【技术实现步骤摘要】
一株具有高抗逆性丁酸梭菌的优化
[0001]本专利技术属于微生物领域,具体涉及一种具有高抗逆性的丁酸梭菌JSAMYB
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2,该菌株具有发酵水平高、产芽孢率高、耐高温、抗逆性强、可抑制多种肠道病原菌等优点。
技术介绍
[0002]丁酸梭菌是一种完全厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌,能在动物肠道内定植,并产生以丁酸等短链脂肪酸为主的益生产物,也存在于土壤、奶酪和天然酸奶中;周身鞭毛,具运动性;芽孢偏心或次端生(内生),呈圆形或椭圆形,无孢外壁和附属丝。丁酸梭菌芽孢结构能够抵抗动物胃肠道恶劣环境,同时能够耐受饲料加工过程中的高温、高湿过程;丁酸梭菌只对新生霉素、万古霉素和四环素等少数抗生素敏感,对其他多种抗生素具有很强的耐药性。自从 2003年欧盟批准丁酸梭菌用作肉鸡和断奶仔猪的饲料添加剂以来,目前已逐步推广作为益生菌类饲料添加剂使用,具有良好的应用前景。
[0003]丁酸梭菌能够防止病原菌及腐败菌在肠道内的异常增殖,同时还可以促进肠道有益菌群增殖、繁育,从而纠正肠道菌群紊乱,减少肠毒素的产生,其代谢产生的活性物 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种具有高抗逆性丁酸梭菌的优化,其特征在于:该菌种是以保藏号为CGMCC NO.17327的丁酸梭菌为来源,通过诱变及高温处理获得。2.根据权利要求1所述的一种具有高抗逆性丁酸梭菌的优化,其特征在于:具体优化方法如下:(1)制备培养基以及诱变悬浮液:制备RCM液体培养基、活化培养基以及种子培养基备用;将保藏的丁酸梭菌菌株进行活化,挑选单菌落接种在RCM液体培养基中,培养至对数期时收集菌液,离心后收集菌体,用生理盐水洗涤,制得诱变悬浮液;(2)诱变处理:将步骤(1)制得的诱变悬浮液进行不同时间的紫外处理,获得菌悬液,用生理盐水将菌悬液依次稀释至10
‑3以及10
‑4,吸取至RCM液体培养基进行厌氧培养,长出成熟菌落体后,挑选单菌落并编号,分别进行保藏;(3)高温初筛:将步骤(2)中经过诱变的菌株活化至RCM液体培养基中进行厌氧培养,各菌株分别在不同温度条件下进行水浴处理,通过紫外分光光度计在OD
600
处分别测得最大吸光值,并记录,选出耐高温能力强的菌株,再转接到斜面培养基上进行保存;(4)复筛:将步骤(3)中经过高温初稿获得的耐高温能力强的菌株接入RCM液体培养基中,转接三至五代后,进行摇瓶发酵复筛; 厌氧培养后,测定发酵液活菌数以及芽孢数,以起始菌株活菌数作为对照,通过发酵水平进行比较,挑选出较高活菌数的菌株,作为优化后的菌株,编号为JSAMYB
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2。3.根据权利要求2所述的一种具有高抗逆性丁酸梭菌的优化,其特征在于:所述步骤(1)中的RCM液体培养基的组成成分及各成分的量分别为:酵母浸膏3g,牛肉浸膏10g,胰蛋白胨10g,葡萄糖5g,可溶性淀粉1g,氯化钠5g,三水合乙酸钠3g,半胱氨酸盐酸盐0.15g,蒸馏水1000ml; 每1L的活化培养基以及种子培养基含有:葡萄糖20g、氯化钠5g、...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙育荣,王燕,鲁陈,汪成飞,吴真,
申请(专利权)人:江苏奥迈生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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