本发明专利技术公开了一种刺梨内生真菌及其代谢产物在广谱抗菌剂中的应用及制备，所述代谢产物由Epicoccum latusicollum经发酵，过滤，弃去菌丝体，发酵液采用乙酸乙酯萃取，减压浓缩至恒重，获得刺梨内生真菌代谢产物，即为广谱抗菌剂。本发明专利技术提供一株刺梨内生真菌及其代谢产物对Lasiodiplodia theobromae、Botryosphaeria dothidea、Colletotrichum capsici、Rhizoctonia solani、Fusarium oxysporum、Sclerotinia sclerotiorum、Talaromyces kabodanensis、Pseudomonas syringae pv.actinidiae、Pantoea agglomerans、Staphylococcus aureus、Bacillus subtilis、Escherichia coli和Pseudomonas aeruginosa的最低抑菌浓度分别为1.25、2.50、10.00、1.25、10.00、1.25、1.25、0.31、1.25、5.00、0.62、2.50和2.50 mg/mL。通过微生物发酵获得具有广谱抗菌活性的成分，工艺简单，安全，环保。环保。环保。
【技术实现步骤摘要】
刺梨内生真菌及其代谢产物在广谱抗菌剂中的应用及制备
[0001]本专利技术涉及一种微生物的应用，特别涉及一种刺梨内生真菌及其代谢产物在广谱抗菌剂中的应用及制备。
技术介绍
[0002]植物内生真菌(Endophytic fungi)是指生活在植物体内细胞中或在其生活史的某一段时期生活在植物组织内，对植物组织没有引起明显病害的一类真菌。近年来，已经从植物内生真菌中发现了许多具有强效抗病原真菌、抗病原细菌、杀虫、抗氧化、细胞毒性和抗癌特性的次生代谢产物。内生真菌不仅可以产生植物激素以促进宿主植物的生长，产生生物活性化合物以增加植物对环境胁迫的抵抗力，还可以促进植物最初产生的次生代谢产物的积累，包括药物成分。刺梨(Rosa roxburghii Tratt.)以富含维生素C、超氧化物歧化酶(SOD)和类黄酮而著称。在传统医学刺梨主要以根、叶及果实入药，用于治疗消食、痢疾、高血压、维生素C缺乏症等疾病，其药理作用在《本草纲目拾遗》中有详实记载。现代药理学研究表明从刺梨中提取的多种植物化学成分还具有抗真菌、抗细菌、抗氧化、调节机体免疫功能、预防和治疗2型糖尿病等生物活性。由于刺梨是一种抗菌化合物的植物来源，因此，它也是一种筛选抗菌潜力内生真菌的理想资源。从刺梨中分离内生真菌，寻找具有潜在生物活性的内生真菌，以开发生物活性天然产物。
技术实现思路
[0003]本专利技术目的是提供一种刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum及其代谢产物在制备广谱抗菌剂中的应用。
[0004]本专利技术采用的技术方案是：
[0005]一种刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum及其代谢产物在广谱抗菌剂中的应用，刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum，保藏至中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，生物保藏号：CGMCC 40110，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，请求保藏人对其培养物指定的名称、株号或符号：Epicoccum latusicollum HGUP191049。
[0006]所述刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum HGUP191049菌落是白色、絮状、圆形、浅灰色，靠近中心有浅红色的色素沉淀。
[0007]刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum及其代谢产物在广谱抗菌剂中的应用，所述所述的广谱抗菌剂对应为可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)、辣椒炭疽菌(Colletotrichum capsici)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)和果腐病菌(Talaromyces kabodanensis)抗真菌剂，以及丁香假单胞猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)、成团泛菌(Pantoea agglomerans)、金黃葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠肝菌
(Escherichia coli)和铜绿色假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)抗细菌剂。
[0008]所述的刺梨内生真菌代谢产物的制备方法是，将刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum经发酵培养获得培养液，通过抽滤或高速离心将培养液分离成发酵液和菌丝体，弃去菌丝体；发酵液采用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩至恒重，获得Epicoccum latusicollum代谢产物，即为广谱抗菌剂。
