一种反相色谱纯化制备利拉鲁肽的方法技术

本发明专利技术公开一种高效的利拉鲁肽的纯化分离方法，涉及一种色谱技术纯化利拉鲁肽的改进方法。本方法采用高效液相反相制备色谱技术对利拉鲁肽进行分离纯化，该制备方法以反相色谱填料为基质，对纯化工艺条件中重要参数进行优化，如缓冲盐种类、浓度、pH、流动相梯度及上样量等，使样品具有适当的保留和良好的峰形；采用优化后的纯化工艺可以获得高纯度利拉鲁肽。本发明专利技术方法具有高选择性、载样量大、收率高等优势，本发明专利技术所要解决的技术问题是现有制备方法分离纯化困难、产品的总收率和纯度低。本发明专利技术为缩短生产周期、降低生产成本、提高产品质量提供了一种新的方法。量提供了一种新的方法。量提供了一种新的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种反相色谱纯化制备利拉鲁肽的方法


[0001]本专利技术属于色谱技术纯化分离多肽的制备领域。具体涉及一种色谱技术纯化制备利拉鲁肽的方法。

技术介绍

[0002]利拉鲁肽为人胰高血糖素样肽
‑
1(glucagon
‑
like peptide1，GLP
‑
1)类似物，GLP
‑
1是由前激素转换酶(PC1)在肠黏膜的L细胞内将胰高血糖素原(proglucagon)剪切为其羧基端的肽链序列。GLP
‑
1有2种生物活性形式，一种是GLP
‑
1(7
‑
37)，另一种是GLP
‑
1(7
‑
36)酰胺。两者仅有一个氨基酸序列不同，GLP
‑
1约80％的循环活性来自GLP
‑
1(7
‑
36)酰胺。GLP
‑
1作用靠受体介导，可结合并激活GLP
‑
1受体。
[0003]利拉鲁肽与GLP<br/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种反相色谱纯化制备利拉鲁肽的方法，其步骤如下：(1)溶样：称取利拉鲁肽粗品，加入盐溶液或纯水，采用质量浓度9.0％—12.0％稀氨水滴定至完全溶解，用0.1
‑
0.45μm滤膜过滤，待用；(2)纯化制备：进行利拉鲁肽样品的纯化分离制备，通过观察紫外峰形来指导收集馏分，按峰收集；流动相中有机相与盐相溶液；所述有机溶剂种类可以为甲醇、乙醇、乙腈或者异丙醇中的一种或二种以上；盐相溶液中的缓冲盐为Na
+
、K
+
、H
+
、NH
4+
之一种或多种为阳离子，CH3COO
‑
、HCOO
‑
、Cl
‑
、HCO3‑
、PO
43
‑
、HPO
42
‑
、H2PO
43
‑
、ClO4‑
、SO
32
‑
之一种或多种为阴离子的盐；所述缓冲盐溶液浓度为1
‑
1000mM，缓冲盐溶液pH为2.0
‑
11.0；(3)脱盐：对馏分进行低温离心浓缩，重复2
‑
3次，即得利拉鲁肽产品。2.根据权利要求1所述的方法，步骤(1)中所述的利拉鲁肽粗品的状态可以是固体粉末或液体；样品的色谱纯度为35
‑
95％；样品的浓度为0.1
‑
100mg/mL。3.根据权利要求1所述的方法，步骤(3)反相色谱纯化利拉鲁肽，色谱柱的载样量为固定相重量的0.01

【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，叶贤龙，郭志谋，于伟，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：