一种IPTG诱导人干扰素IFNG蛋白表达的方法技术

本发明专利技术公开了一种IPTG诱导IFN

【技术实现步骤摘要】
一种IPTG诱导人干扰素IFNG蛋白表达的方法


[0001]本专利技术涉及荧光实验
，具体涉及一种IPTG诱导人干扰素 IFNG蛋白表达的方法。

技术介绍

[0002]干扰素(Interferon,IFN)是由淋巴细胞和单核细胞产生的一类具有抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增殖及调节机体免疫功能等多种生物学活性的糖蛋白。根据诱生条件的不同，人们把干扰素分为α、β和γ三种类型。每一种类型根据其氨基酸的差异又可分为α1b、α2b等多个亚型。α型和β型干扰素合称为Ⅰ型干扰素，对酸不敏感；γ型则是Ⅱ型干扰素家族唯一成员(或称免疫干扰素)，其特点是酸不耐受。Ⅰ型干扰素主要通过诱导生物体合成抗病毒蛋白或者各种酶间接参与抗病毒、抗肿瘤等免疫反应；Ⅱ型干扰素主要参与诱导主要组织相容性复合体(MHC)类抗原的表达和免疫调节效应，但其抗病毒作用比Ⅰ型干扰素弱。在人体中，各类型干扰素来自于不同的组织细胞，如α型干扰素主要由B 淋巴细胞分泌；β型干扰素则主要在成纤维细胞和上皮细胞里产生出来，γ型由 T细胞和NK细胞产生。
[0003]IFN<br/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种IPTG诱导IFN
‑
γ重组蛋白表达的方法，其特征在于，具体步骤如下：1)将pET28a
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IFN
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γ原核表达载体，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经过选择培养、单克隆液体培养与PCR检测，选择带有目的条带的菌液，转接培养；2)在转接培养的菌液中加入IPTG，在IPTG终浓度0.1
‑
1.0mol/L条件下，10
‑
37℃诱导IFN
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γ蛋白表达4
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8小时；3)取步骤2)条件下制得的菌液，离心，弃上清；4)在沉淀中加入loading buffer混匀，100℃加热10min；5)离心，得到IFN
‑
γ蛋白的上清液。2.根据权利要求1所述一种IPTG诱导IFN
‑
γ重组蛋白表达的方法，其特征在于，所述步骤1)中重组表达载体pET28a
‑
IFN
‑
γ转化所用的培养基为SOC。3.根据权利要求1所述一种IPTG诱导IFN
‑
γ重组蛋白表达的方法，其特征在于，所述步骤1)中的选择培养和单克隆液体培养所使用的培养基均为LB+1
‰
Kana。4.根据权利要求1所述一种IPTG诱导IFN
‑
γ重组蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍加琪，安然，
申请(专利权)人：合肥同勉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：