一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的试纸条及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的方法及应用，包括沙丁胺醇单克隆抗体和信号载体，所述的信号载体为负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞。本发明专利技术首次在免疫层析试纸条检测中以负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞构建探针，使用[3，3'，5，5'四甲基联苯胺(TMB)和过氧化氢(H2O2)]作为底物触发显色反应，可实现高灵敏目标物检测，检测限低至0.012ng/mL，与传统金标试纸条的灵敏度相比提高55倍。此外，本发明专利技术具有很好的应用前景，可以为为灵敏、精确和快速检测食源性兴奋剂提供了一个通用平台。同时，能成功应用于猪肝和牛肉样品中的沙丁胺醇检测。沙丁胺醇检测。

【技术实现步骤摘要】
一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇的试纸条及其应用


[0001]本专利技术属生物检测领域，涉及一种微生物纳米酶探针、检测沙丁胺醇方法及应用，具体涉及一种负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞作为信号载体，通过标记抗体制备探针，使用了该探针的试纸条，及其用于快速、灵敏检测沙丁胺醇的应用。

技术介绍

[0002]食品中食源性兴奋剂主要为β2‑
受体激动剂，食用含有这些食源性兴奋剂的食物会对人的身体和心理产生危害，十分不利于人们身心的健康发展。沙丁胺醇(SAL)是一种速效β2‑
肾上腺素受体激动剂，能选择性刺激支气管平滑肌的β2受体，在临床治疗方面，用来治疗支气管哮喘。但是SAL在体内吸收很快，容易蓄积在体内，会在毛发、血液或组织中残留。动物组织中残留的SAL会对人体健康产生负面影响，并引起一些临床症状，如心悸，肌肉震颤，头晕，大量出汗和发冷等。在养殖业中，当SAL剂量比正常治疗剂量高5
‑
10倍时，它可以显着增加瘦肉含量，同时减少脂肪沉积，从而可以显着提高经济效益。目前，已经报道了检测食源性兴奋剂沙丁胺醇的几种分析方法，包括本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微生物纳米酶探针，其特征在于，所述探针的信号载体为负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞；所述的酵母细胞为长2～3μm和宽1～2μm的椭球体；所述的氧化铱纳米粒子粒径为17～21nm。2.如权利要求1或2所述的微生物纳米酶探针，其特征在于，利用权利要求1所述的信号载体标记单克隆抗体；具体包括：制备氧化铱纳米粒子溶液，灭活的酵母细胞于氧化铱纳米粒子溶液中负载氧化铱纳米粒子，然后再进行单克隆抗体吸附即得。3.如权利要求2所述的微生物纳米酶探针，其特征在于，所述的制备氧化铱纳米粒子溶液包括：按质量比为5:3，将柠檬酸三钠和K2IrCl6混合制备成溶液，将溶液的pH调节至7.5，并在沸腾下回流；当溶液的颜色从棕色变为钢灰色时，继续搅拌溶液并加热30分钟；待溶液冷却至室温后，将pH重新调节至7.5，然后将溶液加热30分钟直至pH稳定，直至溶液的颜色变为深蓝色；制备灭活的酵母细胞溶液：酵母细胞在酵母提取物蛋白胨葡萄糖培养基中于28℃培养18h，通过离心收集酵母细胞并将酵母原液稀释OD
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至2；制备负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞：将制备好的氧化铱纳米粒子溶液与灭活的酵母细胞溶液溶液在37℃下混合10分钟；制备微生物纳米酶探针：将单克隆抗体加入负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞溶液中混合，用牛血清蛋白封闭，离心重悬于超纯水中。4.如权利要求3所述的微生物纳米酶探针，其特征在于，单克隆抗体与负载氧化铱纳米粒子的酵母细胞混合，混合比为4μg:1mL；混合时间为0.8～1.2h，添加牛血清蛋白的封闭时间为20～40min，终浓度为1％。5.权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：王丽，赵爽，何坤益，补彤，白菲儿，杨铠溶，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：