一种单链DNA结合蛋白的活性检测方法技术

本发明专利技术公开一种单链DNA结合蛋白的活性检测方法，利用荧光染料，不需使用放射性核素；通过单链DNA结合量与荧光强度的线性拟合方程，将单链DNA结合蛋白的活性与荧光强度差相对应，从而能够定量单链DNA结合蛋白的活性。从而能够定量单链DNA结合蛋白的活性。从而能够定量单链DNA结合蛋白的活性。

【技术实现步骤摘要】
一种单链DNA结合蛋白的活性检测方法


[0001]本专利技术涉及一种单链DNA结合蛋白的活性检测方法，属于生物化学领域。

技术介绍

[0002]单链DNA结合蛋白(single strand DNA
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binding protein，SSB)广泛参与一些生物功能的研究，SSB参与体内DNA复制、重组和修复，有效地保持解链DNA双链体的分离(防止再退火)并使两条链保持单链形式。SSB可用于需要以单链形式保存DNA或RNA的所有应用。聚合酶链式反应(PCR)技术可以通过添加SSB来优化，SSB可以稳定变性DNA，防止双链体形成并保护单链DNA(single strand DNA，ssDNA)免受核酸酶的消化。SSB还用于逆转录PCR和核酸的等温扩增。SSB在分子生物学中的进一步应用还需要一种能够对其活性进行定量检测的方法。
[0003]目前，单链DNA结合蛋白的活性检测方法比较局限，常用的方法是电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay，EMSA)，用单链DNA探针和SSB本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种单链DNA结合蛋白的活性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A.建立多个反应体系，每一反应体系包括单链DNA以及过量的单链DNA染料，所述多个反应体系具有不同的单链DNA浓度，测定每一反应体系对应的荧光强度，获得荧光强度与单链DNA浓度的相对关系；B.建立新的反应体系，包括一定量的所述单链DNA，过量的所述单链DNA染料，反应稳定后，得到荧光强度1；C.向步骤B的反应体系内加入一定量的待测单链DNA结合蛋白，反应稳定后，得到荧光强度2；D.计算荧光强度1与荧光强度2的荧光差值，结合所述荧光强度与单链DNA浓度的相对关系，计算得到待测单链DNA结合蛋白结合的单链DNA的量，则得到所述单链DNA结合蛋白的活性。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单链DNA染料是可以结合单链DNA的荧光染料，包括OliGreen ssDNA reagent、ssDNA Dye、Qubit ssDNA Assay kit中的染料。3.根据权利要求1所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：任黎明，段海峰，乔朔，
申请(专利权)人：赛纳生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：