OX40抗体及其医药用途制造技术

本发明专利技术涉及免疫治疗和分子免疫学技术领域，具体而言，涉及一种OX40抗体及其医药用途。本发明专利技术提供了对OX40具有高亲和力、能阻断OX40/OX40L相互作用及其信号传导的特异性抗体或其抗原结合片段。体或其抗原结合片段。体或其抗原结合片段。

【技术实现步骤摘要】
OX40抗体及其医药用途


[0001]本专利技术涉及免疫治疗和分子免疫学
，具体而言，涉及一种OX40抗体及其医药用途。

技术介绍

[0002]OX40(也称为CD134、ACT35或TNFRSF4)属于TNFR超家族成员，是一个分子量为50kD的膜糖蛋白，由细胞质尾区、跨膜区和胞外区组成。OX40在非活化的初始T细胞中基本无表达，但在活化T细胞中高表达(Paterson,et al.,(1987),Mol.Immunol.24:1281
–
90；Mallett,et al.,(1990),EMBO J.9:1063
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8；Calderhead,et al.,(1993),J.Immunol.151:5261
–
71)。OX40配体(OX40L)是一种34kD的II型膜蛋白，以三聚体的形式表达于抗原提呈细胞(Stuber,et al.,(1995),Immunity 2:507
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21；Ohshima,et al.,(1997),J.Immunol.159:3838
–
48；Al
‑
Shamkhani,et al.,(1997),J.Biol.Chem.272:5275
‑
5282)。OX40基因敲除小鼠经抗原刺激后，其CD4和CD8 T细胞增殖减少，并产生缺陷型免疫记忆反应，表明内源性OX40在T细胞免疫调节中发挥重要作用(Kopf,et al.,(1999),Immunity 11:699
–
708；Redmond,et al.,(2009),Crit.Rev.Immunol.29:187
–
201；Croft,et al.,(2010),Annu.Rev.Immunol.28:57
–
78)。
[0003]OX40是T细胞增殖和生存所必需的，缺失OX40的T细胞在分裂时和分裂后均不能有效存活，这与抗凋亡Bcl
‑
2家族成员表达水平下降相关(Rogers,et al.,(2001),Immunity 15:445
‑
455；Gramaglia,et al.,(2000),J.Immunol.165:3043
‑
3050)。利用天然配体(OX40L)或激活性抗体，结合T细胞表面的OX40受体，可以激活多个信号通路，包括转录因子Nuclear factor kappa
‑
light
‑
chain
‑
enhancer of activated B(NF
‑
kB)及活化T细胞转录因子(NFAT)通路，从而增强多个蛋白分子的表达，如存活蛋白、细胞周期蛋白A、周期蛋白依赖性激酶、Bcl
‑
2抗凋亡分子等，并在抗原刺激后增加多种效应T细胞亚群的存活率和细胞增殖(Rogers,et al.,(2001),Immunity.15:445
‑
455；Song,et al,(2005),Immunity.22:621
‑
31；Sun,et al.,(2018),Cell Death&Disease 9:616
‑
628；Croft,et al.,(2010),Annu.Rev.Immunol.28:57
‑
78)。OX40L
‑
OX40信号传递可以调节T细胞、抗原提呈细胞和NKT细胞的细胞因子分泌，并调节细胞因子受体传导通路的信号转导(Gramaglia,et al.,(1998),J.Immunol.161:6510
–
17；Diana,et al.,(2009),Immunity.30:289
‑
99；Ohshima,et al.,(1997),J.Immunol.159:3838
–
48)。OX40主要在活化的CD4+T细胞及某些活化的CD8+T细胞中表达(Salek
‑
Ardakani S etc.(2006)Curr.Immunol.Rev.2：37
‑
53)，并在一些慢性炎症及自体免疫疾病的记忆T细胞中有高水平表达，而它的配体(OX40L)也在提呈细胞中随着细胞的活化而表达。
[0004]近些年来，多种激活性OX40抗体已进入用于癌症免疫治疗的临床试验，而OX40的抑制性抗体也在多种自身免疫性疾病的动物模型中被证明具有保护作用，例如哮喘、肠易激性疾病、移植排斥、自身免疫性糖尿病、移植物抗宿主病(GvHD)、实验性自身免疫性脑脊髓炎以及特应性皮炎(AD)等。其中，特应性皮炎是一种慢性、复发性炎症性皮肤病，其特征
