一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法技术

本发明专利技术涉及薄层色谱分析方法，具体涉及一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法。解决了现有对牛樟芝进行的液相指纹图谱鉴别研究方法，图谱单一，操作繁琐，不能直观的区分牛樟芝和牛樟木的技术问题。本发明专利技术方法包括以下步骤：1)制备样品液；2)进行薄层点样；3)制备展开剂；4)展开；5)显色与鉴别。本发明专利技术薄层色谱鉴别方法具有快速，低成本，简便高效、专属性强，检测结果直观，易于识别等多种优点，可快速的鉴别区分出牛樟芝和牛樟木，有效的保证了牛樟芝的质量，同时也填补了目前还没有对牛樟芝和牛樟木进行过薄层色谱研究的空白。和牛樟木进行过薄层色谱研究的空白。和牛樟木进行过薄层色谱研究的空白。

【技术实现步骤摘要】
一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法


[0001]本专利技术涉及一种薄层色谱分析方法，具体涉及一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法。

技术介绍

[0002]牛樟芝(Antrodiacamphorata)又名樟芝、牛樟菇、红樟芝、樟窟内菇，通常腐生于上百年牛樟树的树干空洞内。牛樟树是牛樟芝的唯一宿主，而且适合生长的地区极为有限，导致野生牛樟芝资源稀缺。牛樟芝是一种非常珍稀的药用菌，研究表明，牛樟芝具有多种药理作用，如抗肿瘤、抗炎、抗氧化、免疫调节及保肝等，也可用于治疗食物和药物中毒、腹泻、腹痛、高血压和皮肤瘙痒等。牛樟芝在中国台湾很早就作为中药使用，并在近十几年成为热点。因此，牛樟芝被称为“药中之王”、“森林红宝石”。由于牛樟树的滥采，野生牛樟芝数量日益稀少，中国台湾已将牛樟树列为保护树种。牛樟芝市场价每千克达十几万甚至几十万，市场前景巨大。牛樟芝因其独特性、稀有性以及神奇功效，使市场上出现了大量劣质的，甚至是假冒的牛樟芝药材。牛樟木是牛樟芝生长的宿主，因此市场上也出现了用牛樟木替代牛樟芝的现象，使牛樟芝的质量信誉受到了严重的影响。
[0003]相关研究人员用高效液相色谱法对牛樟芝做过指纹图谱研究，但是液相指纹图谱受其图谱单一，操作繁琐等因素影响，不能很好的体现牛樟芝的质量，同时也不能直观的区分牛樟芝和牛樟木。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是解决现有对牛樟芝进行的液相指纹图谱鉴别研究方法，图谱单一，操作繁琐，不能很好的体现牛樟芝的质量，同时也不能直观的区分牛樟芝和牛樟木的技术问题，而提供一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法。薄层色谱具有分离效果高、鉴别快、灵敏度高，成本低，图谱直观等多种优点，在中药材生产过程中得到了广泛应用。但目前还未见有对牛樟芝和牛樟木进行区分的薄层色谱研究报道。
[0005]本专利技术的技术方案是：
[0006]一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特殊之处在于，包括以下步骤：
[0007]1)制备样品液
[0008]取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过筛，分别置于可密封的试验容器中，再分别加入所述牛樟芝原料、牛樟木原料质量6～10倍量，质量浓度为70％～100％的乙醇，并进行超声提取30～60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液；
[0009]2)进行薄层点样
[0010]将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成点样原点；
[0011]3)制备展开剂
[0012]3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6～10:4～6:0.6～1.0的体积比混合均匀，得到展开剂；
[0013]3.2)将展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15～20分钟；
[0014]4)展开
[0015]4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G 薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
[0016]4.2)当展开剂的前沿上行至距离点样原点6cm～10cm时，将硅胶G薄层板取出；
[0017]5)显色与鉴别
[0018]待步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂干燥后，在光照下进行检视，得到检视图；有多个斑点且显示较为明显的为牛樟芝原料，多个斑点显示不明显，或者无显示的为牛樟木原料。
[0019]进一步地，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5～10％的硫酸乙醇溶液，随后在 100
‑
110℃下加热3～5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在365nm紫外光光照下进行检视，得到检视图；检视图显示为，在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、 Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示明显的为牛樟芝原料；在Rf＝0.58～0.62和Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示不明显的为牛樟木原料。
[0020]进一步地，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5～10％的硫酸乙醇溶液，随后在 100
‑
