一种含有水溶性脂肪酸和瓜蒌皮多糖的生物制剂制造技术

本发明专利技术提供了一种含有水溶性脂肪酸和瓜蒌皮多糖的生物制剂，属于生物医学技术领域。本发明专利技术所提供的瓜蒌皮多糖可以有效的促进小肠上皮细胞屏障功能，并且可以有效的逆转TNF

【技术实现步骤摘要】
一种含有水溶性脂肪酸和瓜蒌皮多糖的生物制剂


[0001]本专利技术属于生物医学
，尤其涉及一种含有水溶性脂肪酸和瓜蒌皮多糖的生物制剂。

技术介绍

[0002]小肠是人体重要的消化器官，对于促进肠道的健康和吸收，一方面需要增加肠道中绒毛的长度来促进肠道的吸收功能，另一方面，需要增加肠黏膜的屏障功能来保护肠道的健康。肠黏膜屏障包括肠上皮细胞屏障，免疫屏障和微生物屏障，其中肠上皮细胞屏障是最主要的一道屏障，是肠黏膜屏障具有选择性通透的基础。但是随着年龄的增长或是不良的生活习惯，会导致肠道的屏障受损，进而导致肠道的透过性上升。此时，肠道内的细菌或其他有害物质会经由细胞间隙转移至生物体内，导致促炎因子释放，诱发炎症。
[0003]因此，有效的促进肠上皮细胞的屏障可以有效的促进肠道的健康。同时，将促进肠道吸收和促进肠道健康的物质相结合可以更好的促进人体健康。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种可以同时促进肠道吸收和肠道健康的生物制剂。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：本专利技术提供了瓜蒌皮多糖在制备促进小肠上皮细胞屏障功能的生物制剂中的应用，所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所述瓜蒌皮多糖提取液3倍量体积的95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。
[0006]优选地，所述瓜蒌皮多糖促进小肠上皮细胞中ZO
‑
1蛋白和Claudin
‑
1蛋白的表达。
[0007]其次，本专利技术提供了瓜蒌皮多糖在制备小肠上皮细胞ZO
‑
1蛋白表达促进剂中的应用，所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所述瓜蒌皮多糖提取液3倍量体积的95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收
集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。
[0008]其次，本专利技术提供了瓜蒌皮多糖在制备小肠上皮细胞Claudin
‑
1蛋白表达促进剂中的应用，所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所述瓜蒌皮多糖提取液3倍量体积的95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。
[0009]其次，本专利技术提供了瓜蒌皮多糖在制备小肠上皮细胞屏障损伤保护剂中的应用，所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括步骤如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所述瓜蒌皮多糖提取液3倍量体积的95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。
[0010]其次，本专利技术提供了一种含有水溶性脂肪酸和瓜蒌皮多糖的生物制剂，其特征在于，其特征在于，所述生物制剂的有效成分为水溶性脂肪酸和瓜蒌皮多糖，所述水溶性脂肪酸的化学式如下所示：；所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所述瓜蒌皮多糖提取液3倍量体积的95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。
[0011]优选地，所述水溶性脂肪酸和所述瓜蒌皮多糖的质量比例为1:10
‑
10:1。
[0012]优选地，所述水溶性脂肪酸和所述瓜蒌皮多糖占所述生物制剂总重量的1
‑
90%。
[0013]优选地，所述生物制剂用于促进肠道吸收和促进肠道健康。
[0014]本专利技术的有益效果是：本专利技术所提供的瓜蒌皮多糖可以有效的促进小肠上皮细胞屏障功能，并且可以有效的逆转TNF
‑
a所导致的小肠上皮细胞屏障损伤，通过将瓜蒌皮与水溶性脂肪酸结合制成生物制剂可以实现同时促进肠道吸收和促进肠道健康。
附图说明
[0015]图1 瓜蒌皮多糖对于ZO
‑
1和Claudin
‑
1蛋白表达的促进作用；图2 瓜蒌皮多糖逆转TNF
‑
a所导致的ZO
‑
1和Claudin
‑
1的蛋白表达下降。
具体实施方式
[0016]为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本方案进行阐述。
[0017]实施例1（1）将100g干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）加入2000ml去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至400ml，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入1200ml 95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。
[0018]实施例2（1）将瓜蒌皮多糖使用DMEM培养基配置为0mg/ml， 25mg/ml和50mg/ml的瓜蒌皮多糖试剂；（2）将Caco
‑
2接种于Transwell小室中，制备单层上皮屏障；（3）对照组加入0mg/ml瓜蒌皮多糖，实验组加入25mg/ml和50mg/ml的瓜蒌皮多糖处理Caco
‑
2细胞24h，每组设置3个重复；（4）处理结束后，加入RIPA裂解液，充分裂解后，提取总蛋白得到各组的蛋白样品并测定蛋白浓度；（5）取30ug的蛋白样品进行电泳，电泳结束后进行转膜；（6）转膜结束后，将膜置于封闭液中，封闭1h；（7）将本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.瓜蒌皮多糖在制备促进小肠上皮细胞屏障功能的生物制剂中的应用，其特征在于，所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所述瓜蒌皮多糖提取液3倍量体积的95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述瓜蒌皮多糖促进小肠上皮细胞中ZO
‑
1蛋白和Claudin
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1蛋白的表达。3.瓜蒌皮多糖在制备小肠上皮细胞ZO
‑
1蛋白表达促进剂中的应用，其特征在于，所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所述瓜蒌皮多糖提取液3倍量体积的95%乙醇,4℃放置24h，离心20min，收集沉淀；（5）将所述沉淀使用无水乙醇、丙酮和乙醚洗涤后，得到瓜蒌皮多糖。4.瓜蒌皮多糖在制备小肠上皮细胞Claudin
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1蛋白表达促进剂中的应用，其特征在于，所述瓜蒌皮多糖的制备方法包括如下步骤：（1）将干燥的瓜蒌皮清洗干净并使用烘干机烘干后，使用粉碎机粉碎为粉末；（2）按照1:20料液比加入去离子水，混合均匀后，500W超声提取3h，得到瓜蒌皮浸提液；（3）离心15分钟后，收集上清，65℃蒸发至上清体积的20%，冷却至室温，得到瓜蒌皮多糖提取液；（4）加入所...

【专利技术属性】
技术研发人员：范瑞锋，刘军，
申请(专利权)人：北京天赋神奇科技有限公司，
类型：发明
国别省市：