本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体涉及一种伏立康唑中4
【技术实现步骤摘要】
一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法
[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法。
技术介绍
[0002]伏立康唑（voriconazole），化学名为（2R,3S）-2-（2,4-二氟苯基）-3-（5-氟-4-嘧啶）-1-（1H-1,2,4-三唑-1-基）-2-丁醇，是第二代三唑类抗真菌化合物，用于治疗真菌感染，为广谱抗真菌药，对人和动物的真菌感染均有治疗作用。
[0003]基因毒性杂质是一类可与DNA反应，造成DNA损伤，在很低水平下即可诱发基因突变，并可能致癌的杂质，基因毒性物质特点是在很低浓度时即可造成人体遗传物质的损伤，进而导致基因突变并可能促使肿瘤发生。因其毒性较强，对用药的安全性产生了强烈的威胁，近年来也越来越多的出现因为在已上市药品中发现痕量的基因毒性杂质残留而发生大范围的医疗事故，被FDA强行召回的案例，给药厂造成了巨大的经济损失。
[0004]近年来各国的法规机构如ICH、FDA、EMA等都对基因毒性杂质有了更明确的要求，越来越多的药企在新药研发过程中就着重关注基因毒性杂质的控制和检测。
[0005]4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶，以下简称M1，结构式：，是伏立康唑的中间体，在伏立康唑的合成过程中，该化合物可能成为伏立康唑终产物的杂质之一，是潜在的基因毒性杂质。
[0006]目前，中国专利文献CN110441460A公开了一种伏立康唑中微量基因毒性杂质检测方法，涉及伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测，该方法使用联苯-4-硫酚对待测样品进行衍生化处理后，采用高效液相色谱法进行检测，该方法使用高效液相色谱法进行检测，检测时间长，抗干扰能力弱，衍生试剂可能对目标物检测产生干扰。
[0007]本专利技术为解决伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测问题，提供了一种便捷、高效、准确的检测方法，该方法检测时间相对于高效液相检测时间短，出峰时间短，能快速，高效的对伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶进行检测，检测灵敏度更高，更能有效控制产品质量，相对于液相检测专属性更好，抗干扰能力强，不必担心衍生试剂或者衍生介质对目标物检测产生干扰，从而有效控制伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的含量，保障用药安全。
技术实现思路
[0008]本专利技术提供一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法，该方法便捷、高效、准确，在系统适用性、重复性、专属性、准确度方面完全符合中国药典方法验证的指导原则，可用于伏立康唑的质量控制。
[0009]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法，所述方法是通过4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶与2-巯基苯并咪唑衍生得到衍生物后，使用LCMS方法进行检测，所述检测方法包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制稀释液、空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液和衍生液，所述衍生液包括衍生剂、衍生介质和盐酸溶液，所述对照品溶液包括对照品储备液。
[0010]（2）测定方法：采用LCMS测定杂质的含量，待系统稳定后，分别进空白溶液，灵敏度溶液，对照品溶液和供试品溶液，记录谱图；Ⅰ：色谱条件如下:色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速0.5ml/min
±
0.1mL/min，柱温：40℃
±
5℃，进样量：0.5μl，流动相以甲酸：水体系为流动相A，以乙腈为流动相B，采用梯度洗脱；Ⅱ：MS条件：极性：正极，干燥气温度：350℃，干燥气流速：8L/min，雾化气压力： 40psi，毛细管电压：3500V，鞘气温度：350℃，鞘气流速：10 L/min，电压：135V，扫描模式：SIM，采集时间：3.0min-6.3min，SIM Ion：m/z 309.1，Dwell：200ms。
[0011]进一步的，所述稀释液为乙腈：水=50：50（V/V）；所述衍生剂：取适量2-巯基苯并咪唑置于容量瓶中，加入适量稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀；所述衍生介质：取适量氢氧化钠置于容量瓶中，加入水溶解并稀释至刻度，摇匀；所述盐酸溶液：取适量浓盐酸置于容量瓶中，加入水溶解并稀释至刻度，摇匀；所述空白溶液：取适量衍生剂、衍生介质和稀释液置于容量瓶中，摇匀，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加适量盐酸溶液，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；所述对照品储备液：量取适量对照品，置于容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；所述对照品溶液：量取适量对照品储备液，置于容量瓶中，加适量稀释液，再加衍生剂和衍生介质，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；所述灵敏度溶液：量取适量对照品溶液，置于容量瓶中，加空白溶液稀释至刻度，摇匀，即得；所述供试品溶液：取供试品适量置于容量瓶中，加适量稀释液，再加衍生剂和衍生介质，于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加适量盐酸溶液，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得；所述流动相为：流动相A：甲酸：水=1:1000（V/V）；流动相B：乙腈；所述甲酸为AR及以上；所述乙腈为HPLC级；所述水为超纯水；所述浓盐酸为AR及以上；所述氢氧化钠为AR及以上；所述色谱柱为Thermo Acclaim
TM RSLC120 C18，2.1
×
100mm，2.2 μm。
[0012]进一步的，所述流动相梯度过程如下：更优选的，本专利技术所述的测定方法，包括以下步骤：（1）配制溶液：稀释液：乙腈：水=50:50（V/V）；衍生剂：6.25mg/ml 2-巯基苯并咪唑溶液（取2-巯基苯并咪唑约625mg，精密称定，置100ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀）衍生介质：1mg/ml NaOH溶液（取氢氧化钠约100mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀）盐酸溶液：精密移取浓盐酸1.0ml，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度摇匀，即得；空白溶液：取25ml量瓶，加10ml稀释液，再加衍生剂1.0ml和衍生介质500
µ
l，摇匀；于80℃水浴加热20min，取出放冷至室温，加盐酸溶液1.0ml，再加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。
[0013]对照品储备液
①
：取4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶对照品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取上述溶液500
µ
l，置20ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：25
µ
g/ml）对照品储备液
②
：精密量取对照品储备液
①
750
µ
l，置100ml量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀，即得。（浓度：187.5ng/ml）对照品溶液：精密量取对照品储备液<本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种伏立康唑中4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶的检测方法，其特征在于，所述方法是通过4-(1-溴代乙基)-5-氟-6-氯嘧啶与2-巯基苯并咪唑衍生得到衍生物后，使用LCMS方法进行检测，所述检测方法包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制稀释液、空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液和衍生液，所述衍生液包括衍生剂、衍生介质和盐酸溶液，所述对照品溶液包括对照品储备液；（2）测定方法：采用LCMS测定杂质的含量，待系统稳定后，分别进空白溶液，灵敏度溶液，对照品溶液和供试品溶液，记录谱图；Ⅰ：色谱条件如下:色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流速0.5ml/min
±
0.1mL/min，柱温：40℃
±
5℃，进样量：0.5μl，流动相以甲酸：水体系为流动相A，以乙腈为流动相B，采用梯度洗脱；Ⅱ：MS条件：极性：正极，干燥气温度：350℃，干燥气流速：8L/min，雾化气压力： 40psi，毛细管电压：3500V，鞘气温度：350℃，鞘气流速：10 L/min，电压：135V，扫描模式：SIM，采集时间：3.0min-6.3min，SIM Ion：m/z 309.1，Dwell：200ms。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述稀释液为乙腈：水=50：50（V/V）；所述衍生剂：取适量2-巯基苯并咪唑置于容量瓶中，加入适量稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀；所...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘宁，李达胜，汤伟彬，蔡强，兰柳琴，
申请(专利权)人：珠海润都制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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