用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：向蜜蜂大脑组织中加入蛋白酶溶液，充分分解后，获得蜜蜂大脑组织混合物；所述蜜蜂大脑组织混合物经过滤后，收集大脑组织混合物滤液；将所述大脑组织混合物离心后，获得沉淀物，将所述沉淀物重悬后，离心，获得的沉淀用缓冲液重悬，获得蜜蜂大脑单细胞悬液；其中，所述蛋白酶溶液中含liberse TM酶和木瓜酶。本发明专利技术的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法，第一次将蜜蜂大脑单细胞进行分离，分离的单细胞纯度高，活性强，杂质碎片少，分离获得的蜜蜂大脑单细胞用于单细胞测序具有很好的效果。大脑单细胞用于单细胞测序具有很好的效果。大脑单细胞用于单细胞测序具有很好的效果。

【技术实现步骤摘要】
用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法。

技术介绍

[0002]蜜蜂不仅作为重要的农业昆虫在世界范围被广泛饲养，其独特的生殖现象和复杂的社会性行为也使得蜜蜂成为优秀的昆虫研究模型。意大利蜜蜂(Apis mellifera)作为社会性昆虫，在具备昆虫特征的同时，还具有明显的群体生物学的行为特点，对于人类的学习记忆能力和社会行为的研究是极为重要的模型。蜜蜂是农业网络中的关键物种，表现出极强的发育可塑性，具体体现在级型分化和社会分工的调控方面。虽然蜜蜂的遗传学操作(如基因编辑、遗传学杂交等)存在诸多困难，至今仍难以实现类似于果蝇中大规模筛选突变体的实验，但这并不影响蜜蜂逐渐成为表观遗传学和行为学研究的热点。
[0003]蜜蜂拥有体积仅约为1立方毫米的大脑，尽管大脑体积小，但在处理复杂的环境信息和调控丰富的行为能力上发挥了决定性作用。与其他昆虫一样，蜜蜂的脑组织可划分为前脑、中脑和后脑三部分。在蜜蜂中，前脑是大脑中最重要的也是所占体积最大的部本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：向蜜蜂大脑组织中加入蛋白酶溶液，充分分解后，获得蜜蜂大脑组织混合物；所述蜜蜂大脑组织混合物经过滤后，收集大脑组织混合物滤液；将所述大脑组织混合物离心后，获得沉淀物，将所述沉淀物重悬后，离心，获得的沉淀用缓冲液重悬，获得蜜蜂大脑单细胞悬液；其中，所述蛋白酶溶液中含liberse TM酶和木瓜酶。2.如权利要求1所述的用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶溶液中，liberse TM酶的浓度为12
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14U/ml。3.如权利要求1所述的用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶溶液中，木瓜酶的浓度为3
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5mg/ml。4.如权利要求1所述的用于单细胞测序的蜜蜂大脑单细胞悬液的制备方法，其特征在于，所述重悬液为含质量百分数为9
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘永军，柯俐，代平礼，陈夏桑，
申请(专利权)人：中国农业科学院蜜蜂研究所，
类型：发明
国别省市：