本发明专利技术属于生物高分子材料技术领域，公开了一种提高聚羟基脂肪酸酯中4
【技术实现步骤摘要】
MDF
‑
9，其保藏编号为GDMCC NO:61850。
[0011]优选的，所述单体调节剂在所述发酵体系中的添加量为0.5
‑
10g/L。
[0012]优选的，所述发酵体系中还包含有γ
‑
丁内酯、1,4
‑
丁二醇中的至少一种。更优选地，采用流加的方式将γ
‑
丁内酯或1,4
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丁二醇加入至发酵体系中。
[0013]优选的，所述发酵体系的pH值控制为7.5
‑
10。
[0014]优选地，所述发酵体系中发酵培养基包括有以下组分：碳源、氮源和无机盐。
[0015]更优选的，所述碳源包括葡萄糖、果糖、葡萄糖酸钠中的至少一种。
[0016]更优选地，所述氮源包括玉米浆干粉、酵母粉、胰蛋白胨、尿素、硫酸铵、氯化铵中的至少一种。
[0017]更优选地，所述无机盐包括氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸二氢钾，磷酸氢二钠、硫酸镁、柠檬酸钠、氯化亚铁、氯化钙、硫酸铜、氯化钴、氯化镍中的至少一种。
[0018]相对于现有技术，本专利技术的有益效果如下：
[0019](1)采用本专利技术所述的方法，可有效提高产物P(3HB
‑
co
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4HB)中4
‑
羟基丁酸单体比例，从而增强P(3HB
‑
co
‑
4HB)的韧性和延展性等力学性能。
[0020](2)本专利技术所述方法中通过加入呈碱性的强碱弱酸盐，可以有效减少发酵过程中如氢氧化钠等碱性pH调节剂的用量，节约了成本，降低了环境污染。
具体实施方式
[0021]为了让本领域技术人员更加清楚明白本专利技术所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例仅为本专利技术的优选实施例，对本专利技术要求的保护范围不构成限制作用，任何未违背本专利技术的精神实质和原理下所做出的修改、替代、组合，均包含在本专利技术的保护范围内。
[0022]以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者可以通过现有已知方法得到。
[0023]以下泥色盐单胞菌Halomonas lutescens MDF
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9已于2021年8月2日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(简称GDMCC，地址：广州市先列中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所，邮编510070)。保藏号为GDMCC NO：61850。
[0024]实施例1
[0025]本实施例提供一种提高聚羟基脂肪酸酯中4
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羟基丁酸单体比例的方法，采用以下步骤进行P(3HB
‑
co
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4HB)的制备：
[0026](1)配置初始发酵培养液：葡萄糖30g/L，玉米浆粉12g/L，尿素20g/L，氯化钠15g/L、硫酸镁0.2g/L，磷酸二氢钾5.2g/L，柠檬酸钠5g/L，二水氯化钙2.0g/L，盐酸41.7mL/L，硼酸300mg/L，六水氯化钴200mg/L，五水硫酸铜10mg/L，六水合氯化镍20mg/L，其余为去离子水。
[0027](2)将泥色盐单胞菌Halomonas lutescens MDF
‑
9以10％的接种量接种至初始发酵培养液中进行发酵，通气量为1vvm，发酵温度约为30℃，发酵过程中通过持续加入氢氧化钠维持pH约8.5。在发酵过程中分三批加入丙酸钠，丙酸钠在发酵培养液中的总添加量为8g/L。待发酵培养液的OD值(OD值测量波长为600nm)上升至100时，流加γ
‑
丁内脂，使其浓度维持在0.02g/L左右。在发酵过程中，通过补充葡萄糖控制发酵培养液中葡萄糖浓度不低
于10g/L。在发酵的前32h，通过补充尿素控制发酵培养液中尿素浓度不低于0.2g/L；32h后不再补加尿素，直至发酵自行结束。
[0028]经检测，发酵结束后发酵体系的OD值＝418；P(3HB
‑
co
‑
4HB)的产量为77.94g/L，其中4
‑
羟基丁酸(4HB)单体的含量为11.71g/L，所占比例为15.02％；氢氧化钠的用量为42.56g/L。
[0029]实施例2
[0030]本实施例提供一种提高聚羟基脂肪酸酯中4
‑
羟基丁酸单体比例的方法，采用以下步骤进行P(3HB
‑
co
‑
4HB)的制备：
[0031](1)配置初始发酵培养液：葡萄糖30g/L，玉米浆粉12g/L，尿素20g/L，氯化钠15g/L、硫酸镁0.2g/L，磷酸二氢钾5.2g/L，柠檬酸钠5g/L，二水氯化钙2.0g/L，盐酸41.7mL/L，硼酸300mg/L，六水氯化钴200mg/L，五水硫酸铜10mg/L，六水合氯化镍20mg/L，其余为去离子水。
[0032](2)将泥色盐单胞菌Halomonas lutescens MDF
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9以10％的接种量接种至初始发酵培养液中进行发酵，通气量为1vvm，发酵温度约为30℃，发酵过程中通过持续加入氢氧化钠维持pH约8.5。在发酵过程中分三批加入丁酸钠，丁酸钠在发酵培养液中的总添加量为8g/L。待发酵培养液的OD值上升至100时，流加γ
‑
丁内脂，使其浓度维持在0.02g/L左右。在发酵过程中，通过补充葡萄糖控制发酵培养液中葡萄糖浓度不低于10g/L。在发酵的前32h，通过补充尿素控制发酵培养液中尿素浓度不低于0.2g/L；32h后不再补加尿素，直至发酵自行结束。
[0033]经检测，发酵结束后发酵体系的OD值＝548；P(3HB
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co
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4HB)的产量为85.92g/L，其中4
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羟基丁酸(4HB)单体的含量为18.8g/L，所占比例为21.88％；氢氧化钠的用量为31.36g/L。
[0034]实施例3
[0035]本实施例提供一种提高聚羟基脂肪酸酯中4
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羟基丁酸单体比例的方法，采用以下步骤进行P(3HB
‑
co
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4HB)的制备：
[0036](1)配置初始发酵培养液：葡萄糖30g/L，玉米浆粉12g/L，尿素20g/L，氯化钠15g/L、硫酸镁0.2g/L，磷酸二氢钾5.2g/L，柠檬酸钠5g/L，二水氯化钙2.0g/L，盐酸41.7mL/L，硼酸300mg/L，六水氯化钴200mg/L，五水硫酸铜10mg/L，六水合氯化镍20mg/L，其余为去离子水。
[0037](2)将泥色盐单胞菌Halomonas lutescens MDF
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9以10％的接种量接种至初始发酵培养液中进行发酵，通气量为1vvm，发酵温度约为30℃，发酵过程中通过持续加入氢氧化钠维持pH约8.5。在发酵过程中分三批加入丙酸钠和丁酸钠，丙酸本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种提高聚羟基脂肪酸酯中4
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羟基丁酸单体比例的方法，其特征在于，通过在发酵体系中加入单体调节剂，制得P(3HB
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co
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4HB)；所述单体调节剂选自丙酸盐、丁酸盐中的至少一种。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵体系中所用微生物为埃希氏杆菌属、嗜盐菌属、盐单胞菌属、假单胞菌属、芽孢杆菌属中的至少一种。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述发酵体系中所用微生物为泥色盐单胞菌Halomonas lutescens MDF
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9，其保藏编号为GDMCC NO:61850。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单体调节剂在所述发酵体系中的添加量为0.5
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10g/L。5.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：银会娟，沈宏伟，吕金艳，孙磊，张恒文，叶秀生，
申请(专利权)人：珠海麦得发生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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