用于表征宿主细胞蛋白的方法技术

提供了用于表征样品基质中的宿主细胞蛋白的方法。白的方法。白的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于表征宿主细胞蛋白的方法


[0001]本专利技术通常涉及表征宿主细胞蛋白。

技术介绍

[0002]基于蛋白质的生物制药产品已经成为治疗癌症、自身免疫性疾病、感染和心脏代谢紊乱的重要药物，并且所述基于蛋白质的生物制药产品代表了制药行业中增长最快的产品部分之一。将基于蛋白质的生物治疗剂引入临床可能是一项持续数年的任务，其需要在各种研究和开发学科中进行协调努力，所述研究和开发学科包含发现、过程和调配物开发、分析表征以及临床前毒理学和药理学。基于蛋白质的生物制药产品必须达到非常高的纯度标准。因此，在药物开发、生产、储存和处理的不同阶段监测此类生物制药产品中的任何杂质可能都是重要的。
[0003]例如，宿主细胞蛋白质(HCP)可以存在于使用基于细胞的系统开发的基于蛋白质的生物制药中。药物产品中HCP的存在需要被监测，并且在超过一定量时可能是不可接受的。用于表征HCP的测定的分析方法应显示出足够的准确性和分辨率。直接分析可能需要分离出足够大量的产物用于测定，这是不期望的并且仅在选定的情况下是可能的。因此，当与相当高浓度的活性药物混合时，确定工作流本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于表征样品基质中的宿主细胞蛋白的方法，所述方法包括：通过使所述样品基质与亲和色谱载体接触来富集所述样品基质中的宿主细胞蛋白；对来自所述亲和色谱的流通物进行分级分离；以及使用质谱仪表征所述宿主细胞蛋白中的至少一种宿主细胞蛋白。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和色谱载体是蛋白A色谱载体。3.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括用洗涤缓冲液洗涤所述亲和色谱载体并且收集所述流通物。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述亲和色谱载体包括蛋白A或蛋白G。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述蛋白A或所述蛋白G固定在琼脂糖或琼脂糖凝胶树脂上。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述质谱仪是串联质谱仪。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述质谱仪与液相色谱系统联用。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述液相色谱系统是纳米液相色谱系统。9.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括使用高场非对称波形离子迁移率谱装置表征所述宿主细胞蛋白中的至少一种宿主细胞蛋白。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述样品基质进一步包括所关注蛋白质。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述所关注蛋白质是抗体。12.根据权利要求10所述的方法，其中所述所关注蛋白质是融合蛋白。13.根据权利要求1所述的方法，其中所述分级分离是基于大小的分级分离。14.根据权利要求1所述的方法，其中所述分级分离是基于疏水性的分级分离。15.根据权利要求1所述的方法，其中分级分离是基于电荷的分级分离。16.根据权利要求1所述的方法，其中分级分离是基于pI的分级分离。17.根据权利要求1所述的方法，其中所述分级分离包括通过液相色谱进行的分级分离。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述液相色谱是反相液相色谱。19.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法能够表征比通过使所述样品基质与亲和色谱载体接触来富集所述样品基质中的宿主细胞蛋白而不进行所述分级分离步骤的方法多至少约50％的宿主细胞蛋白。20.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法能够表征比进行分级分离而不通过使所述样品基质与亲和色谱载体接触来富集所述样品基质中的宿主细胞蛋白的方法多至少约50％的宿主细胞蛋白。21.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法能够表征比通过使所述样品基质与亲和色谱载体接触来富集所述样品基质中的宿主细胞蛋白而不进行所述分级分离步骤的方法多至少约50％到约75％的宿主细胞蛋白。22.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法能够表征比进行分级分离而不通过使所述样品基质与亲和色谱载体接触来富集所述样品基质中的宿主细胞蛋白的方法多至少约50％到约75％的宿主细胞蛋白。23.一种用于表征具有所关注蛋白质的样品基质中的宿主细胞蛋白的方法，所述方法包括：
通过使所述样品基质与亲和色谱载体接触来富集所述样品基质中的宿主细胞蛋白；用洗涤缓冲液洗涤所述亲和色谱载体；收集流通物；对在进行所述富集步骤之后获得的样品进行分级分离；以及使用质谱仪表征所述宿主细胞蛋白中的至少一种宿主细胞蛋白。24.根据权利要求23所述的方法，其中所述流通物具有比所述样品基质减少的量的所关注蛋白质。25.一种用于表征样品基质中的宿主细胞蛋白的方法，所述方法包括：通过使所述样品基质与亲和色谱载体接触以获得混合物来富集所述混合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑晓菁，R，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：