一种普拉洛芬滴眼液有关物质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种分离检测普拉洛芬滴眼液有关物质的高效液相色谱方法，该方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以醋酸盐缓冲液

【技术实现步骤摘要】
一种普拉洛芬滴眼液有关物质的检测方法


[0001]本专利技术属于化学分析领域，具体涉及一种普拉洛芬滴眼液有关物质的检测方法。

技术介绍

[0002]普拉洛芬（Pranoprofen），化学名：（2RS）
‑2‑
（10H
‑9‑
噁
‑1‑
氮杂蒽
‑6‑
基）丙酸，化学结构式：普拉洛芬是welfide公司（原吉福制药株式会社，现三菱制药）开发的非甾体消炎镇痛药物。千寿制药株式会社将其开发为滴眼剂，1988年在日本上市。临床上用于眼睑炎、结膜炎、角膜炎、巩膜炎等外眼及眼前节炎症的对症治疗。
[0003]有关普拉洛芬滴眼液有关物质的分析方法文献报道较少，日本药典和韩国药典有收载普拉洛芬原料药质量标准，但其有关物质方法不能适用于普拉洛芬滴眼液有关物质的检测。已有的关于测定普拉洛芬滴眼液中有关物质的HPLC法（参考非专利文献1）专属性欠佳，能够检测到的杂质数量较少，部分杂质包括降解杂质未被洗脱，不能完全反映产品质量，给临床用药带来潜在安全性风险。此外，普拉洛芬对光不稳定，易发生光降解产生降解杂质，放置过程中还会逐渐产生氧化降解杂质，为了进一步保证普拉洛芬滴眼液的产品质量和患者的用药安全，有必要开发一种新的检测方法，可以更好地检测普拉洛芬滴眼液的有关物质及降解杂质，保证产品质量。
[0004]非专利文献1：张禹华等. HPLC法测定普拉洛芬滴眼液中有关物质[J]. 中国科技博览, 2010(26):298
‑
230。
专利
技术实现思路

