AMH竞争性拮抗剂抗体制造技术

本发明专利技术涉及特异性结合至AMHR

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】AMH竞争性拮抗剂抗体


[0001]本专利技术涉及一种针对人抗缪勒管激素II型受体(Anti
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M
ü
llerian Hormone type II receptor，AMHR
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II)的新抗体，其既是抗缪勒管激素(AMH)竞争性的又是拮抗剂，并且涉及其在治疗方法中的用途。

技术介绍

[0002]转化生长因子
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β(TGF
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β)超家族的成员是各种生理过程的关键调节因子。抗缪勒管激素(AMH)是一种140Kda糖蛋白，并且是TGF
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β超家族的成员，其在男性性分化过程中的作用尤其广为人知(Josso N等人Pediatr Endocrinol.Rev.2006；3(4):347
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358)。在女性中，AMH首先在出生后时期由颗粒细胞(GC)以低水平分泌，然后AMH水平在青春期期间激增，之后在整个育龄期间逐渐下降，直至绝经(Visser等人，Reproduction 2006；131(1)1
‑
9)。在初级卵泡中开始，AMH表达在窦前卵泡和小窦卵泡中最强，并且随后下降直至排卵。AMH在黄体和闭锁卵泡中不再检测到。
[0003]为了发挥作用，AMH结合至称为AMHR
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II的特异性II型受体结合，该受体在生长卵泡的GC中与AMH共表达(Baarends等人Endocrinology.1995；136(11):4951
‑
4962)。在卵泡发生过程中，AMH抑制始基卵泡的初始募集，并降低生长卵泡对FSH的敏感性。AMH确实本质上作为始基卵泡耗竭率和成熟卵泡选择的看门者，利用通过AMHR
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II和I型受体的BMP样信号通路激活Smad 1/5/8。此外，AMH现在被认为是卵巢卵泡池大小的重要临床标志物和卵巢对受控卵巢过度刺激响应的预测因子(Dewailly D等人Hum Reprod Update.2014；20(3)370
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385)。卵泡液中的AMH浓度与颗粒细胞增殖呈负相关，尽管正常生理机能随着年龄的增长和多囊卵巢综合征(PCOS)进展被破坏。
[0004]环AMH/AMHR
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II确实被描述为在PCOS的生理病理学中发挥驱动作用(Pigny P等人，J Clin Endocrinol Metab 2003；88(12):5957
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5962，Catteau
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Jonard S等人，J Clin Endocrinol Metab 2008；93(11):4456
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4461，Dumont A等人，Reprod Biol Endocrinol 2015；13:137
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146)，要么通过其对卵巢中卵泡发生的直接调控作用，要么经由涉及激活GnRH神经元LH搏动和分泌的下丘脑中的间接途径。增加的LH搏动是许多PCOS病例中的重要特征(Cimino I等人，Nat.Commun.2016；7:10055
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10066)。
[0005]PCOS是最常见的女性生殖病症，影响全球10％
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18％的育龄妇女(Dewailly D.Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol.2016；37:5
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11)。该综合征尤其以卵巢和/或肾上腺雄激素分泌过多为基础。在患有PCOS的非妊娠女性中，血清AMH水平是没有多囊卵巢(PCO)的女性的2
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3倍，并且生殖功能障碍的严重程度与AMH水平呈正相关(Dewailly D等人Hum Reprod.2011；26(11):3123
‑
3129)；Piouka等人(Am J Physiol Endocrinol Metab.2009；296(2):E238
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E243)，这支持了这样的假设：根据该假设，AMH可能通过降低颗粒细胞对FSH的敏感性而参与在患有PCOS的女性中观察到的卵泡停滞(Pellat L等人，Fertil Steril 2011；92(1):240
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245)。
[0006]在其他妇科病症中，已经描述了AMH/AMHR
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II的双重表达，诸如在子宫内膜异位症
(Signorile PG等人，J Exp Clin Cancer Res 2014；33(1):46
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54)和子宫肌瘤和子宫腺肌症(Kim Sy等人Obstet Gynecol Sci 2018；61(1):127
‑
134)中。
[0007]在癌症领域，AMHRII信号传导的含义更为复杂。如上所提及，AMHRII属于TGFb受体超家族。
[0008]TGFb通常在正常细胞和癌细胞中诱导抗增殖响应。事实上，TGFbR2和SMAD4失活突变和缺失见于各种肿瘤中，并被认为是早期多步骤肿瘤发生的触发因素之一(Vogelstein等人，Science 2013；339(6127):1545
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1558；Levy等人，Molec Cell biol 2005；25(18)8108
‑
8125)。
