小分子低聚糖的MALDI的检测方法技术

本发明专利技术属于MALDI检测领域，具体涉及一种小分子低聚糖的MALDI的检测方法，包含下述步骤：包含下述步骤：将小分子低聚糖与4

【技术实现步骤摘要】
小分子低聚糖的MALDI的检测方法


[0001]本专利技术属于MALDI检测领域，具体涉及一种小分子低聚糖的MALDI的检测方法。

技术介绍

[0002]MALDI
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TOF
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MS是一种新型的软电离生物质谱，由于其样品制备简单，分析速度快，高通量，高灵敏度和高耐盐型使其已经发展成为一种用于分析各种类型的生物分子的不可或缺的分析工具，近年来得到了快速发展，在分析检测中发挥了重要作用。其基质的选择一直是关注的重点，基质性能的完善与提高可以使MALDI
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TOF
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MS的检测结果有更高的准确度和灵敏度、更小的背景噪音和更干净的谱图，常用的基质一般是一些具有共轭结构的有机小分子，与分析物形成共结晶，吸收激光能量传递给分析物使其离子化。在利用MALDI
‑
TOF
‑
MS进行糖类分析时，由于糖类的低离子化效率的特点，使MALDI检测糖类存在很大的挑战。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于，提供一种小分子低聚糖的MALDI的检测方法。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
[0005]一种小分子低聚糖的MALDI的检测方法，包含下述步骤：将小分子低聚糖与4
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氨基联苯氨盐酸盐溶液进行孵育后制得反应液，之后将反应液滴加到MALDI 钢靶上，室温干燥进行MALDI检测。
[0006]所述的4
‑
氨基联苯氨盐酸盐溶液为甲醇水溶液，浓度为2.5mg/ml。
[0007]反应液的制备方法为：将小分子低聚糖与4
‑
氨基联苯氨盐酸盐溶液按照质量比为1:99进行混合后在水浴60
‑
65℃条件下孵育1
‑
2h制得反应液。
[0008]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0009]本专利技术克服了MALDI
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TOF MS的传统基质只能分析大分子物质的缺点，采用 4
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氨基联苯氨盐酸盐作为MALDI
‑
TOF MS基质用于分析低聚糖。4
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氨基联苯氨盐酸盐具有强的紫外吸收，同时氨基与糖类分子中的醛基形成席夫碱的结构，提高小分子低聚糖的离子化效率，使小分子低聚糖的信号强度大大的提升。
附图说明
[0010]图1、3、5分别为采用实施例的方式得到的麦芽六糖、葡萄糖、乳糖的MALDI 图；
[0011]图2、4、6分别为采用对比例的方式得到的麦芽六糖、葡萄糖、乳糖的MALDI 图。
具体实施方式
[0012]为了使本
的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面结合实施例对本专利技术作进一步的详细说明。
[0013]实施例1、4
‑
氨基联苯氨盐酸盐的基质效应测试；对4
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氨基联苯氨盐酸盐进行紫外测试以及MALDI质谱测试，结果表明其具有良好的紫外吸收，并且在 MALDI得到了其化合物
的出峰，证明其具有作为基质的条件，复合MALDI
‑
MS中基质的要求。
[0014][0015]4‑
氨基联苯氨结构如式(I)示出。
[0016]实施例2
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4，对4
‑
氨基联苯氨盐酸盐作为基质进行低聚糖的MALDI质谱进行测试，具体包括下述步骤：
[0017]1)分别配置葡萄糖、乳糖、麦芽六糖的标准品溶液；
[0018]2)将4
‑
氨基联苯氨盐酸盐溶解到甲醇水溶液中形成基质溶液，浓度为 2.5mg/ml；其中甲醇与水的体积比为1:1；
[0019]3)将步骤1)得到的标准品溶液与步骤2)的基质溶液进行混合，加热到 60℃孵育1h制得反应液，之后将反应液1μL滴加到MALDI钢靶上，室温干燥进行MALDI检测。
[0020]分别对实施例2
‑
4制得的小分子低聚糖进行MALDI质谱测试，结果如图1、 3、5所示。
[0021]对比例1
‑
3，对比例与实施例2
‑
4的区别在于，使用2，5
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二羟基苯甲酸DHB 作为基质,浓度为10g/L,所用溶剂为乙腈水混合液，乙腈:水的体积比为1:1，具体步骤为：将标准品溶液与基质溶液进行混合，之后取1μL混合液滴加到 MALDI钢靶上，室温干燥进行MALDI检测。结果图2、4、6所示。由结果可知，使用本申请的4
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氨基联苯氨盐酸盐作为基质相对于传统的DHB作为基质，效果良好。表明该基质能够对小分子低聚糖进行分析。
[0022]以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种邻苯二酚及其衍生物的MALDI的检测方法，其特征在于，包含下述步骤：将硼酸修饰复合材料的悬浊液和待测液混合后蒸干，再滴加α
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氰基
‑4‑
羟基肉桂酸CHCA溶液于被分析物液滴上，形成薄层基质，之后采用MALDI
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TOF
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MS进行测试；其中，硼酸修饰复合材料采用下述方式进行制备：将二氧化硅使用盐酸进行清洗活化，加入硅烷试剂后加入4
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氨基苯硼酸进行功能化修饰即得。2.根据权利要求1所述的邻苯二酚及其衍生物的MALDI的检测方法，其特征在于，所述的硼酸修饰复合材料的具体采用下述步骤进行制备：1)将二氧化硅加入盐酸中进行回流活化，反应结束后，使用蒸馏水洗至中性，并置于鼓风干燥箱中干燥后；2)将活化后的二氧化硅加入甲苯中形成悬浮液，加入硅烷试剂，氮气保护下，回流过夜；反应结束后，过滤，洗涤，干燥得到硅烷化二氧化硅；其中硅烷试剂与二氧化硅的质量比为1:1，二氧化硅与甲苯的质量比为1:5
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10；3)将步骤2)得到的...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗露，李晨，宋合兴，周晓光，李运涛，
申请(专利权)人：广东默迪优谱生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：