羧基化DNA芯片的制备方法技术

本发明专利技术提供一种羧基化DNA芯片的制备方法，本发明专利技术以普通玻片为载体，在玻片表面进行羧基化修饰后，可通过共价键引入氨基寡核苷酸链，从而达到后续DNA捕获的目的。与传统的合成工艺相比，本发明专利技术制备的羧基修饰芯片基片具有荧光背景低，信号强度大，固定效率高，制造成本低，步骤简单易行等优点。易于产业化和流程化，可广泛应用于各类DNA芯片上。可广泛应用于各类DNA芯片上。

【技术实现步骤摘要】
羧基化DNA芯片的制备方法


[0001]本专利技术涉及生物芯片加工领域，具体地说，涉及一种羧基化DNA芯片的制备方法。

技术介绍

[0002]生物芯片(biochip)技术是80年代发展起来的一门新兴技术，通常生物芯片以硅片、玻璃或者高分子等作为基底材料，集成多种生物活性物质(DNA、蛋白质、组织细胞等)，利用荧光或同位素探针与生物活性物质在基片上进行杂交，并利用先进的成像设备获取图像信息，从而获取微观信息。生物芯片同半导体芯片一样，能够快速地进行复杂、精确的运算。生物芯片主要有基因芯片(DNA芯片)、蛋白质芯片和组织芯片三大类。其中，DNA芯片是生物芯片中发展最快的，具体来讲，它是通过检测基底材料与带有荧光标记的探针分子杂交后的信号强弱来获取样品分子的数量和序列信息。
[0003]与传统基因诊断技术相比，DNA芯片技术诊断效率高，采用杂交检测的方式，通常能在30min内完成检测；检测效率高，DNA芯片因其能在基片上修饰多条序列结构，因而可以同时检测多个序列。
[0004]DNA芯片制备过程复杂，所需工艺流程较多，因而多种因素会本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.羧基化DNA芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)玻片清洗；(2)玻片表面硅烷化修饰；(3)玻片表面羧基化修饰；(4)将步骤(3)得到的羧基化玻片置于EDC和NHS混合溶液中，进行活化羧基反应；(5)将步骤(4)所得活化后的玻片放入氨基修饰的寡核苷酸链溶液中，进行缩合反应，即得羧基化DNA芯片；步骤(2)中使用硅烷化试剂3
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氨丙基三乙氧基硅烷对玻片进行处理，得到硅烷化玻片；步骤(3)中将硅烷化玻片洗净后放入30
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60ml去离子水和250
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500μl聚丙烯酸的混合液中，并用盐酸调pH8.0，进行羧基化反应，得到羧基化玻片。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)包括：1)将49ml 90％
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98％乙醇和1
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3ml 3
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氨丙基三乙氧基硅烷于烧杯中混匀，倒入装有玻片的培养皿中，用保鲜膜将培养皿密封，避光，置于脱色摇床上50
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150rpm室温振荡30分钟；取出玻片，用去离子水冲洗玻片6
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8次，氮气吹干；2)将玻片放入盛有90％
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98％乙醇的培养皿内，50
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150rpm振荡清洗10
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30分钟；然后取出玻片放入盛有去离子水的培养皿内，50
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150rpm振荡清洗5
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15分钟；取出玻片，用去离子水冲洗6
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8次，氮气吹干后，将玻片置于烘箱内120℃烘烤50
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90分钟；最后将玻片从烘箱中取出避光放置，冷却至室温，即得硅烷化玻片。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)包括：1)将硅烷化玻片放入培养皿内，取60ml去离子水和500μl聚丙烯酸混匀，用2M盐酸调pH至8.0后倒入装有玻片的培养皿内，用保鲜膜将培养皿密封，避光，置于脱色摇床上50
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150rpm室温振荡20
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40分钟；2)取出玻片，用去离子水冲洗6
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8次，然后氮气吹干，得到羧基化玻片。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)包括：配制EDC和NHS混合溶液，将羧基化玻片放入所述混合溶液中，于室温1000
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2000rpm振荡反应30mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑洪坤，刘敏，张梦龙，李佳，
申请(专利权)人：北京百迈客生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：