脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性分析方法及在脓毒症心肌病诊断中的应用技术

本发明专利技术涉及脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性分析方法及在脓毒症心肌病诊断中的应用。一种脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性分析方法，入选脓毒症患者，根据心脏彩超分为脓毒症心功能受损和心功能正常患者，比较两组患者临床资料及心功能差异；比较脓毒症心功能受损和心功能正常患者内皮祖细胞功能；分析脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性；根据受试者内皮祖细胞功能工作特征曲线，确定脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性。本发明专利技术为准确评估SIC发生发展提供了可靠、有效的生物标志物和干预靶点，应用于脓毒症心肌病的诊断，克服了现有技术在脓毒症基础上通过超声心动图确诊SIC，无法指导治疗及判断预后的问题。导治疗及判断预后的问题。导治疗及判断预后的问题。

【技术实现步骤摘要】
Mitochondrial Injury Through an Effect on the PI3K/Akt Signaling Pathway. J Cardiovasc Pharmacol, 2019, 73(3): 186
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194.Furian T, Aguiar C, Prado K, et al. Ventricular dysfunction and dilation in severe sepsis and septic shock: relationto endothelial function and mortality. J Crit Care, 2012, 27(3): 319.），表明内皮功能障碍在SIC发生发展中起重要作用。此外，还有研究发现在SIC小鼠心脏的超微结构表现为线粒体肿胀、DNA损伤、线粒体通透性增加，细胞色素氧化酶活性降低、活性氧（Reactive oxygen species , ROS）产生增加，并伴有明显的细胞凋亡过程（van der Slikke EC, Star BS, van Meurs M, et al. Sep本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性分析方法，其特征在于：步骤如下：1）根据脓毒症诊断标准入选脓毒症患者，根据心脏彩超分为脓毒症心功能受损和心功能正常患者，比较两组患者临床资料及心功能差异；2）比较脓毒症心功能受损和心功能正常患者内皮祖细胞功能；3）分析脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性；4）根据受试者内皮祖细胞功能工作特征曲线，确定脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性。2.根据权利要求1所述的脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性分析方法，其特征在于：步骤2）中，分离出脓毒症心功能受损和心功能正常患者外周血单个核细胞，诱导分化成内皮祖细胞，体外分离、培养和鉴定内皮祖细胞后，测定内皮祖细胞粘附、迁移及增殖功能和管型形成能力，比较脓毒症心功能受损和心功能正常患者内皮祖细胞功能。3.根据权利要求2所述的脓毒症患者内皮祖细胞功能与心功能的相关性分析方法，其特征在于：所述步骤2）中，内皮祖细胞的体外分离、培养和鉴定的过程如下：采用Ficoll 离心法分离出患者外周血单个核细胞，诱导分化成内皮祖细胞；细胞培养1周后取部分贴壁细胞在一定浓度 ac
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LDL 溶液中孵育 1 小时，之后用多聚甲醛固定，以一定浓度 lectin 抗体溶液孵育 1 小时，通过荧光显微镜观察拍片，红色和绿色双染色的细胞为内皮祖细胞；同时，通过流式细胞仪对内皮祖细胞vwf、CD31、CD14 和 KDR 表达进行鉴定；所述步骤2）中，体外分离、培养和鉴定内皮祖细胞后，测定内皮祖细胞粘附、迁移及增殖功能和管型形成能力的过程如下：（1）内皮祖细胞迁移能力检测：用 0.25%胰酶消化内皮祖细胞，悬浮于250μlEBM
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2 培养液中；将含VEGF的EBM
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2培养液注入改良Boyden小室的下室，2
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104内皮祖细胞悬浮于EBM
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2培养液后加入上室；在37℃下培养24小时，计数迁移的细胞；（2）内皮祖细胞增殖能力检测：采用 0.25 %胰酶消化内皮祖细胞，悬浮于EBM
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2培养液中；准备包被有人纤维连接蛋白96孔培养板，将相同数量内皮祖细胞接种到96孔培养板中，每个孔加10μl MT...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨震，朱媛婷，曾丽金，张琮，蔡国义，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：