靶向YKL-40的人类单克隆抗体制造技术

本发明专利技术涉及与YKL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】靶向YKL
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40的人类单克隆抗体


[0001]本专利技术涉及与YKL
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40特异性结合的单克隆抗体、编码其的核酸分子、包含上述单克隆抗体的用于预防或治疗癌症的药物组合物以及包含上述单克隆抗体的用于诊断癌症的组合物。

技术介绍

[0002]抗体为与特定抗原结合的免疫蛋白。在包括人类和小鼠在内的大部分哺乳动物中，抗体由重链多肽与轻链多肽配对形成。各个链由称为可变区(Fv)及恒定区(Fc)的2个区域形成。轻链及重链可变区包含分子的抗原结合决定基并参与与靶抗原的结合。恒定区限定抗体的组(或参考样品类型)(例如人免疫球蛋白G(IgG))，赋予称为效应器功能的一系列重要的功能特性，参与与多数Fc受体及Fc配体的结合。例如，抗体具有靶特异性、介导免疫效应机制的能力及长的血清半衰期等一些重要特性，因此用作强力的治疗剂。
[0003]噬菌体展示技术由英国的医学研究委员会(Medical Research Co uncil)于1990年首次开发，是通过制备人类抗体文库(library)并以抗体片段(Fab、ScFv)的形式在噬菌体的表面表达来筛选对特定抗原的抗体克隆的技术。提出了可从pot抗体文库系统中筛选与抗原特异性反应的所有种类的人类重组单克隆抗体的可能性，因此在利用噬菌体展示抗体技术的情况下，可以获得能够应用于体内诊断或治疗的多种抗体片段(Fab或ScFv形式)。
[0004]相关现有技术文献为美国授权专利第7670599号。