110℃下加热3～5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在白光光照下进行检视，得到检视图；在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、 Rf＝0.60～0.64、Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示明显的为牛樟芝原料；在 Rf＝0.23～0.28和Rf＝0.36～0.41处各有斑点且显示不明显的为牛樟木原料。
[0021]进一步地，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，在254nm紫外光照下进行检视，得到检视图；在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、 Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有斑点的为牛樟芝原料；斑点无显示的为牛樟木原料。
[0022]进一步地，步骤1)具体为，取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入所述牛樟芝原料、牛樟木原料质量8～10倍量、质量浓度为70％的乙醇，并进行超声提取60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。
[0023]进一步地，步骤2)中，所述点样原点位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为1.0～1.5cm。
[0024]进一步地，步骤3.1)中，甲苯、乙酸乙酯和甲酸的体积比为8:5:0.8。
[0025]进一步地，步骤3.2)中，所述展开缸采用双槽展开缸，双槽展开缸的大小为10
×
10cm、20
×
10cm或10
×
20cm，且双槽中的展开剂剂量保持一致，并预饱和15分钟。
[0026]进一步地，步骤4.2)具体为，当展开剂的前沿上行至距离点样原点 8cm～10cm时，将硅胶G薄层板取出。
[0027]进一步地，步骤5)中，所述硫酸乙醇溶液质量比浓度为10％。
[0028]本专利技术的有益效果：
[0029]1、本专利技术提供了一种快速，低成本，简便高效、专属性强，检测结果直观，易于识别的薄层鉴别方法，可解决牛樟芝和牛樟木的鉴别区分问题。
[0030]2、本专利技术提供的薄层鉴别方法，区分明显，易于识别，在254nm、365nm 和日光下，可对牛樟芝和牛樟木之间进行明显区分。
[0031]3、本专利技术选用适量的乙醇直接对原料药材进行超声处理，过滤，滤液作为检测溶液，样品前处理简单，成本低，易于操作。
[0032]4、本专利技术采用甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6～10:4～6:0.6～1.0体积比混合，得到展开剂，斑点分离效果好，各样品特征斑点突出，且本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：1)制备样品液取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过筛，分别置于可密封的试验容器中，再分别加入所述牛樟芝原料、牛樟木原料质量6～10倍量，质量浓度为70％～100％的乙醇，并进行超声提取30～60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液；2)进行薄层点样将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成点样原点；3)制备展开剂3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6～10:4～6:0.6～1.0的体积比混合均匀，得到展开剂；3.2)将展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15～20分钟；4)展开4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；4.2)当展开剂的前沿上行至距离点样原点6cm～10cm时，将硅胶G薄层板取出；5)显色与鉴别待步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂干燥后，在光照下进行检视，得到检视图；有多个斑点且显示较为明显的为牛樟芝原料，多个斑点显示不明显，或者无显示的为牛樟木原料。2.根据权利要求1所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5～10％的硫酸乙醇溶液，随后在100
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110℃下加热3～5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在365nm紫外光光照下进行检视，得到检视图；在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示明显的为牛樟芝原料；在Rf＝0.58～0.62和Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示不明显的为牛樟木原料。3.根据权利要求1所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5～10％的硫酸乙醇溶液，随后在100
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110℃下加热3～5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在白光光照下进行检视，得到检视图；在Rf＝0...

【专利技术属性】
技术研发人员：高娟，徐沛沛，惠玉虎，王春德，樊艳红，韦博，
申请(专利权)人：陕西嘉禾生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：