一种快速检测粮食中重金属铅离子的免疫学方法技术

一种快速检测粮食中重金属铅离子的免疫学方法属于免疫学检测领域，该方法包括以下步骤：(1)取载体蛋白、双功能鳌合剂、Pb(NO3)2及三乙胺，于HEPES缓冲溶液中溶解，用超滤或透析的方法去除未反应的低分子物质，剩余物于HEPES缓冲溶液中保存，分装；(2)将铅离子完全抗原包被于酶标板微孔内，接着用质量百分比为3％的BSA封闭，在37℃孵育，用PBST溶液洗涤得到包被好完全抗原并封闭的ELISA酶标板；(3)将铅离子完全抗原包被于酶标板微孔内封闭，再加入待检样品，PBST溶液洗涤，再加入抗铅单克隆抗体；再用PBST溶液洗涤，加入酶标记的羊抗鼠IgG，孵育后用PBST溶液洗涤，再加入底物进行显色反应，根据显色的深浅对样品中铅离子含量进行定性和半定量分析。行定性和半定量分析。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测粮食中重金属铅离子的免疫学方法
[0001]本专利技术属于免疫学检测领域，主要涉及一种快速检测粮食中重金属铅离子的免疫学方法。

技术介绍

[0002]重金属污染就是由重金属过量累积引起的污染，是导致环境恶化的一个重要因素，重金属污染物进入人体也会对人体造成极大的危害。社会经济的蓬勃发展以及生活质量的不断提高，人们对食品安全问题愈发关注。
[0003]铅是环境污染物中毒性很大的一种重金属,在自然界中分布广，工业用途多。由于铅是多亲和性毒物，易在人体的某些器官中积蓄起来造成慢性中毒危害人体健康，主要损害神经系统、血液系统、心血管及消化系统，对儿童的作用更为敏感。一些行业通过颁布行业标准规定了铅的最大允许量，其中粮食中的铅现行标准是0.4mg/kg。
[0004][0005]传统上，环境农产品中重金属残留的检测技术主要依靠大型仪器，如原子吸收分光光度法、电感耦合等离子体
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原子发射光谱法、电感耦合等离子体质谱分析、原子荧光光谱分析等，这些重金属检测方法虽然能精确测量样品中重金属含量，但检测相对费时、费力、且费用昂贵，此外，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速检测粮食中重金属铅离子的免疫学方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)铅离子完全抗原的制备：取4.5～10.0mg重量份载体蛋白、0.8～1.8mg重量份双功能鳌合剂、0.7～0.8mg重量份Pb(NO3)2及1.4～4.5mg重量份三乙胺，于1～3ml体积份的HEPES缓冲溶液中溶解，15～30℃温度下振荡8～24h后，用超滤或透析的方法去除未反应的低分子物质，剩余物于HEPES缓冲溶液中保存，分装，得到铅离子完全抗原；(2)包被好完全抗原并封闭的ELISA酶标板的制备：将步骤(1)所得的铅离子完全抗原包被于酶标板微孔内,铅离子完全抗原的加入量为100ng/well；接着用质量百分比为3％的BSA封闭，在37℃孵育1～5h，于吸水纸上拍干，用PBST溶液洗涤3次得到包被好完全抗原并封闭的ELISA酶标板。其中PBST的制备是由0.01M、pH值为7.4的PBS缓冲液与Tween
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20按体积比1000:0.5混合得到；(3)免疫学检测：将铅离子完全抗原包被于酶标板微孔内，接着封闭，再加入待检样品，于37℃反应至少5min，PBST溶液洗涤，再加入抗铅单克隆抗体，每孔加入100～500ng，于37℃孵育至少30min；再用PBST溶液洗涤，加入酶标记的羊抗鼠IgG，加入量为每孔10～14.5ng/we1l，于37℃孵育至少30min后用PBST溶液洗涤，再加入底物进行显色反应，根据显色的深浅对样品中铅离子含量进行定性和半定量分析。2.根据权利要求1所述的一种快速检测粮食中重金属铅离子的免疫学方法，其特征在于：所述的抗铅单克隆抗体的制备包括以...

【专利技术属性】
技术研发人员：王杰文，
申请(专利权)人：深圳中检联检测有限公司，
类型：发明
国别省市：