[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种重复性、专属性、耐用性均能符合要求的普拉洛芬滴眼液的有关物质检测方法，本专利技术是采用高效液相色谱法检测，其操作步骤如下：（1）配制溶液：a、稀释剂：流动相A：流动相B=70：30；b、供试品溶液：取普拉洛芬滴眼液样品适量，加稀释剂稀释，作为供试品溶液；c、系统适用性溶液：取普拉洛芬滴眼液样品适量，放置光照箱内光照后用稀释剂稀释，作为系统适用性溶液；（2）检测分别取供试品溶液、系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图, 按面积归一
法计算；色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：254nm &274nm；流速：0.4~0.6mL/min；柱温：20~30℃；进样体积：10~50
µ
L；流动相：流动相A：0.08~0.12mol/L醋酸盐缓冲液，用冰醋酸调pH为4.5
±
0.2；流动相B：乙腈；梯度洗脱：其中，步骤b中供试品溶液的浓度为0.1~1mg/mL，作为优选，供试品溶液的浓度为0.2mg/mL；供试品溶液配制过程避光。
[0006]步骤c中，光照箱照度为4500lx
±
500lx，光照时间为15min。
[0007]步骤c中，系统适用性溶液的浓度为0.1~1mg/mL。
[0008]作为优选，步骤（2）中醋酸盐缓冲液的浓度为0.10mol/L，用冰醋酸调pH为4.50
±
0.02；进一步地，醋酸盐缓冲液为乙酸铵水溶液。
[0009]作为优选，步骤（2）中检测方法中的流速为0.5mL/min。
[0010]作为优选，步骤（2）中检测方法中的柱温为25℃。
[0011]作为优选，步骤（2）中检测方法中的进样体积为20
µ
L。
[0012]作为优选，步骤（2）中色谱柱的规格为3.0
×
100mm，2.7
µ
m。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术提供的普拉洛芬滴眼液有关物质检测方法，能在较短的时间内有效洗脱、分离普拉洛芬滴眼液有关物质，包括降解杂质和工艺杂质，同时可以避免辅料峰的干扰，且该方法专属性好、精密度高，耐用性好，能更好地控制普拉洛芬滴眼液产品质量。
附图说明
[0014]图1实施例1系统适用性溶液的液相色谱图；图2实施例1供试品溶液的液相色谱图；图3实施例2碱破坏供试品溶液的液相色谱图；图4实施例2氧化破坏供试品溶液的液相色谱图；图5实施例2高温破坏供试品溶液的液相色谱图；
图6对比实施例1系统适用性溶液的液相色谱图。
具体实施方式
[0015]下面结合实施例，更具体地说明本专利技术的内容。但本专利技术的实施并不局限于下面的实施例。
[0016]1、材料普拉洛芬原料药（广东先强药业有限公司，批号：201002）；硼酸（河北华晨药业有限公司，批号：210901）；硼砂（河北华晨药业有限公司，批号：210408）；聚山梨酯80（CRODA，批号：0001494588）；依地酸二钠水合物（MerckKGaA，批号：E300010907）；苯扎氯铵（湖北葛店人福药业有限责任公司，批号：F225C221001）。
[0017]2、主要仪器Agilent1260高效液相色谱仪；DAD检测器。
[0018]实施例1：普拉洛芬滴眼液有关物质的检测（1）高效液相色谱条件：色谱柱：Agilentinfinitylabproshell120EC
‑
C18,（3.0
×
100mm，2.7
µ
m）检测波长：254nm&274nm进样体积：20
µ
L柱温：25℃样品浓度：0.2mg/mL流速：0.5mL/min流动相：流动相A：0.10mol/L乙酸铵缓冲液（用冰醋酸调pH为4.50
±
0.02）；流动相B：乙腈。
[0019]梯度洗脱时间与流动相比例如下： （2）样品及溶液配制：空白辅料混合液：称取硼酸1.6g、硼砂0.8g、依地酸二钠水合物10mg、苯扎氯铵7mg、0.15g聚山梨酯80，加注射用水80mL搅拌至溶解再加注射用水定容至100mL，摇匀，即得。
[0020]空白辅料溶液：精密量取空白辅料混合液1mL，置5mL量瓶，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。
[0021]稀释剂：流动相A：流动相B=70：30。
[0022]空白溶液：稀释剂。
[0023]普拉洛芬滴眼液：称取硼酸1.6g、硼砂0.8g、依地酸二钠水合物10mg、苯扎氯铵
7mg、0.15g聚山梨酯80，加注射用水约80mL搅拌至溶解，再加入普拉洛芬0.1g，搅拌至溶解，最后加注射用水定容至100mL，用0.22μm微孔滤膜过滤，分装，即得。（定容前测pH值，应为7.0
‑
8.0）。
[0024]系统适用性溶液：精密量取普拉洛芬滴眼液1mL，置5ml透明量瓶中，开口放置光照箱内（照度为4500lx
±
500lx）光照15min，取出后用稀释剂稀释至刻度，摇匀。
[0025]供试品溶液：避光操作，精密量取普拉洛芬滴眼液1mL，置5mL量瓶，用稀释剂稀释至刻度，摇匀。
[0026]（3）测定法分别取空白溶液、空白辅料本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种普拉洛芬滴眼液有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法检测，操作步骤如下：（1）配制溶液：a、稀释剂：流动相A：流动相B=70：30；b、供试品溶液：取普拉洛芬滴眼液样品适量，加稀释剂稀释，作为供试品溶液；c、系统适用性溶液：取普拉洛芬滴眼液样品适量，放置光照箱内光照后用稀释剂稀释，作为系统适用性溶液；（2）检测：分别取供试品溶液、系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按面积归一法计算；色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：254nm&274nm；流速：0.4~0.6mL/min；柱温：20~30℃；进样体积：10~50
µ
L；流动相：流动相A：0.08~0.12mol/L醋酸盐缓冲液，用冰醋酸调pH为4.5
±
0.2；流动相B：乙腈；梯度洗脱：。2.根据权利要求1所述的普拉洛芬滴眼液有关物质的检测方法，其特征在于，所述的步骤b中供试品溶液的浓度为0.1~1mg/mL。3.根据权利要求1所述的普拉洛芬滴眼液有关物质的检测方法，其特征在于，所述的供试品溶液配制过程避光。4.根据权利要求1所述的普...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹敏，王宇，刘艳华，许梦洁，李双阳，
申请(专利权)人：杭州新博思生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：