一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用。水凝胶是由荧光蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用


[0001]本专利技术属于生物制药
，具体涉及一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用。

技术介绍

[0002]聚合物水凝胶是由三维网络结构的聚合物和大量的水组成。特别是近几年来，人们对它的研究兴趣日益浓厚，因为水凝胶中含有大量的水和少量的有机物，是一种绿色的软材料。然而，采用化学交联剂交联的水凝胶存在一些缺陷，例如：力学强度差和易脆等。目前研究最多的准聚轮烷(PPR)水凝胶是由PEG和α
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环糊精(α
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CD)组成，串在PEG上的α
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CD之间可以形成结晶微区，成为物理交联点，但是其强度较低限制了其生物应用。为了解决这个问题，目前利用蛋白质多聚体作为聚合物水凝胶的交联点，可以极大地改善水凝胶的强度，但是这种水凝胶功能应用范围小，限制了其生物应用。
[0003]纳米抗体(Nanobody，NB)是一类新型抗体，它以结构稳定、分子量小、易于表达纯化、免疫原性低为典型特征，近年来迅速发展为颇具潜力的治疗性蛋白质。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶，其特征在于，其由荧光蛋白
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高分子聚合物结合体、纳米抗体多聚体在pH 7.2的PBS缓冲液中，4℃的温度下先反应10
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30 h，再加入α
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环糊精反应10
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30 h制备得到；其中：所述荧光蛋白
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高分子聚合物结合体通过融合表达巯基的荧光蛋白、高分子聚合物和还原剂三(2
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羧乙基)膦TCEP在pH 7.2的PBS缓冲液中亲核加成反应得到；融合表达巯基的荧光蛋白的尾部有暴露出巯基SH的半胱氨酸残基，其由绿色荧光蛋白GFP在蛋白质序列的C端添加一段甘氨酸柔性链，并最后添加半胱氨酸Cys获得；高分子聚合物为马来酰亚胺
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聚乙二醇PEG
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MAL，其化学结构式如下：；所述纳米抗体多聚体通过卷曲螺旋蛋白单向融合纳米抗体，并在卷曲螺旋蛋白与纳米抗体之间通过一段短肽连接获得，所述卷曲螺旋蛋白为二聚体。2.根据权利要求1所述的双超分子相互作用水凝胶，其特征在于，荧光蛋白
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高分子聚合结合体、纳米抗体多聚体和α
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环糊精的摩尔比为2：1：（100
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200）。3.根据权利要求1所述的双超分子相互作用水凝胶，其特征在于，融合表达巯基的荧光蛋白制备时，绿色荧光蛋白GFP在蛋白质序列的C端添加的一段甘氨酸柔性链的序列为 GGGGGGG。4.根据权利要求1所述的双超分子相互作用水凝胶，其特征在于，融合表达巯基的荧光蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。5.根据权利要求1所述的双超分子相互作用水凝胶，其特征在于，高分子聚合物PEG
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MAL中，修饰马来酰亚胺MAL的聚乙二醇PEG的分子量在2000
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10000之间。6.根据权利要求1所述的双超分子相互作用水凝胶，其特征在于，纳米抗体多聚体制备时，用于连接卷曲螺旋蛋白与纳米抗体的一段短肽的序列为 GGSGGGSGGGSG。7.根据权利要求1所述的双超分子相互作用水凝胶，其特征在于，纳米抗体多聚体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。8.一种根据权利要求1所述的双超分子相互...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国颂，姚琳通，丁澦，胡榕婷，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：