一株具有高抗逆性丁酸梭菌的优化制造技术

技术编号:33528329 阅读:48 留言:0更新日期:2022-05-19 01:54
本发明专利技术提供了一种具有高抗逆性丁酸梭菌的优化,该菌种是以保藏号为CGMCC NO.17327的丁酸梭菌为来源,通过诱变及高温处理获得。本发明专利技术解决了传统菌株耐受丁酸耐受力差而导致的发酵水平相对较低的情况,抗逆性较初始菌株有明显的提高,所制得的菌制剂,耐酸能力明显提高,本发明专利技术提供的丁酸梭菌在实际应用过程中,对病原菌的抑制能力得到明显提高,具有更强的应用价值;生产有机酸的能力得到明显提高。高。

【技术实现步骤摘要】
一株具有高抗逆性丁酸梭菌的优化


[0001]本专利技术属于微生物领域,具体涉及一种具有高抗逆性的丁酸梭菌JSAMYB

2,该菌株具有发酵水平高、产芽孢率高、耐高温、抗逆性强、可抑制多种肠道病原菌等优点。

技术介绍

[0002]丁酸梭菌是一种完全厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌,能在动物肠道内定植,并产生以丁酸等短链脂肪酸为主的益生产物,也存在于土壤、奶酪和天然酸奶中;周身鞭毛,具运动性;芽孢偏心或次端生(内生),呈圆形或椭圆形,无孢外壁和附属丝。丁酸梭菌芽孢结构能够抵抗动物胃肠道恶劣环境,同时能够耐受饲料加工过程中的高温、高湿过程;丁酸梭菌只对新生霉素、万古霉素和四环素等少数抗生素敏感,对其他多种抗生素具有很强的耐药性。自从 2003年欧盟批准丁酸梭菌用作肉鸡和断奶仔猪的饲料添加剂以来,目前已逐步推广作为益生菌类饲料添加剂使用,具有良好的应用前景。
[0003]丁酸梭菌能够防止病原菌及腐败菌在肠道内的异常增殖,同时还可以促进肠道有益菌群增殖、繁育,从而纠正肠道菌群紊乱,减少肠毒素的产生,其代谢产生的活性物质能增强动物的免疫功本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有高抗逆性丁酸梭菌的优化,其特征在于:该菌种是以保藏号为CGMCC NO.17327的丁酸梭菌为来源,通过诱变及高温处理获得。2.根据权利要求1所述的一种具有高抗逆性丁酸梭菌的优化,其特征在于:具体优化方法如下:(1)制备培养基以及诱变悬浮液:制备RCM液体培养基、活化培养基以及种子培养基备用;将保藏的丁酸梭菌菌株进行活化,挑选单菌落接种在RCM液体培养基中,培养至对数期时收集菌液,离心后收集菌体,用生理盐水洗涤,制得诱变悬浮液;(2)诱变处理:将步骤(1)制得的诱变悬浮液进行不同时间的紫外处理,获得菌悬液,用生理盐水将菌悬液依次稀释至10
‑3以及10
‑4,吸取至RCM液体培养基进行厌氧培养,长出成熟菌落体后,挑选单菌落并编号,分别进行保藏;(3)高温初筛:将步骤(2)中经过诱变的菌株活化至RCM液体培养基中进行厌氧培养,各菌株分别在不同温度条件下进行水浴处理,通过紫外分光光度计在OD
600
处分别测得最大吸光值,并记录,选出耐高温能力强的菌株,再转接到斜面培养基上进行保存;(4)复筛:将步骤(3)中经过高温初稿获得的耐高温能力强的菌株接入RCM液体培养基中,转接三至五代后,进行摇瓶发酵复筛; 厌氧培养后,测定发酵液活菌数以及芽孢数,以起始菌株活菌数作为对照,通过发酵水平进行比较,挑选出较高活菌数的菌株,作为优化后的菌株,编号为JSAMYB

2。3.根据权利要求2所述的一种具有高抗逆性丁酸梭菌的优化,其特征在于:所述步骤(1)中的RCM液体培养基的组成成分及各成分的量分别为:酵母浸膏3g,牛肉浸膏10g,胰蛋白胨10g,葡萄糖5g,可溶性淀粉1g,氯化钠5g,三水合乙酸钠3g,半胱氨酸盐酸盐0.15g,蒸馏水1000ml; 每1L的活化培养基以及种子培养基含有:葡萄糖20g、氯化钠5g、...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙育荣王燕鲁陈汪成飞吴真
申请(专利权)人:江苏奥迈生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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