胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用。IGFBP2干预可以显著的提高髓鞘化水平，并且改善应激脱髓鞘引起的精神症状。且改善应激脱髓鞘引起的精神症状。且改善应激脱髓鞘引起的精神症状。

【技术实现步骤摘要】
胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用。

技术介绍

[0002]髓鞘是包裹在神经细胞轴突外面的一层膜，即髓鞘由施万细胞和髓鞘细胞膜组成。其作用是绝缘，防止神经电冲动从神经元轴突传递至另一神经元轴突。脱髓鞘是指髓鞘形成后发生的髓鞘损坏。脱髓鞘疾病是一类病因不相同、临床表现各异、但有类同特征的获得性疾患，其特征的病理变化是神经纤维的髓鞘脱失而神经细胞相对保持完整。由于神经冲动的正常传导依赖于轴突周围髓鞘的绝缘特性，髓鞘功能障碍或髓鞘的改变会损害学习和适应行为。研究数据表明，在整个生命周期中，即使髓鞘的微小变化也会对参与认知和行为的回路和系统层面上的机制产生影响。髓鞘的功能可能比以前假设的更广泛：功能失调或适应不良的髓鞘形成可能会导致神经退行性疾病和神经精神疾病，这些疾病迄今被认为具有神经元基础。
[0003]许多人类和动物研究报告表明，中枢神经系统特定脑区的白质脱髓鞘可能是精神障碍疾病的重要病理生理特征。白质作为重要的神经基质连接分布式大脑系统。神经影像学研究揭示了暴露于压力的人类白质的异常微观结构。据报道，白质脱髓鞘的改变与压力适应不良和恢复能力有关。同时，来自焦虑症患者的证据强烈表明前额叶皮层相关通路的白质脱髓鞘与特质焦虑评分呈负相关。同时，在具有焦虑样及抑郁样行为的各种动物应激模型中也观察到了mPFC中髓鞘的丢失。我们推测，当髓鞘损伤得到及时有效的修复时，发生焦虑症、抑郁症及认知损伤等精神障碍的风险会降低。
[0004]胰岛素生长因子结合蛋白2(IGFBP2)作为IGF结合蛋白中的六大成员之一，是一种具有自分泌和旁分泌的生长因子。研究表明，IGFBP2不仅参与大脑的生长发育，还参与调节神经元的可塑性、调节空间学习记忆和信息处理等高级认知功能。此外，IGFBP2在中枢系统中广泛存在，并且在发育中的脑中高度表达，在初代星形胶质细胞和神经元中分泌。其在外周中的浓度较低，IGFBP2的分子量为36kD，可以穿过血脑屏障(blood
‑
brain barrier，BBB)。但是目前并没有相关研究证明IGFBP2可以治疗脱髓鞘后的精神障碍。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是克服了上述现有技术的缺点，提供一种胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用。
[0006]本专利技术提供的技术方案具体为，胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用。
[0007]较佳地，胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备提高髓鞘化水平的药物中的应用。其中，提高髓鞘化水平包括在髓鞘化状态和髓鞘化数量方面。
[0008]或者，胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗脱髓鞘疾病的药物中的应用。
[0009]较佳地，所述的神经脱髓鞘性疾病(脱髓鞘性疾病)包括焦虑抑郁症状和认知损伤症状。
[0010]本专利技术还提供了所述的胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用的评价方法，所述的方法包括以下步骤：
[0011]步骤1：建立脱髓鞘模型；
[0012]步骤2：选择评价标准；
[0013]步骤3：评价IGFBP2干预效果。
附图说明
[0014]图1a为药物脱髓鞘造模及IGFBP2干预流程图。
[0015]图1b为应激脱髓鞘造模及IGFBP2干预流程图。
[0016]图2a、2b为通过药物脱髓鞘验证IGFBP2干预对动物髓鞘化水平的影响。
[0017]图3a～3e为通过应激脱髓鞘验证IGFBP2干预对动物髓鞘化水平的影响。
[0018]图4a～4f为通过药物脱髓鞘验证IGFBP2干预对动物应激脱髓鞘后行为学的影响。
[0019]图5a～5h为通过应激脱髓鞘验证IGFBP2干预对动物应激脱髓鞘后行为学的影响。
具体实施方式
[0020]为了能够更清楚地描述本专利技术的
技术实现思路
，验证IGFBP2在治疗神经脱髓鞘性疾病中的作用，下面结合具体实施例来进行进一步的描述。
[0021]建立脱髓鞘大鼠模型
[0022]SD大鼠饲养在12小时光照/黑暗节律环境中，可以自由获取水和食物。所有的行为学实验均在动物的光照节律中进行。
[0023]药物脱髓鞘：
[0024]首先，利用SD大鼠造模，异氟醚(R510
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22，RWD China，4
‑
5％诱导，1
‑
2％维持)用于诱导麻醉。深度麻醉后，使用33号注射器针头(Hamilton)在以下立体坐标下，通过手术将1μL 1％溶血卵磷脂(LPC,Sigma
‑
Aldrich)溶解在盐水中，对照组使用同体积的盐水，将液体注射到mPFC的双侧：+2.7毫米；前囟的中间侧，0.4毫米；和背腹
‑
硬脑膜表面以下，3.3毫米。溶血卵磷脂体积为1μL，单侧注射时间为15min。注射后，针头静置5分钟，使药液完全吸收。慢慢调节Z轴旋钮向上拔针。缝合皮肤以完成脑定位注射。
[0025]应激脱髓鞘：
[0026]应激方式为：长期不可预期慢性应激(CUMS)，即采用不同的应激方式，进行为期5周的慢性应激，每天一次。具体的应激方式见表1。
[0027]表1.CUMS应激方式
[0028]应激类型描述持续时长笼子倾斜笼子倾斜45
°
12小时陌生鼠将一只陌生动物放在笼子中12小时食物或水剥夺将食物或水拿走12小时湿笼100克垫料加200毫升水12小时
持续照明在夜晚进行照明12小时束缚放在管子中束缚2小时夹尾巴用夹子在尾巴尖端1厘米处1分钟冰水游泳放在6℃的冰水中5分钟
[0029]IGFBP2的干预
[0030]对于药物脱髓鞘的IGFBP2的干预：LPC注射手术4天后脱髓鞘完成，进行IGFBP2的干预。手术8天后进行行为学检测。实验流程如图1a所示。
[0031]对于应激脱髓鞘的IGFBP2的干预：应激结束后1天，进行IGFBP2的干预。第2天进行行为学检测。实验流程如图1b所示。
[0032]评价IGFBP2干预效果
[0033]首先通过免疫组化和电镜实验，观察髓鞘的形态，判断IGCBP2是否逆转药物或者应激引发的脱髓鞘现象。
[0034]免疫组化实验：将大鼠固定在单独的解剖板上，首先用1xPBS进行灌注，然后用4％多聚甲醛(PFA)灌注，并在4℃下后固定到4％PFA中过夜。然后用30％蔗糖脱水至脑组织完全沉入50mL管底。OCT包埋后，将大脑保存在
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80℃冰箱中。冰冻切片机切30μm冠状切片。mPFC区域切片用PBS洗涤3次，每次5分钟，通过在含有4％山羊血清和0.1％Triton X
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100的PBS中室温孵育封闭1小时，随后孵育一抗MBP抗本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.胰岛素样生长因子结合蛋白2在制备治疗神经脱髓鞘性疾病的药物中的应用。2.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王振，史栋栋，张瀛丹，
申请(专利权)人：上海市精神卫生中心上海市心理咨询培训中心，
类型：发明
国别省市：