超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法技术

本发明专利技术涉及抗生素生化检测技术领域，尤其涉及一种超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法。本发明专利技术采用UPC2对氟苯尼考对映体进行分离，考察了氟苯尼考检测波长和储存稳定性，同时还考察了手性色谱柱、梯度分离条件、助溶剂、系统背压、柱温、定容试剂对氟苯尼考对映体分离的影响。最佳色谱条件为：手性色谱柱Acquity Trefoil CEL2(150 mm

【技术实现步骤摘要】
超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法


[0001]本专利技术涉及抗生素生化检测
，尤其涉及一种超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法。

技术介绍

[0002]氟苯尼考(Florfenicol，FF)又称氟甲砜霉素，化学名称为2,2
‑
二氯
‑
N
‑
[(1R,2S)
‑3‑
氟
‑1‑
羟基
‑1‑
(4
‑
甲基磺酰基苯基)
‑2‑
丙基]乙酰胺，是一种常用的兽用抗生素
[1]，抑菌效果好、抗菌谱广、安全高效，常用于防治畜禽消化道和呼吸道细菌性感染病
[2]。氟苯尼考结构中存在两个对映体：(
‑
)
‑
氟苯尼考(左旋体)、(+)
‑
氟苯尼考(右旋体)(图1)。研究发现，氟苯尼考外消旋体中不同结果对映体之间的生物活性差异较大，其中含有抗菌活性的对映体为(
‑
)
‑
氟苯尼考(左旋体)，无抗菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法，该方法采用Waters超高效合相色谱仪进行检测，氟苯尼考对映体为（
‑
）
‑
氟苯尼考、（+）
‑
氟苯尼考；其特征在于，该方法采用Acquity Trefoil CEL2手性色谱柱分离氟苯尼考对映体，流动相A为CO2，助溶剂B为甲醇，梯度洗脱，流速1.0 mL/min；检测波长为224 nm，进样体积5
ꢀµ
L，系统背压17.2 Mpa，柱温 40 ℃。2.根据权利要求1所述的超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法，其特征在于，梯度洗脱程序为：0~2 min（10%B），2.0~3.0 min（10%～20%B），3.0～6.0 min（20%B），6.0～6.1 min（20%～10%B），6.1～8.0 min（10%B）。3.根据权利要求1所述的超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法，其特征在于，外消旋体标准储备液的制备方法如下：准确称取各氟苯尼考外消旋体标准品0.01 g，精确至0.1 mg，用甲醇准确定容至10 mL容量瓶中，配制成1.00 g/L的标准储备液，
‑
18 ℃保存30 天。4.根据权利要求3所述的超高效合相色谱法分离和测定氟苯尼考对映体的方法，其特征在于，氟苯尼考外消旋体的标准中间溶液的制备方法如下：准确吸取一定量的外消旋体标准储备液，用正庚烷稀释至10.00 mg/L的标准中间溶液，
‑
18 ℃保存14 天...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文华，雷美康，徐敦明，侯建波，谢文，张雅琴，汪鹏，王英，胡起立，王良莉，徐可，
申请(专利权)人：杭州海关技术中心，
类型：发明
国别省市：