牛STR复合扩增检测试剂盒、引物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了牛STR复合扩增检测试剂盒、引物组合物及其应用。具体地公开了同时扩增牛14个STR位点的引物组合物，所述14个STR位点分别为TGLA227、BM2113、ETH10、SPS115、ILSTS006、TGLA126、TGLA122、INRA023、BM1818、ETH225、BM1824、CSRM60、HAUT27和CSSM66，所述引物组合物由核苷酸序列分别如SEQ ID No.1

【技术实现步骤摘要】
牛亲缘关系鉴定的问题。所要解决的技术问题不限于所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了用于扩增牛14个STR位点的引物组合物，所述引物组合物由扩增如下14个STR位点的引物对组成：TGLA227、BM2113、ETH10、SPS115、ILSTS006、TGLA126、TGLA122、INRA023、BM1818、ETH225、BM1824、CSRM60、HAUT27和CSSM66，其中：
[0008]扩增TGLA227的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.1的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.2的DNA；
[0009]扩增BM2113的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.3的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.4的DNA；
[0010]扩增ETH10的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.5的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.6的DNA；
[0011]扩增SPS115的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.7的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.8的DNA；
[0012]扩增ILSTS006的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.9的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.10的DNA；
[0013]扩增TGLA126的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.11的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.12的DNA；
[0014]扩增TGLA122的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.13的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.14的DNA；
[0015]扩增INRA023的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.15的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.16的DNA；
[0016]扩增BM1818的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.17的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.18的DNA；
[0017]扩增ETH225的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.19的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.20的DNA；
[0018]扩增BM1824的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.21的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.22的DNA；
[0019]扩增CSRM60的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.23的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.24的DNA；
[0020]扩增HAUT27的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.25的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.26的DNA；
[0021]扩增CSSM66的引物对分别是核苷酸序列是SEQIDNo.27的DNA和核苷酸序列是SEQIDNo.28的DNA。
[0022]进一步地，SEQIDNo.1
‑
SEQIDNo.28所示的引物是根据STR位点两侧的保守序列设计的引物，分别为：
[0023]扩增TGLA227的上游引物D18S1
‑
F，其核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；
[0024]扩增TGLA227的下游引物D18S1
‑
R，其核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；
[0025]扩增BM2113的上游引物D2S26
‑
F，其核苷酸序列如SEQIDNo.3所示；
SPS115、ILSTS006)为蓝色组，荧光染料标记物为6
‑
FAM；所述第二组STR位点(TGLA126、 TGLA122、INRA023、BM1818)为绿色组，荧光染料标记物为HEX；所述第三组STR位 点(ETH225、BM1824)为黄色组，荧光染料标记物为TAMRA；所述第四组STR位点(CSRM60、 HAUT27、CSSM66)为红色组，荧光染料标记物为ROX；内标NH500为橙色组，荧光染 料标记物为NH650。
[0058]本专利技术荧光STR复合扩增检测STR位点排布图如图1所示。
[0059]本专利技术还提供了用于扩增牛14个STR位点的试剂，所述试剂包括本文中任一所 述的引物组合物。
[0060]进一步地，所述试剂可为溶液，所述试剂中，
[0061]SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示的引物的浓度为0.125μM；
[0062]SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示引物的浓度为0.25μM；
[0063]SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示引物的浓度为0.5μM；
[0064]SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示引物的浓度为0.25μM；
[0065]SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10所示引物的浓度为0.5μM；
[0066]SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12所示引物的浓度为0.25μM；
[0067]SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14所示引物的浓度为0.25μM；
[0068]SEQ ID NO：15和SEQ ID NO：16所示引物的浓度为0.5μM；
[0069]SEQ ID NO：17和SEQ ID NO：18所示引物的浓度为0.25μM；
[0070]SEQ ID NO：19和SEQ ID NO：20所示引物的浓度为0.25μM；
[0071]SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22所示引物的浓度为0.25μM；
[0072]SEQ ID NO：23和SEQ ID NO：24所示引物的浓度为0.25μM；
[0073]SEQ ID NO：25和SEQ ID NO：26所示引物的浓度为0.25μM；
[0074]SEQ ID NO：27和SEQ ID NO：28所示引物的浓度为0.25μM。
[0075]本专利技术还提供了一种用于牛个体识别和/或亲权鉴定的荧光STR复合扩增检测试 剂盒，所述试剂盒包含本文中任一所述的引物组合物，或包含所述试剂。所述试剂可 为五色荧光STR复合扩增体系。
[0076]进一步地，所述试剂盒还包括PCR扩增所需要的Taq DNA聚合酶、dNTP、PCR缓 冲液、Mg
2+
中的一种或多种。
[0077]所述试剂盒的各种试剂组分可以存在于分开的容器中，或者可以全部或部分预组 合成试剂混合物。
[0078]所述试剂盒可单管同时扩增14个牛的STR位点，主要包括TGLA227、BM2113、 ETH10、SPS115、ILSTS006、TGLA126、TGLA122、INRA023、BM1818、ETH225、BM1824、 CSRM60、HAUT27和CSSM66；所述STR位点排布如图1所示。
[0079]在本专利技术的一个实施方案中，所述试剂盒包含如表1中所示的复合扩增体系。
[0080]表1 荧光STR复合扩增检测试剂盒复合扩增体系
[008本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于扩增牛14个STR位点的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物由扩增如下14个STR位点的引物对组成：TGLA227、BM2113、ETH10、SPS115、ILSTS006、TGLA126、TGLA122、INRA023、BM1818、ETH225、BM1824、CSRM60、HAUT27和CSSM66，其中：扩增TGLA227的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.2的DNA；扩增BM2113的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.3的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.4的DNA；扩增ETH10的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.5的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.6的DNA；扩增SPS115的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.7的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.8的DNA；扩增ILSTS006的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.9的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.10的DNA；扩增TGLA126的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.11的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.12的DNA；扩增TGLA122的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.13的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.14的DNA；扩增INRA023的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.15的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.16的DNA；扩增BM1818的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.17的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.18的DNA；扩增ETH225的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.19的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.20的DNA；扩增BM1824的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.21的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.22的DNA；扩增CSRM60的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.23的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.24的DNA；扩增HAUT27的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.25的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.26的DNA；扩增CSSM66的引物对分别是核苷酸序列是SEQ ID No.27的DNA和核苷酸序列是SEQ ID No.28的DNA。2.根据权利要求1所述的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物按照STR位点分为四组，所述引物组合物由第一组STR位点的扩增引物、第二组STR位点的扩增引物、第三组STR位点的扩增引物和第四组STR位点的扩增引物组成，第一组STR位点的组成如下：TGLA227、BM2113、ETH10、SPS115和ILSTS006；第二组STR位点的组成如下：TGLA126、TGLA122、INRA023和BM1818；第三组STR位点的组成如下：ETH225和BM1824；第四组STR位点的组成如下：CSRM60、HAUT27和CSSM66；所述第一组STR位点的扩增引物、第二组STR位点的扩增引物、第三组STR位点的扩增引
物和第四组STR位点的扩增引物采用的荧光染料标记物彼此不同。3.根据权利要求2所述的引物组合物，其特征在于，所述第一组STR位点...

【专利技术属性】
技术研发人员：金鑫，张颖，
申请(专利权)人：公安部物证鉴定中心，
类型：发明
国别省市：