尿液间-α-胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段在妊娠糖尿病中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种尿液间

【技术实现步骤摘要】
ANTVQEATFQ MELPKKAFIT NFSMIIDGMT YPGIIKEKAE AQAQYSAAVA KGKSAGLVKA TGRNMEQFQV SVSVAPNAKI TFELVYEELL KRRLGVYELL LKVRPQQLVK HLQMDIHIFE PQGISFLETE STFMTNQLVD ALTTWQNKTK AHIRFKPTLS QQQKSPEQQE TVLDGNLIIR YDVDRAISGG SIQIENGYFV HYFAPEGLTT MPKNVVFVID KSGSMSGRKI QQTREALIKI LDDLSPRDQF NLIVFSTEAT QWRPSLVPAS AENVNKARSF AAGIQALGGT NINDAMLMAV QLLDSSNQEE RLPEGSVSLI ILLTDGDPTV GETNPRSIQN NVREAVSGRY SLFCLGFGFD VSYAFLEKLA LDNGGLARRI HEDSDSALQL QDFYQEVANP LLTAVTFEYP SNAVEEVTQN NFRLLFKGSE MVVAGKLQDR GPDVLTATVS GKLPTQNITF QTESSVAEQE AEFQSPKYIF HNFMERLWAY LTIQQLLEQT VSASDADQQA LRNQALNLSL AYSFVTPLTS MVVTKPDDQE QSQVAEKPME GESRNRNVHS GSTFFKYYLQ GAKIPKPEAS FSPRRGWNRQ AGAAGSRMNF RPGVLSSRQL GLPGPPDVPD HAAYHPFRRL AILPASAPPA TSNPDPAVSR VMNMKIEETT MTTQTPAPIQ APSAILPLPG QSVERLCVDP RHRQGPVNLL SDPEQGVEVT GQYEREKAGF SWIEVTFKNP LVWVHASPEH VVVTRNRRSS AYKWKETLFS VMPGLKMTMD KTGLLLLSDP DKVTIGLLFW DGRGEGLRLL LRDTDRFSSH VGGTLGQFYQ EVLWGSPAAS DDGRRTLRVQ GNDHSATRER RLDYQEGPPG VEISCWSVEL）；或由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的，且与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列。
[0007]优选地，所述制剂为妊娠糖尿病患者尿液间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段检测试剂盒。
[0008]优选地，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒如能够特异性结合间
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α
‑
胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种。
[0009]优选地，所述试剂盒包括直接检测间
‑
α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段的质谱等方法及其相关试剂盒。
[0010]优选地，所述试剂盒包括直接检测间
‑
α
‑
胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段的相关核酸检测等方法及其相关试剂盒。
[0011]优选地，所述试剂盒还包括选自下组的成分：固相载体，稀释液，对照品，标准品，质控品，检测抗体，第二抗体、第二抗体稀释液，发光试剂，洗涤液、显色液、终止液中的任意一种或几种的组合。
[0012]优选地，所述标准品包括间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白标准品、人源化标签抗体标准品；较佳地，所述质控品包括：间
‑
α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白质控品、人源化标签抗体质控品；较佳地，所述固相载体包括：微粒、微球、玻片、试纸条、塑料珠、液相芯片、微孔板或亲和膜等以及同等功能的其他载体。
[0013]优选地，所述固相载体的材质为聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺、纤维素中的任意一种及具有类似功能的载体。
[0014]专利技术人首先收集了妊娠糖尿病患者孕早期的尿液标本，离心后取上清，根据FPG水平分为GM1、GM2组；HbA1c水平分为BM1、BM2组。利用弱阳离子交换磁珠纯化和分离尿液标本。将 1μl标本与10μl基质混匀后，取1μl点在 Anchorchip靶板上，标本离子化后进行质谱分析，采集1000
‑
10000Da范围内的数据，获得由不同质荷比的蛋白峰构成的质谱多肽图。应用BioExplorer分析软件对妊娠糖尿病不同组别的所有质谱图进行分析，筛选差异性多肽。然后专利技术人对具有统计学意义的差异性多肽进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定，在数据库检索得到差异表达的间
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α
‑
胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白。
[0015]本专利技术通过研究证实，间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白随着FPG水平的升高而升高，差异具有统计学意义。从而提出检测尿液间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段可用于妊娠糖尿病患者诊治和血糖及代谢状态的监测和评估。
[0016]本专利技术发挥尿液标本获取无创、可大规模重复取样、保存方便的优势，利用尿液标本检测间
‑
α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段。
[0017]为让本专利技术的上述和其它目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合附图，作详细说明如下。
附图说明
[0018]图1是GM1和GM2组妊娠糖尿病患者尿液间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白表达的散点图。
具体实施方式
[0019]实施例1 尿液标本的收集与处理收集首都医科大学附属北京世纪坛医院产科门诊及住院的74例妊娠糖尿病（GDM）患者早孕期（8
‑
12周）的清洁中段尿液标本，年龄为24岁～42岁。妊娠期糖尿病患者符合2011年美国糖尿病协会（ADA）的糖尿病诊疗标准，自早孕期至产后42天的所有临床资料齐全，孕24～28周行75g 糖OGTT试验。不合并急慢性感染性、肿瘤、心血管疾病和严重肝肾功能障碍， 74位妊娠期糖尿病患者根据空腹血糖（FPG）和糖化血红蛋白（HbA1c）水平分为：GM1组（FPG＜4.50mmol/l）和GM2（FPG≥4.50 mmol/L）组；BM1组HbA1c≤5.1%；BM2组HbA1c>5.1%。尿液收集后，400
×
g离心5min，取上清，分装，
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80℃冻存。同时，为了追踪相同GDM患者在妊娠中期和妊娠晚期的尿液多肽分泌差异，74位GDM患者中有30名患者同时留取了妊娠中期（GDM
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M组，24～27周）和妊娠晚期（GDM
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L组，28～41周）的尿液样本。研究对象的临床特征见表1
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.尿液间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段在制备用于妊娠糖尿病患者诊治和血糖及代谢状态监测、评估和机理研究等制剂的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述尿液间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；或由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列衍生的，且与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述制剂为妊娠糖尿病患者尿液间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段检测试剂盒。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括抗原抗体反应的免疫方法及其试剂盒如能够特异性结合间
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α
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胰蛋白酶抑制剂重链H4蛋白及其多肽片段的适配体抗体或抗体片段中的一种或多种。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括直接检测间
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α
‑
胰蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：张曼，胡智颖，
申请(专利权)人：首都医科大学附属北京世纪坛医院，
类型：发明
国别省市：