【技术实现步骤摘要】
一种rhNGF蛋白含量的测定方法
[0001]本专利技术涉及生物制药领域,具体地,本专利技术涉及一种精确测定rhNGF蛋白含量的方法。
技术介绍
[0002]依照2015年版《中国药典》第三部,生物技术药物蛋白质含量测定方法主要有:凯氏定氮法、Lowry法和紫外
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可见分光光度法等六种方法。其中凯氏定氮法是通过测定蛋白质中的氮含量,依据氮含量计算出蛋白质含量的绝对蛋白质定量方法;Lowry法和双缩脲法都是通过测定蛋白质在碱性铜溶液中的光吸收来计算蛋白质含量的测定方法,这两种方法都需要用标准蛋白质溶液来做线性回归或对照,通过对照标准物质才能计算出供试品的蛋白质含量。
[0003]考虑到重组人神经生长因子(rhNGF)与国家食品药品检定研究院颁发的蛋白质含量测定用标准物质
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人血清白蛋白存在着氨基酸组成及结构上的异质性,因此不能简单地选用人血清白蛋白蛋白质标准品作对照来测定rhNGF的蛋白质含量,所以本研究首先选择凯氏定氮法来进行rhNGF的绝对蛋白质含量测定。
[0004]选 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种使用紫外分光光度法测定rhNGF蛋白含量的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)采用凯氏定氮法测定rhNGF样品蛋白质浓度;(2)建立标准曲线;(3)紫外分光光度法测定rhNGF样品蛋白质含量。2.根据权利要求1的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)用凯氏定氮法标定好rhNGF绝对蛋白含量的样品,稀释一系列浓度并测定其对应的紫外吸收值,选取适...
【专利技术属性】
技术研发人员:魏琪,蒋飞,
申请(专利权)人:四川自豪时代药业有限公司,
类型:发明
国别省市:
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