一种稳定同位素标记甲氨蝶呤内标试剂的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种临床治疗药物血药浓度监测用稳定同位素标记甲氨蝶呤内标试剂的制备方法，属于临床治疗药物血药浓度监测用标准物质研发领域。本发明专利技术以稳定同位素标记对甲苯磺酸甲酯为原料，经加成、缩合、水解，最后分离纯化得到稳定同位素标记甲氨蝶呤。本发明专利技术工艺路线具有合成所需原料简单易得、反应条件温和、不使用剧毒甲基化试剂、最终产物总收率高且易分离提纯。最终产物稳定同位素标记甲氨蝶呤的化学纯度可达99％以上，同位素丰度可达99％以上。本制备方法所制得的稳定同位素标记甲氨蝶呤内标试剂能满足临床治疗药物血药浓度监测用液相色谱串联质谱法所需稳定同位素标记内标试剂的技术要求。标试剂的技术要求。标试剂的技术要求。

【技术实现步骤摘要】
一种稳定同位素标记甲氨蝶呤内标试剂的制备方法


[0001]本专利技术涉及一种临床治疗药物血药浓度监测用稳定同位素标记甲氨蝶呤内标试剂的制备 方法，属于临床治疗药物血药浓度监测用标准物质研发领域。

技术介绍

[0002]甲氨蝶呤(Methotrexate，MTX)是一种抗叶酸类抗肿瘤药，主要通过对二氢叶酸还原酶 的抑制而达到阻碍肿瘤细胞的合成，而抑制肿瘤细胞的生长与繁殖，广泛用于治疗绒毛膜上 皮癌、恶性葡萄胎、各类急性白血病、乳腺癌、小细胞肺癌、头颈部癌、消化道癌、宫颈癌 及恶性淋巴瘤等。甲氨蝶呤为现阶段临床治疗儿童急性淋巴细胞白血病常用药物之一，常规 剂量甲氨蝶呤不易透过血脑、血眼、血睾屏障，而大剂量甲氨蝶呤才能透过上述三大屏障， 有效提高脑脊液、血液药物浓度，发挥治疗效果；同时，大剂量甲氨蝶呤也被用作是骨肉瘤 的标准化诊疗方案，已广泛应用于临床治疗中。甲氨蝶呤在体内分布、生物转化、吸收、排 泄的个体差异较大，若发生排泄延迟，可引起产生显著的不良反应，如急性肾损伤、骨髓抑 制、黏膜炎、肝毒性及胃肠道反应等。甲氨蝶呤的疗效、不良反应与使用剂量密切本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种稳定同位素标记甲氨蝶呤内标试剂的制备方法，该稳定同位素标记的甲氨蝶呤内标试剂的化学结构如式(Labeled
‑
Methotrexate)所示：其中X为
12
C或
13
C，Y为H或D，其特征在于，其制备步骤总路线为：其中X为
12
C或
13
C，Y为H或D，制备步骤如下：(1)在有机溶剂、碱、相转移催化剂存在条件下，加入稳定同位素标记对甲苯磺酸甲酯，然后加入N
‑
(4
‑
氨基苯甲酰)
‑
L
‑
谷氨酸二乙酯，在30℃～120℃条件下，反应12～48小时；TLC跟踪反应原料反应完全后，反应混合溶液用水淬灭，过滤，滤液用有机溶剂萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，加入干燥剂干燥，减压蒸馏除去溶剂，残留物经柱层析得到稳定同位素标记N
‑
(4
‑
甲基氨基苯甲酰)
‑
L
‑
谷氨酸二乙酯；该步骤反应如下所示：其中稳定同位素标记对甲苯磺酸甲酯的化学结构如式(I)所示，稳定同位素标记N
‑
(4
‑
甲基氨基苯甲酰)
‑
L
‑
谷氨酸二乙酯的化学结构如式(II)所示，其中X为
12
C或
13
C，Y为H或D；(2)将稳定同位素标记N
‑
(4
‑
甲基氨基苯甲酰)
‑
L
‑
谷氨酸二乙酯溶于有机溶剂中，加入6
‑
(溴甲基)
‑
2，4
‑
蝶啶二胺氢溴酸盐和缚酸剂，在20℃～80℃条件下，反应12～48小时；TLC
跟踪反应原料反应完全后，反应混合溶液用水淬灭，过滤，滤液用有机溶剂萃取，合并有机相，依次用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，饱和氯化钠溶液洗涤，加入干燥剂干燥，减压蒸馏除去溶剂，残留物经柱层析得到稳定同位素标记N
‑
[4
‑
[[(2，4
‑
二氨基
‑6‑
蝶啶)甲基]甲氨基]苯甲酰]
‑
L
‑
谷氨酸二乙酯；该步骤反应如下所示：其中稳定同位素标记N
‑
[4
‑
[[(2,4
‑
二氨基
‑6‑
蝶啶)甲基]甲氨基]苯甲酰]
‑
L
‑
谷氨酸二乙酯的化学结构如式(Ⅲ)所示，其中X为
12
C或
13
C，Y为H或D；(3)将稳定同位素标记N
‑
[4
‑
[[(2,4
‑
二氨基
‑6‑
蝶啶)甲基]甲氨基]苯甲酰]
‑
L
‑
谷氨酸二乙酯溶于有机溶剂中，加入无机碱，在20℃～100℃条件下反应2～12小时；TLC跟踪反应原料反应完全后，反应液过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂；加入酸调节p...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玮，李珂珂，李宇孟，潘黎东，
申请(专利权)人：谱同生物医药科技常州有限公司，
类型：发明
国别省市：