[0009]另一方面，与正常周围细胞相比，TGFb1在肿瘤细胞中高度表达。这种表达通过增强晚期肿瘤细胞的迁移、侵袭和存活以及转导微环境中的免疫抑制信号而与肿瘤进展相关(Morikawa等人，Cold Spring Harb.Perspect.2016；8(5):a021873；Luo等人，Transl.Oncol.2019 12(3):475
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484；Furler等人；Cancers 2018；10(6),E199)。
[0010]AMHRII在几种类型的妇科癌症中均有报道，诸如浆液性癌、透明细胞癌、子宫内膜样癌、粘液性上皮癌、无性细胞瘤、子宫内膜癌、平滑肌肉瘤和子宫内膜肉瘤(Bakkum
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Gamez JN等人，Gynecol.Oncol.2008；108(1):141
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148；Kim SM等人，Oncol Letter 2019；17(1):532
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538)和宫颈癌(Taximaimaita R等人，Medicine 2018；97(22):e10793)。
[0011]AMH和AMHR
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II被描述为参与抑制细胞周期和诱导癌症中的细胞凋亡。因此，AMH在癌症领域被认为是保护生物体免受癌症侵害的因子(M.Gowkielewicz等人；Int.J.Mol.Sci.2019；20(6):1325)。因此，目前的大多数研究都致力于促进、增加或改善AMH在癌症中的作用，并且从而促进、增加或改善其与其受体的相互作用，这种相互作用被称为触发目标信号传导途径。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种特异性结合至AMHR
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II的胞外结构域的拮抗剂抗体或其片段、特别是特异性结合至AMHR
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II的胞外结构域的竞争性拮抗剂抗体。2.根据权利要求1所述的抗体或其片段，所述抗体包含：(a)重链，其中，可变结构域包含：
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H
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CDR1，具有如SEQ ID NO:3所示的序列；
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H
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CDR2，具有如SEQ ID NO:4所示的序列；和
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H
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CDR3，具有如SEQ ID NO:5所示的序列；和(b)轻链，其中，可变结构域至少包含选自由以下组成的组的CDR：
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L
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CDR1，具有如SEQ ID NO:8所示的序列；
‑
L
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CDR2，具有如SEQ ID NO:9所示的序列；和
‑
L
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CDR3，具有如SEQ ID NO:10所示的序列3.根据权利要求1或2所述的抗体或其片段，其中，所述抗体是非免疫原性的，并且特别是不能结合至Fc受体。4.根据权利要求2或3所述的抗体或其片段，其中，所述抗体包含与如SEQ ID NO:2所示的序列具有至少85％同一性的重链可变区：
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H
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CDR1，与如SEQ ID NO:3所示的序列具有100％同一性；
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H
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CDR2，与如SEQ ID NO:4所示的序列具有100％同一性；和
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H
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CDR3，与如SEQ ID NO:5所示的序列具有100％同一性。5.根据权利要求4所述的抗体或其片段，其中，所述抗体的重链可变区与如SEQ ID NO:2所示的序列具有至少90％、特别是至少95％同一性。6.根据权利要求2至5中任一项所述的抗体或其片段，其中，所述抗体包含与如SEQ ID NO:7所示的序列具有至少85％同一性的轻链可变区：
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L
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CDR1，与如SEQ ID NO:8所示的序列具有100％同一性；
‑
L
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CDR2，与如SEQ ID NO:9所示的序列具有100％同一性；和
‑
L
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CDR3，与如SEQ ID NO:10所示的序列具有100％同一性。7.根据权利要求6所述的抗体或其片段，其中，所述抗体的轻链可变区与如SEQ ID NO:7所示的序列具有至少90％、特别是至少95％同一性。8.根据权利要求2至7中任一项所述的抗体或其片段，其中，所述抗体包含与如SEQ ID NO:1所示的序列具有至少85％同一性的重链：
‑
H
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CDR1，与如SEQ ID NO:3所示的序列具有100％同一性；
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H
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CDR2，与如SEQ ID NO:4所示的序列具有100％同一性；和
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H
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【专利技术属性】
技术研发人员：JF，
申请(专利权)人：加马玛布斯制药公司，
类型：发明
国别省市：