一种鉴别蛋白纯度的试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种鉴别蛋白纯度的试剂盒及其应用。其中，本发明专利技术提供了一种纯化蛋白的鉴定检测方法，所述方法包括：(1)纯化蛋白预处理：(2)纯化蛋白鉴定检测。用本发明专利技术的方法预处理的蛋白，杂蛋白更少，蛋白纯度检测和评估结果更准确，更客观反映蛋白纯化效果，为后续蛋白质控提供更准确的依据。本发明专利技术可室温下操作，无须在冷冻或高温条件下进行，无需任何实验设备；操作简便，耗时短，能以试剂盒方式快速处理完成；对于CE

【技术实现步骤摘要】
一种鉴别蛋白纯度的试剂盒及其应用


[0001]本专利技术属于生物大分子检测方法领域，具体涉及一种鉴别蛋白纯度的试剂盒及其应用。

技术介绍

[0002]十二烷基磺酸钠毛细管电泳(CE
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SDS)和十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS
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PAGE)都是用于检测蛋白纯度的电泳方法，药典中均有记载，这两种方法是成药研发过程中进行产品质控的常用技术手段，是用于测定蛋白类生物大分子，如融合蛋白、抗体等物质的纯度和分子量的最常规的实验方法。
[0003]SDS是一种阴离子表面激活剂，在蛋白质溶液里加入SDS后，SDS能使蛋白质的氢键、疏水键打开并结合到蛋白质分子上，因此它与蛋白质结合后引起蛋白质构象的改变。与SDS结合后的蛋白质在水溶液中的形状近似雪茄形的长椭圆棒。不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离。如果蛋白质样品中含有多个蛋白质或者纯化蛋白样品中含有其他杂蛋白，经过SDS
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PAGE分离后不同的蛋白质会被分离成多个蛋白条带。如果纯化的样品中只含有同一种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纯化蛋白的鉴定检测方法，所述方法包括：(1)纯化蛋白预处理：用低浓度的三氟乙酸预处理纯化蛋白，获得经预处理的纯化蛋白，其中，所述低浓度的三氟乙酸的工作浓度为0.01％
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3％(v/v)；(2)纯化蛋白鉴定检测：采用十二烷基磺酸钠毛细管电泳(CE
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SDS)或十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS
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PAGE)鉴定检测步骤(1)获得的所述经预处理的纯化蛋白的纯度。2.权利要求1所述的方法，所述纯化蛋白为用分子生物学方法，经蛋白诱导表达，经纯化处理获得的蛋白；优选地，所述低浓度的三氟乙酸的工作浓度为0.05％
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2％(v/v)，优选0.1％
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1％(v/v)；更优选0.5％(v/v)。3.权利要求1或2所述的方法，其中，所述纯化蛋白中的蛋白浓度范围为0.2
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20mg/ml，优选0.2
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10mg/ml，优选0.5
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5mg/ml，更优选0.75
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5mg/ml。4.权利要求1
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3任一项所述的方法，其中，所述纯化蛋白与三氟乙酸接触，所述接触的方式选自：将纯化蛋白加入到含有三氟乙酸的溶液中、将纯化蛋白和三氟乙酸同时加入到溶液中和将三氟乙酸加入到纯化蛋白的溶液中；使纯化蛋白与三氟乙酸混合；在所述纯化蛋白与三氟乙酸混合后，于4
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25℃条件下放置5min以上，优选5
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60min，更优选5
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30min。5.权利要求1
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4任一项所述的方法，其中，所述方法中还可加入蛋白还原剂。6.权利要求5所述的方法，所述还原剂选自β
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巯基乙醇、二硫苏糖...

【专利技术属性】
技术研发人员：柯天一，张鹏飞，劳芳，孙雯倩，李波，姚德惠，欧阳芳幸，范墨林，
申请(专利权)人：昆山新蕴达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：