是强烈的瘙痒(例如，瘙痒)和鳞状和干燥的湿疹病变，对患者的生活质量产生重大影响。目前，AD的治疗方法仍然有限，而阻断OX40/OX40L信号通路能够特异性地抑制诱发疾病的效应T细胞的功能，但不会引起广泛的免疫抑制。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一目的在于提供一种能够特异性识别OX40的抗体或其抗原结合片段，其包含重链互补决定区HCDR1、HCDR2和HCDR3，以及轻链互补决定区LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列选自a～j所示互补决定区组合中的一组：
[0006]组合名称HCDR1HCDR2HCDR3LCDR1LCDR2LCDR3aSEQ ID NO:13SEQ ID NO:14SEQ ID NO:15SEQ ID NO:16SEQ ID NO:17SEQ ID NO:18bSEQ ID NO:19SEQ ID NO:20SEQ ID NO:21SEQ ID NO:22SEQ ID NO:23SEQ ID NO:24cSEQ ID NO:25SEQ ID NO:8SEQ ID NO:9SEQ ID NO:37SEQ ID NO:38SEQ ID NO:39dSEQ ID NO:10SEQ ID NO:11SEQ ID NO:12SEQ ID NO:40SEQ ID NO:41SEQ ID NO:42eSEQ ID NO:13SEQ ID NO:14SEQ ID NO:15SEQ ID NO:43SEQ ID NO:44SEQ ID NO:45fSEQ ID NO:16SEQ ID NO:17SEQ ID NO:18SEQ ID NO:46SEQ ID NO:47SEQ ID NO:48
。
[0007]本专利技术的第二目的在于提供一种分离的核酸，其编码如上所述的抗体或其抗原结合片段。
[0008]本专利技术的第三目的在于提供一种载体，其包含如上所述的核酸。
[0009]本专利技术的第四目的在于提供一种宿主细胞，其如上所述的核酸或载体。
[0010]本专利技术的第五目的在于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.能够特异性识别OX40的抗体或其抗原结合片段，其包含重链互补决定区HCDR1、HCDR2和HCDR3，以及轻链互补决定区LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列选自a～j所示互补决定区组合中的一组：
组合名称HCDR1HCDR2HCDR3LCDR1LCDR2LCDR3aSEQ ID NO:13SEQ ID NO:14SEQ ID NO:15SEQ ID NO:16SEQ ID NO:17SEQ ID NO:18bSEQ ID NO:19SEQ ID NO:20SEQ ID NO:21SEQ ID NO:22SEQ ID NO:23SEQ ID NO:24cSEQ ID NO:25SEQ ID NO:8SEQ ID NO:9SEQ ID NO:37SEQ ID NO:38SEQ ID NO:39dSEQ ID NO:10SEQ ID NO:11SEQ ID NO:12SEQ ID NO:40SEQ ID NO:41SEQ ID NO:42eSEQ ID NO:13SEQ ID NO:14SEQ ID NO:15SEQ ID NO:43SEQ ID NO:44SEQ ID NO:45fSEQ ID NO:16SEQ ID NO:17SEQ ID NO:18SEQ ID NO:46SEQ ID NO:47SEQ ID NO:48
。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其包含可变区，所述可变区的重链可变区(HCVR)和轻链可变区(LCVR)的序列具有选自A～F所示可变区序列组合中的一组：组合名称HCVRLCVRASEQ ID NO:1SEQ ID NO:2BSEQ ID NO:3SEQ ID NO:4CSEQ ID NO:5SEQ ID NO:6DSEQ ID NO:7SEQ ID NO:8ESEQ ID NO:9SEQ ID NO:10FSEQ ID NO:11SEQ ID NO:12。3.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，所述互补决定区组合选自b、c、d所示互补决定区组合中的一组，且所述的抗体或其抗原结合片段具有人源化可变区，b、c、d所示互补决定区组合所...

【专利技术属性】
技术研发人员：邱均专，李忠良，孙锴，陈均勇，孙键，王振生，区日山，
申请(专利权)人：英诺湖医药杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：