一种N-聚糖修饰的胰高血糖素样肽-1类似物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开一种N

【技术实现步骤摘要】
一种N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及医药
更具体地，涉及一种N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]胰高血糖素样肽
‑
1(GLP
‑
1)是一种多肽类激素，在2型糖尿病的治疗中是一种很有前途的治疗候选药物。GLP
‑
1可通过与GLP
‑
1受体(G蛋白偶联受体)结合产生生理效应，GLP
‑
1受体被激活后，导致循环腺苷单磷酸和细胞内钙水平快速升高，从而导致葡萄糖依赖性胰岛素释放，降低体内血糖。但由于其易被血清中的酶[以二肽基肽酶Ⅳ(DPP
‑Ⅳ
)为主]降解，导致其血清半衰期短(～2min)，限制了其在糖尿病治疗中的潜在应用(Ahr
é
n,B.(2004)Enhancement or prolongation of GLP
‑
1activity as a strategy for treatment of type 2diabetes.Drug Discovery Today:Therapeutic Strategies 1,207
‑
212.)。
[0003]目前已经进行许多尝试以改善GLP
‑
1的药理学特征，包括糖基化、聚乙二醇化和脂化(Moradi,S.V.,Hussein,W.M.,Varamini,P.,Simerska,P.,and Toth,I.(2016)Glycosylation,an effective synthetic strategy to improve the bioavailability of therapeutic peptides.Chem.Sci.7,2492
‑
2500.；Frokjaer,S.,and Otzen,D.E.(2005)Protein drug stability:a formulation challenge.Nat Rev Drug Discov 4,298
‑
306.；Vaishya,R.,Khurana,V.,Patel,S.,and Mitra,A.K.(2015)Long
‑
term delivery of protein therapeutics.Expert Opin Drug Deliv 12,415
‑
440.)。
[0004]糖基化修饰是最普遍的蛋白质翻译后修饰之一，其方法主要是在新合成的蛋白多肽上，将一个糖链与多肽上的天冬酰胺(N
‑
糖基化)侧链中的酰胺相连。蛋白药物的糖基化修饰为天然修饰，可以深刻地影响蛋白质的性质，例如蛋白的折叠、体内稳定性、免疫原性和药代动力学等(Wu,Z.；Jiang,K.；Zhu,H.；Ma,C.；Yu,Z.；Li,L.；Guan,W.；Liu,Y.；Zhu,H.；Chen,Y.；Li,S.；Li,J.；Cheng,J.；Zhang,L.；Wang,P.G.(2016)Site
‑
directed glycosylation of peptide/protein with homogeneous O
‑
linked eukaryotic N
‑
glycans.Bioconjug Chem.27,1972
–
1975.)。经过糖基化修饰的蛋白的主要特点就是在原来的蛋白多肽上的特定位置添加糖链，从而提高了蛋白质的稳定性，降低了蛋白酶对蛋白的降解作用。另一方面多肽进行糖基化修饰后会使原多肽药物的分子量增大，这样可以减少肾小球的滤过率。但在糖基化修饰中，与蛋白质连接的寡糖链具有分支结构，组成糖链的每个糖基的异头碳又有α和β两种可能，因此寡糖链结构远比线性结构的核酸或多肽复杂。因糖链的分子量较大、结构复杂及均一糖基化修饰技术滞后，从而限制了GLP
‑
1类长效制剂的发展。
[0005]因此，需要提供一种新的能将均一的糖链添加到GLP
‑
1类似物的多肽链上的方法，并得到糖基化GLP
‑
1类似物，以克服天然GLP
‑
1在体内易降解、半衰期短及不能较好发挥降血糖功效的问题。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一个目的在于提供一种N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1(GLP
‑
1)类似物，以增强GLP
‑
1类似物的稳定性，延长其半衰期，提高降低血糖的功效。
[0007]本专利技术的第二个目的在于提供一种上述胰高血糖素样肽
‑
1类似物的制备方法，以将均一的糖链添加到GLP
‑
1类似物的多肽链上。
[0008]本专利技术的第三个目的在于提供一种上述胰高血糖素样肽
‑
1类似物的应用。
[0009]为达到上述目的，本专利技术采用下述技术方案：
[0010]第一方面，本专利技术提供了一种N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1(GLP
‑
1)类似物，所述胰高血糖素样肽
‑
1类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，且所述氨基酸序列的天冬酰胺残基上修饰N
‑
聚糖。
[0011]进一步，所述N
‑
聚糖为复杂型N
‑
聚糖。
[0012]进一步，所述复杂型N
‑
聚糖为唾液酸化复杂型N
‑
聚糖(SCT)或去唾液酸化复杂型N
‑
聚糖(CT)。
[0013]进一步，所述N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物为结构如式III所示的去唾液酸化复杂型N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物(Glycan
‑
GLP
‑
1(G2)类似物)和结构如式IV所示的唾液酸化复杂型N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物(Glycan
‑
GLP
‑
1(G2S2)类似物)：
[0014][0015]本专利技术上述N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物中N
‑
糖基化修饰位点为Asn
34
，当Asn
34
替换为Asn
26
进行糖基化修饰时，稳定性、活性和葡萄糖稳定能力有所下降，说明不同糖基化修饰位点的N
‑
聚糖修饰对GLP
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物，其特征在于，所述胰高血糖素样肽
‑
1类似物的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，且所述氨基酸序列的天冬酰胺残基上修饰N
‑
聚糖。2.根据权利要求1所述的胰高血糖素样肽
‑
1类似物，其特征在于，所述N
‑
聚糖为复杂型N
‑
聚糖。3.根据权利要求2所述的胰高血糖素样肽
‑
1类似物，其特征在于，所述复杂型N
‑
聚糖为唾液酸化复杂型N
‑
聚糖或去唾液酸化复杂型N
‑
聚糖。4.根据权利要求1
‑
3任一所述的胰高血糖素样肽
‑
1类似物，其特征在于，所述N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物为结构如式III所示的去唾液酸化复杂型N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物或结构如式IV所示的唾液酸化复杂型N
‑
聚糖修饰的胰高血糖素样肽
‑
1类似物：5.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1
‑
4任一所述的胰高血糖素样肽
‑
1类似物或其盐。6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包含药学上可接
受的载体和/或辅料。7.权利要求1
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴志刚，邹卫，刘欢，梁增伟，王瑜，
申请(专利权)人：河北科技大学，
类型：发明
国别省市：