一种测定吲哚布芬杂质的分析方法技术

本发明专利技术公开了一种测定吲哚布芬杂质的分析方法，以十八烷基硅烷键合硅胶或辛烷基键合硅胶为固定相进行色谱分离，采用紫外检测仪进行分析检测；所述流动相为溶剂A和溶剂B的混合，所述溶剂A为磷酸缓冲溶液，所述的溶剂B选自甲醇或乙腈或甲醇与乙腈的混合与磷酸的混合液。所述方法专属性、精密度、定量限、检测限、准确度、线性和范围、溶液稳定性都符合要求；同时实验操作简便、快速、成本低，对吲哚布芬的质量控制及用药安全保证具有极其重要的意义。量控制及用药安全保证具有极其重要的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种测定吲哚布芬杂质的分析方法


[0001]本专利技术属于药物分析化学领域，具体涉及一种测定吲哚布芬杂质的分析方法。

技术介绍

[0002]吲哚布芬(Indobufen)是一种异吲哚啉基苯基丁酸衍生物，由 FarmitaIia CarIo Erba Pharmacia(法玛西亚，现在的辉瑞)公司开发的一种强效抗血小板聚集药物，最早于1984年在意大利上市，随后在其它国家陆续上市，包括菲律宾、委内瑞拉、泰国、葡萄牙等。我国于2002年研制成功并被CFDA批准为4类新药。其化学名为(
±
) 2
‑
[4
‑
(1
‑
氧代
‑2‑
异二氢吲哚基)苯基]丁酸，分子式C
18
H
17
NO3，精确分子量295.12，结构式如下所示：
[0003][0004]吲哚布芬主要是通过以下机制发挥抗血小板聚集作用：(1)可逆性抑制血小板环氧化酶，使血栓素B2(血小板聚集的强效激活剂) 生成减少；(2)抑制二磷酸腺苷(ADP)、肾上腺素和血小板活化因子(PAF)、胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集；(3)降低血小板三磷酸腺苷、血清素、血小板因子3、血小板因子4和β
‑
凝血球蛋白的水平，降低血小板粘附性。吲哚布芬是一种可逆的多靶点抗血栓药物，对于激活剂诱发的血小板聚集，单次口服吲哚布芬200mg后2 小时可达最大抑制作用，12小时后仍有显著抑制作用(90％)，24小时内恢复。
[0005]对于报道的吲哚布芬的合成工艺中多数工艺路线涉及2
‑
(4
‑ꢀ
氨基)苯基丁酸和2
‑
(4
‑
硝基)苯基丁酸，专利CN106631974B公开了如下的合成工艺路线：
[0006](1)氢化反应
[0007][0008](2)环化反应：
[0009][0010](3)锌粉还原反应
[0011][0012]现有制备方法中，吲哚布芬含有的相关的7种杂质主要如下表：
[0013]表1：7种工艺杂质列表
[0014][0015][0016]目前尚未有公开的文献与专利报道上述杂质的检查方法。因此，找到一种灵敏度高、专属性好的检测这些杂质的方法，实现对吲哚布芬原料药中这些杂质的控制，对提高产品的质量和用药的安全性具有十分重要的意义。