技术实现思路

[0005]技术问题
[0006]本专利技术的目的在于，提供与YKL
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40特异性结合的单克隆抗体。
[0007]本专利技术的再一目的在于，提供编码上述单克隆抗体的核酸分子。
[0008]本专利技术的还有一目的在于，提供包含上述核酸分子的重组表达载体。
[0009]本专利技术的另一目的在于，提供由上述重组表达载体转化的转化体。
[0010]本专利技术的又一目的在于，提供包含上述单克隆抗体作为有效成分的用于预防或治疗癌症的药物组合物。
[0011]本专利技术的又一目的在于，提供包含上述单克隆抗体作为有效成分的用于诊断癌症的组合物。
[0012]技术方案
[0013]为了实现上述目的，本专利技术提供与YKL
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40特异性结合的单克隆抗体。
[0014]在本专利技术的一实施例中，上述单克隆抗体可以包含：(a)重链可变区，包含由序列5的氨基酸序列组成的CDR1、由序列6的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列7的氨基酸序列组成的CDR3；以及(b)轻链可变区，包含由序列11的氨基酸序列组成的CDR1、由序列12的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列13的氨基酸序列组成的CDR3，或者可以包含：(a)重链可变区，包含由序列8的氨基酸序列组成的C DR1、由序列9的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列
10的氨基酸序列组成的CDR3；以及(b)轻链可变区，包含由序列14的氨基酸序列组成的CDR1、由序列15的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列16的氨基酸序列组成的CDR3。
[0015]在本专利技术的一实施例中，上述单克隆抗体可以包含：(a)重链可变区，由序列1的氨基酸序列组成；以及(b)轻链可变区，由序列3的氨基酸序列组成，或者可以包含：(a)重链可变区，由序列2的氨基酸序列组成；以及(b)轻链可变区，由序列4的氨基酸序列组成。
[0016]在本专利技术的一实施例中，上述单克隆抗体可以为人源化抗体。
[0017]并且，本专利技术提供编码上述单克隆抗体的核酸分子。
[0018]在本专利技术的一实施例中，上述核酸分子可以包含：(a)重链可变区，包含由序列21的碱基序列组成的CDR1、由序列22的碱基序列组成的CDR2以及由序列23的碱基序列组成的CDR3；以及(b)轻链可变区，包含由序列27的碱基序列组成的CDR1、由序列28的碱基序列组成的CDR2以及由序列29的碱基序列组成的CDR3，或者可以包含：(a)重链可变区，包含由序列24的碱基序列组成的CDR1、由序列25的碱基序列组成的CDR2以及由序列26的碱基序列组成的CDR3；以及(b)轻链可变区，包含由序列30的碱基序列组成的CDR1、由序列31的碱基序列组成的CDR2以及由序列32的碱基序列组成的CDR3。
[0019]在本专利技术的一实施例中，上述核酸分子可以包含：(a)重链可变区，由序列17的碱基序列组成；以及(b)轻链可变区，由序列19的碱基序列组成，或者可以包含：(a)重链可变区，由序列18的碱基序列组成；以及(b)轻链可变区，由序列20的碱基序列组成。
[0020]并且，本专利技术提供包含上述核酸分子的重组表达载体。
[0021]并且，本专利技术提供由上述重组表达载体转化的转化体。
[0022]并且，本专利技术提供包含上述单克隆抗体作为有效成分的用于预防或治疗癌症的药物组合物。
[0023]在本专利技术的一实施例中，上述癌症可以为选自由乳腺癌、大肠癌、肺癌、胃癌、肝癌、血液癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、脑癌、子宫癌、鼻咽癌、喉癌、头颈癌、结肠癌、卵巢癌、直肠癌、大肠癌、阴道癌、小肠癌、内分泌癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、输尿管癌、尿道癌、前列腺癌、支气管癌、膀胱癌、肾癌及骨髓癌组成的组中的一种。
[0024]并且，本专利技术提供包含上述单克隆抗体作为有效成分的用于诊断癌症的组合物。
[0025]在本专利技术的一实施例中，上述癌症可以为选自由乳腺癌、大肠癌、肺癌、胃癌、肝癌、血液癌、骨癌、胰腺癌、皮肤癌、脑癌、子宫癌、鼻咽癌、喉癌、头颈癌、结肠癌、卵巢癌、直肠癌、大肠癌、阴道癌、小肠癌、内分泌癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、输尿管癌、尿道癌、前列腺癌、支气管癌、膀胱癌、肾癌及骨髓癌组成的组中的一种。
[0026]专利技术的效果
[0027]本专利技术的YKL
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40与癌细胞的增殖及转移相关，与YKL
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40特异性结合单克隆抗体具有抑制癌细胞增殖及转移的效果，因此，本专利技术的单克隆抗体可以有效用于诊断、预防或治疗癌症。
附图说明
[0028]图1a为示出通过噬菌体展示筛选对人类YKL
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40显出显著结合能力的抗体的过程的示意图，图1b至图1d分别示出对Fab
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I、Fab
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II及scFv的淘选滴定(panning titration)结果。
[0029]图2a及图2b示出通过噬菌体展示筛选的7个对人类YKL
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40的抗体。
[0030]图3a为示出通过噬菌体展示筛选对小鼠YKL
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40显出显著结合能力的抗体的过程的示意图，图3b至图3d分别示出对Fab
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I、Fab
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II及scFv的淘选滴定结果。
[0031]图4示出通过噬菌体展示筛选的6个对小鼠YKL
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40的抗体。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种单克隆抗体，其特征在于，与YKL
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40特异性结合。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，上述单克隆抗体包含：(a)重链可变区，包含由序列5的氨基酸序列组成的CDR1、由序列6的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列7的氨基酸序列组成的CDR3；以及(b)轻链可变区，包含由序列11的氨基酸序列组成的CDR1、由序列12的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列13的氨基酸序列组成的CDR3。3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，上述单克隆抗体包含：(a)重链可变区，包含由序列8的氨基酸序列组成的CDR1、由序列9的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列10的氨基酸序列组成的CDR3；以及(b)轻链可变区，包含由序列14的氨基酸序列组成的CDR1、由序列15的氨基酸序列组成的CDR2以及由序列16的氨基酸序列组成的CDR3。4.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，上述单克隆抗体包含：(a)重链可变区，由序列1的氨基酸序列组成；以及(b)轻链可变区，由序列3的氨基酸序列组成。5.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，上述单克隆抗体包含：(a)重链可变区，由序列2的氨基酸序列组成；以及(b)轻链可变区，由序列4的氨基酸序列组成。6.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，上述单克隆抗体为人源化抗体。7.一种核酸分子，其特征在于，编码权利要求1所述的单克隆抗体。8.根据权利要求7所述的核酸分子，其特征在于，上述核酸分子包含：(a)重链可变区，包含由序列21的碱基序列组成的CDR1、由序列22的碱基序列组成的CDR2以及由序列23的碱基序列组成的CD R3；以及(b)轻链可变区，包含由序列27的碱基序列组成的CDR1、由序列28的碱基序列组成的CDR2以及由序列29的碱基序列组成的CD R3。9.根据权利要求7所述的核酸分子，其特征在于，上述核酸分子...

【专利技术属性】
技术研发人员：金大映，姜庆在，金润智，李世罗，洪镇泰，
申请(专利权)人：希内丽思有限公司，
类型：发明
国别省市：