一种绿色精准的γ-氨基丁酸含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种绿色精准的γ

【技术实现步骤摘要】
一种绿色精准的
γ
‑
氨基丁酸含量测定方法


[0001]本专利技术涉及γ
‑
氨基丁酸含量测定
，尤其涉及一种绿色精准的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法。

技术介绍

[0002]γ－氨基丁酸是一种化合物，化学式是C4H9NO2，别名4－氨基丁酸，是一种四碳、非蛋白氨基酸，在脊椎动物、植物和微生物中广泛存在，γ－氨基丁酸长久以来被认为与植物多种应激和防御系统有关,γ－氨基丁酸会随着植物受到刺激而升高，被认为是植物中响应于各种外界变化、内部刺激和离子环境等因素如pH、温度、外部天敌刺激的一种有效机制，γ－氨基丁酸还可以调节植物内环境如抗氧化、催熟、保鲜植物等作用，近年来γ－氨基丁酸在植物中也被发现作为信号分子在植物中传递扩大信息，GABA曾在大豆、拟南芥、茉莉、草莓等植物中相继发现，低浓度的GABA有助于植物生长发育，高浓度下又会起相反的作用。
[0003]目前QB/T4587
‑
2013方法中采用的是γ
‑
氨基丁酸与邻苯二甲醛进行定量衍生反应，生成具有较强荧光和紫外吸收的异吲哚衍生物，由于该衍生物不稳定，对于衍生的时间要求相当严格，检测过程很难控制。在对γ
‑
氨基丁酸含量进行测定时多为通过检测试剂进行检测，涉及有毒试剂，同时在通过检测试剂进行检测时需要进行梯度洗脱，耗时较长，且样品前期处理辅助，检测误差风险增大。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种绿色精准的γr/>‑
氨基丁酸含量测定方法，以解决上述现有技术中的不足之处。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：一种绿色精准的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法，包括以下步骤：
[0006]S1：准确称取0.1gγ
‑
氨基丁酸标准品，用水溶解定容至100mL，用0.22μm滤膜过滤，收集滤液，作为标准溶液；
[0007]S2：准确称取0.1g粉碎试样，用水溶解稀释至曲线浓度范围内，用0.22μm滤膜过滤，收集滤液，作为待测样品溶液；
[0008]S3：标准曲线，分别稀释S1标准溶液(500μg/mL)配制成质量浓度分别为400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、10μg/mL、0μg/mL，进行色谱分析，以峰面积
‑
标准溶液浓度对数曲线作图，绘制标准曲线和回归方程。
[0009]S4：使用液相色谱仪对已制备好的试样进行测定，试样与标准溶液的处理至进样的时间应保持一致，并记录色谱峰的保留时间和峰面积。
[0010]S5：根据色谱峰的峰面积和浓度，出峰时间，根据色谱峰的峰面积，以外标法计算出相应的γ
‑
氨基丁酸的浓度。样品溶液中被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内且计算公式为：
[0011][0012]其中，C
对
表示标准溶液浓度(mg/ml)、A
对
表示标准溶液峰面积；A
供
表示待测样品溶液峰面积；V
供
表示待测样品溶液溶液体积；W
供
表示待测样品溶液的重量(g)。
[0013]作为上述技术方案的进一步描述：
[0014]称取0.1gγ
‑
氨基丁酸标准品和称取0.1g粉碎试样均采用精度为0.1mg的分析天平进行称取，且γ
‑
氨基丁酸标准品和粉碎试样均精确到0.0001g，且γ
‑
氨基丁酸标准品的纯度≥99.0％。
[0015]作为上述技术方案的进一步描述：
[0016]所述液相色谱仪为配有蒸发光衍射检测器和数据处理系统的高效液相色谱仪。
[0017]作为上述技术方案的进一步描述：
[0018]所述高效液相色谱仪中使用的色谱柱的等级为Hypersil ODS C18，5μm，4.6
×
250mm或以上分离效果的色谱柱，且柱温为30℃。
[0019]作为上述技术方案的进一步描述：
[0020]所述高效液相色谱仪中流动相由A相95％纯化水和B相5％甲醇组成，且纯化水和甲醇的纯度规格为色谱级。
[0021]作为上述技术方案的进一步描述：
[0022]所述高效液相色谱仪中流动相流动相压力为140～150bar，流速为1.0mL/min。
[0023]本专利技术提供了一种绿色精准的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法。具备以下有益效果：
[0024]该绿色环保的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法避免实验室使用有毒试剂，同时缩短检测周期，降低能耗，实现对γ
‑
氨基丁酸含量快速测定方法，同时含量稳定，操作方法绿色环保，样品处理简单，同时检测结果稳定。
附图说明
[0025]图1为本专利技术提出的一种绿色精准的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法中图谱一示意图；
[0026]图2为本专利技术提出的一种绿色精准的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法中图谱二示意图。
具体实施方式
[0027]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。
[0028]参照图1
‑
2，一种绿色精准的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法，包括以下步骤：
[0029]S1：准确称取0.1gγ
‑
氨基丁酸标准品，用水溶解定容至100mL，用0.22μm滤膜过滤，收集滤液，作为标准溶液；
[0030]S2：准确称取0.1g粉碎试样，用水溶解稀释至曲线浓度范围内，用0.22μm滤膜过滤，收集滤液，作为待测样品溶液；
[0031]S3：标准曲线，分别稀释S1标准溶液(500μg/mL)配制成质量浓度分别为400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、10μg/mL、0μg/mL，进行色谱分析，以峰面积
‑
标准溶液浓度对数曲线作图，绘制标准曲线和回归方程。
[0032]S4：使用液相色谱仪对已制备好的试样进行测定，试样与标准溶液的处理至进样的时间应保持一致。并记录色谱峰的保留时间和峰面积。
[0033]S5：根据色谱峰的峰面积和浓度，出峰时间，根据色谱峰的峰面积，以外标法计算出相应的γ
‑
氨基丁酸的浓度。样品溶液中被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内且计算公式为：
[0034][0035]其中，C
对
表示标准溶液浓度(mg/ml)、A
对
表示标准溶液峰面积；A
供
表示待测样品溶液峰面积；V
供
表示待测样品溶液溶液体积；W
供
表示待测样品溶液的重量(g本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种绿色精准的γ
‑
氨基丁酸含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：准确称取0.1gγ
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氨基丁酸标准品，用水溶解定容至100mL，用0.22μm滤膜过滤，收集滤液，作为标准溶液；S2：准确称取0.1g粉碎试样，用水溶解稀释至曲线浓度范围内，用0.22μm滤膜过滤，收集滤液，作为待测样品溶液；S3：标准曲线，分别稀释S1标准溶液(500μg/mL)配制成质量浓度分别为400μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、10μg/mL、0μg/mL，进行色谱分析，以峰面积
‑
标准溶液浓度对数曲线作图，绘制标准曲线和回归方程。S4：使用液相色谱仪对已制备好的试样进行测定，试样与标准溶液的处理至进样的时间应保持一致，并记录色谱峰的保留时间和峰面积。S5：根据色谱峰的峰面积和浓度，出峰时间，根据色谱峰的峰面积，以外标法计算出相应的γ
‑
氨基丁酸的浓度。样品溶液中被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内且计算公式为：其中，C
对
表示标准溶液浓度(mg/ml)、A
对
表示标准溶液峰面积；A
供
表示待测样品溶液峰面积；V
供
表示待测样品溶液溶液体积；W
供
表示待测样品溶液的重量(g)。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王震，王晓雷，刘醒，肖雨停，段增坤，
申请(专利权)人：天津世纪伟康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：