技术实现思路

[0017]为解决现有技术存在的缺陷，本专利技术提供了一种分析方法用于上述7种工艺杂质及其它未知杂质与总杂质的测定与限度控制。
[0018]本专利技术的技术方案为：
[0019]一种测定吲哚布芬杂质的分析方法，所述方法以十八烷基硅烷键合硅胶或辛烷基键合硅胶为固定相进行色谱分离，采用紫外检测仪进行分析检测；所述流动相为溶剂A和溶剂B的混合，所述溶剂A为磷酸缓冲溶液，所述的溶剂B选自甲醇或乙腈或甲醇与乙腈的混合
与磷酸的混合液。
[0020]本专利技术所述的杂质包含特定杂质；所述的特定杂质为：
[0021][0022]至少一种。
[0023]进一步，本专利技术所述的检测方法还可测定未知单杂和总杂。
[0024]本专利技术的优选方案中，所述的溶剂A为磷酸二氢钾水溶液。
[0025]本专利技术的优选方案中，所述的溶剂A的pH值为2.0～3.5，优选为3.0。
[0026]本专利技术的优选方案中，所述的溶剂B中磷酸的浓度为0.05～0.2％。
[0027]本专利技术的优选方案中，所述流动相采用程序如表2所示：
[0028]表2梯度洗脱程序表
[0029][0030][0031]其中溶剂A和B的百分比为体积百分比。
[0032]本专利技术的优选方案中，所述色谱柱的规格选自4.6
×
250mm，5μm 或4.6
×
150mm，5μm或2.1
×
150mm，1.7μm或2.1
×
150mm，1.6μm或 2.1
×
150mm，1.9μm或4.6
×
150mm，2.7μm或4.6
×
150mm，2.5μm或 4.6
×
150mm，3.5μm或4.6
×
150mm，3.0μm，进一步优选4.6
×
250mm， 5μm。
[0033]本专利技术的优选方案中，所述流动相的流速为0.3～1.5ml/min；检测波长为220～230nm，优选228nm；柱温为25～40℃，优选30℃；进样体积为5～20μl；运行时间为60min。
[0034]本专利技术的优选方案中，所述的方法按照加校正因子的主成分自身对照法测得杂质的含量。
[0035]进一步，所述方法包含如下步骤：取吲哚布芬待测样品配制供试品溶液，将供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液，然后以溶剂A和溶剂B的混合为流动相进行HPLC检测，按照加校正因子的主成分自身对照法计算各特定杂质含量：特定杂质含量％＝F
×
(A
杂
/A
对照
)
×ꢀ
0.1，总杂质含量为各特定杂质含量与未知杂质含量之和。其中，F为校正因子，A
杂
为供试品溶液图谱中各特定杂质的峰面积，A
对照
为对照溶液图谱中主峰峰面积，所述校正因子为主成份线性回归方程的斜率和特定杂质线性回归方程的斜率的比值。
[0036]再进一步，较为具体的，本专利技术所述的检测方法包括如下步骤：
[0037](a)供试品溶液的配制：取吲哚布芬待测样品溶于乙腈并加水稀释成浓度为0.5mg/ml，作为供试品溶液；
[0038](b)对照溶液的配制：取供试品溶液适量，用乙腈
‑
水(30：70) 稀释制成0.5μg/ml的溶液，作为对照溶液；
[0039](c)对照品贮备液及定位溶液的配制：取YDBF
‑
IM
‑
A、 YDBF
‑
IM
‑
B、YDBF
‑
IM
‑
C、YDBF
‑
IM
‑
E、YDBF
‑
IM
‑
F、YDBF
‑
IM
‑
H 和YDBF
‑
IM
‑
I对照品分别加乙腈溶解并加水稀释作为各杂质对照品贮备液及定位溶液，浓度均为0.01mg/ml；
[0040](d)系统适用性溶液的配制：取吲哚布芬对照品加乙腈溶解，然后加入适量各杂质对照品贮备液，用水稀释至每1ml含吲哚布芬样品约0.5mg，YDBF
‑
IM
‑
A、YDBF
‑
IM
‑
B、YDBF
‑
IM
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定吲哚布芬杂质的分析方法，其特征在于：所述方法以十八烷基硅烷键合硅胶或辛烷基键合硅胶为固定相进行色谱分离，采用紫外检测仪进行分析检测；所述流动相为溶剂A和溶剂B的混合，所述溶剂A为磷酸缓冲溶液，所述的溶剂B选自甲醇或乙腈或甲醇与乙腈的混合与磷酸的混合液。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的杂质包含特定杂质；所述的特定杂质为：为：至少一种。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶剂A为磷酸二氢钾水溶液。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶剂A的pH值为2.0～3.5，优选为3.0。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的溶剂B中磷酸的浓度为0.05～0.2％。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述流动相采用梯度洗脱程序如下表所示：所述流动相采用梯度洗脱程序如下表所示：其中溶剂A和B的百分比为体积百分比。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述色谱柱的规格选自4.6
×

【专利技术属性】
技术研发人员：张霞，王新月，倪郑华，
申请(专利权)人：杭州中美华东制药有限公司，
类型：发明
国别省市：