[0009]所述的刺梨内生真菌代谢产物的制备方法是：将刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum经发酵培养获得培养液，通过抽滤或高速离心将培养液分离成发酵液和菌丝体，弃去菌丝体；发酵液采用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩至恒重，获得Epicoccum latusicollum HGUP191049代谢产物：将刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum HGUP191049接种于PDB发酵培养基中，28
±
1℃，160～220r/min培养5～14d，获得培养液，通过抽滤或高速离心(10000～12000r/min)将培养液分离成发酵液和菌丝体，弃去菌丝体。发酵液采用乙酸乙酯萃取(体积比1:1～1:2)，重复萃取3次，35～55℃减压浓缩至恒重，获得Epicoccum latusicollum HGUP191049代谢产物，即为广谱抗菌剂。所述培养基为马铃薯葡萄糖肉汤培养基(PDB)：马铃薯(去皮)200g、葡萄糖20g、蒸馏水1000mL，pH自然。
[0010]更进一步，所述刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum发酵前先活化培养，然后直接(或4℃低温保存5～30d后)接入发酵培养基。所述活化培养为：将Epicoccum latusicollum HGUP191049接种于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基中，28
±
1℃，培养3～7d。所述PDA培养基为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15～20g，蒸馏水1000mL，pH自然。
[0011]与现有技术相比，本专利技术提供一种刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum，通过微生物发酵得到广谱抗菌活性成分，Epicoccum latusicollum代谢产物可作为广谱抗菌剂，经过试验，对可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)、辣椒炭疽菌(Colletotrichum capsici)、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)、果腐病菌(Talaromyces kabodanensis)、丁香假单胞猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)、成团泛菌(Pantoea agglomerans)、金黃葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠肝菌(Escherichia coli)和铜绿色假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的最低抑菌浓度分别为1.25、2.50、10.00、1.25、10.00、1.25、1.25、0.31、1.25、5.00、0.62、2.50和2.50mg/mL。因其成分天然，而天然成分的广谱抗菌剂是未来市场趋势，工艺简单，安全，环保，试验结果见图4和图5。
附图说明
[0012]图1为菌株HGUP191049的菌落形态(正反面)；
[0013]图2为菌株HGU本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种刺梨内生真菌及其代谢产物在广谱抗菌剂中的应用。2.根据权利要求1所述的刺梨内生真菌及其代谢产物在广谱抗菌剂中的应用，其特征在于：所述的广谱抗菌剂对应为可可毛色二孢菌（Lasiodiplodia theobromae）、葡萄座腔菌（Botryosphaeria dothidea）、辣椒炭疽菌（Colletotrichum capsici）、水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）、尖孢镰孢菌（Fusarium oxysporum）、核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）和果腐病菌（Talaromyces kabodanensis）的抗真菌剂；以及丁香假单胞猕猴桃致病变种（Pseudomonas syringae pv. actinidiae）、成团泛菌（Pantoea agglomerans）、金黃葡萄球菌（Staphylococcus aureus）ATCC 6538、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CMCC (B) 63501、大肠肝菌（Escherichia coli）CMCC (B) 44102和铜绿色假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）ATCC 27853的抗细菌剂。3.如权利要求1或2所述的刺梨内生真菌代谢产物的制备方法，其特征在于：将刺梨内生真菌Epicoccum latusicollum 经发酵培养获得培养液，通过抽滤或高速离心将培养液分离成发酵液和菌丝体，弃去菌丝体；发酵液采用乙酸乙酯萃取，有机相浓缩至恒重，获得刺梨内生真菌Epic...
【专利技术属性】
技术研发人员：姜于兰，张洪，
申请(专利权)人：贵州省分析测试研究院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。