一种快速检测杂交瘤细胞是否分泌抗体的试剂盒制造技术

一种快速检测杂交瘤细胞分泌抗体的方法，包括：展现杂交瘤细胞中的抗体Fc段于细胞质中，对胞质中Fc段进行分析，判断抗体特异性及细胞产生抗体的能力。本发明专利技术提供的方法使一些在细胞内表达的抗体和杂交瘤细胞中分泌抗体细胞占总细胞数的阳性率占比可以直观的检测出来。可以检测每一个单克隆细胞分泌抗体能力的高低和杂交瘤细胞表面的非特异性成分的高低。低。低。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测杂交瘤细胞是否分泌抗体的试剂盒


[0001]本专利技术属于细胞生物学领域，具体涉及一种快速检测杂交瘤细胞是否分泌抗体的试剂盒。

技术介绍

[0002]抗体是一种能特异性结合抗原的免疫球蛋白(Ig)，其可被蛋白水解酶水解。如被木瓜蛋白酶水解成2个F(ab)段和一个Fc段。抗体F(ab)段能够结合抗原，而Fc段功能则是和Fc受体结合，介导调理作用(opsonization)或抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(ADCC，antibody
‑
dependent cell
‑
mediated cytotoxicity)。由于Fc段可直接结合酶或荧光染料来标记抗体，因此其既是ELISA实验中抗体铆钉在固定板上的部位，也是免疫沉淀、免疫印迹和免疫组化中识别并结合二抗的部位。
[0003]杂交瘤细胞是将具有抗体分泌能力的B细胞和无限增生能力的骨髓瘤细胞体外融合后，在限定培养基中筛选出来的杂合细胞，其兼具抗体分泌能力和无限体外增生能力。筛选时，可直接检测杂交瘤细胞培养上清，完成初步筛选。一般通过小鼠杂交瘤，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速检测杂交瘤细胞分泌抗体的方法，其特征在于，展现杂交瘤细胞中的抗体Fc段于细胞质中，对胞质中Fc段进行分析，判断抗体特异性及细胞产生抗体的能力。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、待检细胞中加入蛋白转运抑制剂使细胞分泌的抗体滞留于细胞内；S2、对步骤S1中的细胞进行破膜和抗体固定；S3、步骤S2中的抗体与二抗进行反应；S4、向步骤S3反应后的体系中加入缓冲液，流式细胞仪进行检测。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的步骤S1中蛋白转运抑制剂为布雷非得菌素A、莫能菌素中的一种或多种。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的蛋白酶抑制剂溶于RPMI
‑
10％完全培养液；所述的蛋白酶抑制剂与RPMI
‑
10％完全培养液的比例为1：10
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张洋，褚建达，张娅，
申请(专利权)人：浙江正熙生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：