:4或9组成。15.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15是人IL
‑
15。16.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
‑
15包含与SEQ ID NO:2或3具有至少70％序列同一性的多肽序列。17.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO:5、10或28具有至少70％序列同一性的多肽序列。18.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO:5、10或28具有至少80％序列同一性的多肽序列。19.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO:5、10或28具有至少90％序列同一性的多肽序列。
20.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO:5、10或28具有至少95％序列同一性的多肽序列。21.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其包含SEQ ID NO:5、10或28。22.根据前述权利要求中任一项所述的多肽，其中膜结合剂与所述IL
‑
15活性促进序列缀合。23.根据权利要求22所述的融合多肽，其中所述膜结合剂包含脂肪族酰基。24.根据权利要求23所述的融合多肽，其中所述脂肪族酰基为肉豆蔻酰基。25.根据权利要求22
‑
24中任一项所述的融合多肽，其中所述膜结合元件还包含亲水性肽。26.根据权利要求25所述的融合多肽，其中所述亲水性肽包含与SEQ ID NO:6具有至少70％序列同一性的肽序列。27.根据权利要求25或26所述的融合多肽，其中所述亲水性肽包含与SEQ ID NO:6具有至少80％序列同一性的肽序列。28.根据权利要求25
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27中任一项所述的融合多肽，其中所述亲水性肽包含与SEQ ID NO：6具有至少90％序列同一性的肽序列。29.根据权利要求25
‑
28中任一项所述的融合多肽，其中所述亲水性肽包含与SEQ ID NO：6具有至少95％序列同一性的肽序列。30.根据权利要求25
‑
29中任一项所述的融合多肽，其中所述亲水性肽包括SEQ ID NO：6。31.根据权利要求25
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30中任一项所述的融合多肽，其中所述亲水性肽由SEQ ID NO：6组成。32.根据权利要求22
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31中任一项所述的融合多肽，其中所述膜结合元件与所述IL
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15活性促进序列的半胱氨酸残基或赖氨酸残基缀合。33.根据前述权利要求中任一项所述的融合多肽，其中所述融合多肽通过二硫键缀合至N
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(α,ε双肉豆蔻酰基赖氨酸)SSKSPSKKDDKKPGDC(SEQ ID NO:31)。34.一种融合多肽，所述多肽包含：a.白细胞介素
‑
15(IL
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15)；和b.肽，其中所述肽的长度为10至60个氨基酸残基，并且与SEQ ID NO:4或9具有至少70％的序列同一性。35.根据权利要求34所述的融合多肽，其中所述肽的长度为10至55个氨基酸残基。36.根据权利要求34或35所述的融合多肽，其中所述肽的长度为15至55个氨基酸残基。37.根据权利要求34
‑
36中任一项所述的融合多肽，其中所述肽的长度为25至55个氨基酸残基。38.根据权利要求34
‑
37中任一项所述的融合多肽，其中所述肽的长度为30至55个氨基酸残基。39.根据权利要求34
‑
38中任一项所述的融合多肽，其中所述肽的长度为42至50个氨基酸残基。40.根据权利要求34
‑
39中任一项所述的融合多肽，其中所述多肽包含N端IL
‑
15和C端肽。
41.根据权利要求34
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40中任一项所述的融合多肽，其中所述肽包含与SEQ ID NO：4或9具有至少80％序列同一性的多肽序列。42.根据权利要求34
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41中任一项所述的融合多肽，其中所述肽包含与SEQ ID NO：4或9具有至少90％序列同一性的多肽序列。43.根据权利要求34
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42中任一项所述的融合多肽，其中所述肽包含与SEQ ID NO：4或9具有至少95％序列同一性的多肽序列。44.根据权利要求34
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43中任一项所述的融合多肽，其中所述肽包含SEQ ID NO：4或9(优选由SEQ ID NO:4或9组成)。45.根据权利要求34
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44中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
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15为人IL
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15。46.根据权利要求34
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45中任一项所述的融合多肽，其中所述IL
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15包含与SEQ ID NO:2或3具有至少70％序列同一性的多肽序列。47.根据权利要求34
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46中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO：5、10或28具有至少70％序列同一性的多肽序列。48.根据权利要求34
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47中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO：5、10或28具有至少80％序列同一性的多肽序列。49.根据权利要求34
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48中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO：5、10或28具有至少90％序列同一性的多肽序列。50.根据权利要求34
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49中任一项所述的融合多肽，其包含与SEQ ID NO：5、10或28具有至少95％序列同一性的多肽序列。51.根据权利要求34
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50中任一项所述的融合多肽，其包含SEQ ID NO：5、10或28。52.根据权利要求34
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51中任一项所述的多肽，其中所述膜结合剂与所述肽缀合。53.根据权利要求52所述的融合多肽，其中所述膜结合剂包含脂肪族酰基。54.根据权利要求53所述的融合多肽，其中所述脂肪族酰基为肉豆蔻酰基。55.根据权利要求52
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54中任一项所述的融合多肽，其中所述膜结合元件还包含亲水性肽。56.根据权利要求55所述的融合多肽，其中所述亲水性肽包含与SEQ ID NO:6具有至少70％序列同一性的肽序列。57.根据权利要求55或56所述的融合多肽，其中所述亲水性肽包...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：伦敦大学国王学院，
类型：发明
国别省市：