利用液相色谱-串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法技术

本发明专利技术属于分析检测领域，公开了利用液相色谱

【技术实现步骤摘要】
利用液相色谱
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串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法


[0001]本专利技术属于分析检测领域，具体的，涉及利用液相色谱
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串联质谱定量分 析生物样本中游离氨基酸的方法。

技术介绍

[0002]氨基酸是机体重要的代谢物之一，具有广泛的生物学功能。不仅是生物体 内各种蛋白质、酶等生物大分子活性物质的基本组成单元和多肽、神经递质和 多胺等含氮生物小分子物质的重要前体物质，还参与糖类和脂质代谢合成、嘌 呤和嘧啶合成等。氨基酸代谢失衡会导致生理功能异常，影响机体代谢的正常 进行，进而导致疾病，已成为众多疾病的诱因或表现形式之一。因此，氨基酸 作为代谢过程中的重要靶标，监测生物样本中氨基酸的含量对于辅助临床诊断 和阐明对机体生理机能的影响具有重要意义。
[0003]现有的氨基酸分析方法主要为直接分析法和衍生化间接分析法。对于氨基 酸的分析方法众多，包括氨基酸分析仪、液相色谱法、气相色谱法、毛细管电 泳和质谱法。氨基酸分析仪测定法重现性好，结果可靠，但是均在硬件配置复 杂，维护成本高，灵活性差，分辨率低，分析本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.利用液相色谱
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串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1)、将生物样品进行预处理，得到处理后的生物样品；步骤2)、将步骤1)中处理后的生物样品置于冷冻离心机中离心，收集上层清液在氮吹仪下浓缩至近干；步骤3)、将步骤2)中所得的样品用溶剂混匀后用过滤，4℃储存待测；步骤4)、将步骤3)中所得的生物样品进行超高效液相色谱
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串联质谱联用分析，得到生物样品中游离氨基酸的种类和含量。2.根据权利要求1所述的利用液相色谱
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串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法，其特征在于，所述生物样品包括血清样品、血浆样品、脑组织样品、细胞样品。3.根据权利要求2所述的利用液相色谱
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串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法，其特征在于，步骤1)中，当生物样品为血清样品或血浆样品时，对血清样品或血浆样品进行预处理的步骤为：将血清样品或血浆样品置于4℃下12000
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15000rpm的条件下离心10
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20min，取上层血清或血浆备用，将上层血清或血浆样品，加入相当于3
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5倍样品体积的甲醇溶液后震荡混匀，静置10～15min沉淀样品中的蛋白质。4.根据权利要求2所述的利用液相色谱
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串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法，其特征在于，步骤1)中，当生物样品为脑组织样品时，对脑组织样品进行预处理的步骤为：按照每50mg脑组织样品加入甲醇/水混合溶剂500μL，将脑组织样品加入甲醇/水混合溶剂后，置于组织研磨器中4℃，120Hz下研磨10min，甲醇/水混合溶剂中甲醇和水的体积比为1:1。5.根据权利要求1所述的利用液相色谱
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串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法，其特征在于，步骤2)中，冷冻离心的条件为4℃下12000
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15000rpm离心10
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20min。6.根据权利要求1所述的利用液相色谱
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串联质谱定量分析生物样本中游离氨基酸的方法，其特征在于，步骤3)...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗茜，陈志宇，傅磊，李芳，李文波，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：