尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法技术

一种尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法，所述检测试剂盒包括对照试剂和测试试剂各一支、显色试纸，测试试剂的溶液为蒸馏水，所述对照试剂的溶液为氯化汞溶液或硫酸汞溶液，显色试纸的制备是将磷钨酸试剂溶液与缓冲溶液按体积比1:1混合均匀，再使用定性慢速滤纸浸泡在显色剂溶液中取出置箱干燥1小时，用塑料袋封装。本发明专利技术的检测试剂盒具有准确度高、特异性好等特点，通过检测已确诊的宫颈癌患者215例，阳性188例，阳性符合率87.4%；用本试剂筛查一般人群385例，阳性7例，阳性率为1.8%，特异性为98.2%；同时，用市场上同类试剂检测相同人群，得到阳性27例，阳性率为7%，特异性为93%。性为93%。

【技术实现步骤摘要】
尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法


[0001]本专利技术涉及检测试剂盒制备方法，尤其是一种尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法。

技术介绍

[0002]女性尿液中巯基类代谢物水平的显著升高，可以提示宫颈癌病变的发生。目前常见的宫颈癌筛查方法有HPV（人乳头瘤病毒）检测，TCT（液基薄层细胞检测）、巴氏涂片检测和病理学诊断。这些方法操作比较复杂，准确度偏低，受检者有一定创伤，同时存在交叉感染。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的就是提供一种操作简单、准确度高，能避免受检者产生创伤及交叉感染的尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法。
[0004]本专利技术的尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法，所述检测试剂盒包括对照试剂和测试试剂各一支，用安瓿分装，两片相同的显色试纸，测试试剂的溶液为蒸馏水，其具体步骤如下：所述对照试剂的溶液为氯化汞溶液或硫酸汞溶液，浓度为0.2mol/l
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0.5mol/l。
[0005]显色试纸的制备：1、磷钨酸试剂溶液，称取钨酸钠60g
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80g，溶于蒸馏水300ml
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500ml中，加85%磷酸30ml
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50ml，回流煮沸2小时，然后，冷却至室温；加入硫酸铁10g
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20g，充分溶解，加蒸馏水定容至1000ml；再加入硫酸锂30g
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50g、0.5%海藻胶50ml
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70ml，摇匀；置2℃
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8℃冷藏保存备用；2、缓冲溶液pH5.4
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pH5.8，按pH值要求，配制乙酸盐缓冲溶液（乙酸钠溶液/乙酸溶液）1000ml，或磷酸盐缓冲溶液（磷酸二氢钠溶液/磷酸氢二钠溶液）1000ml，置2℃
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8℃冷藏保存备用；将磷钨酸试剂溶液与缓冲溶液按体积比1:1混合均匀，即为显色剂，置2℃
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8℃冷藏保存备用；3、显色试纸，使用定性慢速滤纸，做成直径1cm的圆形试纸，浸泡在显色剂溶液中3
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5分钟，取出置26℃恒温箱干燥1小时，用塑料袋封装。
[0006]本专利技术的尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的使用方法，用于宫颈癌的普查/筛查时，分别取晨尿0.2ml滴入试剂盒的对照试剂瓶和测试试剂瓶，摇匀，静置片刻，然后，分别加入显色试纸。观察两片试纸的颜色变化，若两片试纸的颜色一致则判定为阴性；若两片试纸颜色不同，且测试边颜色（蓝色）比对照边颜色更深则判定为阳性。
[0007]本专利技术的尿液中巯基类代谢物检测试剂盒具有准确度高、特异性好等特点，通过检测已确诊的宫颈癌患者215例，阳性188例，阳性符合率87.4%；用本试剂筛查一般人群385例，阳性7例，阳性率为1.8%，特异性为98.2%；同时，用市场上同类试剂检测相同人群，得到
阳性27例，阳性率为7%，特异性为93%。
具体实施方式
[0008]实施例1：（按试剂盒各管装量比例配制试剂液，制作500盒试剂盒）一、测试试剂的溶液为蒸馏水，制备蒸馏水100ml；二、对照试剂的溶液为氯化汞溶液，配制0.2mol/l的氯化汞溶液100ml；三、显色剂为磷钨酸试剂溶液和缓冲溶液按体积比1:1的混合物，2000ml。
[0009]1、 磷钨酸试剂溶液的制备，称取钨酸钠61g，溶于蒸馏水320ml中，加85%磷酸35ml，回流煮沸2小时，然后，冷却至室温，加入硫酸铁15g，充分溶解，加蒸馏水定容至1000ml。最后加入硫酸锂35g、0.5%海藻胶50ml，摇匀，置2℃
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8℃冷藏保存备用。
[0010]2、缓冲溶液pH5.4，按pH值要求，配制乙酸盐缓冲溶液（乙酸钠溶液/乙酸溶液）1000ml，将2mol/l乙酸钠溶液833.3ml加2mol/l乙酸溶液166.7ml混合，置2℃
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8℃冷藏保存备用。
[0011]以上“一”至“三”配制好的溶液，分别按对照试剂1支*0.2ml，测试试剂1支*0.2ml，分别分装到1ml安瓿；显色试纸1000张（使用定性慢速滤纸，做成直径1cm的圆形试纸）浸泡在显色剂溶液中3
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5分钟，取出置26℃恒温箱干燥1小时，用塑料袋封装，每袋2片。可制作试剂盒共500盒。
[0012]实施例2：（按试剂盒各管装量比例配制试剂液，制作500盒试剂盒）一、测试试剂的溶液为蒸馏水，制备蒸馏水100ml；三、显色剂为磷钨酸试剂溶液和缓冲溶液按体积比1:1的混合物，2000ml。
[0013]1、 磷钨酸等试剂溶液的制备，称取钨酸钠65g，溶于蒸馏水350ml中，加85%磷酸40ml，回流煮沸2小时，然后，冷却至室温，加入硫酸铁20g，充分溶解，加蒸馏水定容至1000ml。最后加入硫酸锂35g、0.5%海藻胶55ml，摇匀，置2℃
‑
8℃冷藏保存备用。
[0014]2、 缓冲溶液pH5.7，按pH值要求，配制磷酸盐缓冲溶液（磷酸二氢钠溶液/磷酸氢二钠溶液）1000ml，将0.2mol/l磷酸二氢钠溶液935ml加0.2mol/l磷酸氢二钠溶液65ml混合，置2℃
‑
8℃冷藏保存备用。
[0015]以上“一”至“三”配制好的溶液，分别按对照试剂1支*0.2ml，测试试剂1支*0.2ml，分别分装到1ml安瓿；显色试纸1000张（使用定性慢速滤纸，做成直径1cm的圆形试纸）浸泡在显色剂溶液中3
‑
5分钟，取出置26℃恒温箱干燥1小时，用塑料袋封装，每袋2片。可制作试剂盒共500盒。
[0016]实施例3：（按试剂盒各管装量比例配制试剂液，制作1000盒试剂盒）一、测试试剂的溶液为蒸馏水，制备蒸馏水200ml；二、对照试剂的溶液为氯化汞溶液，配制0.5mol/l的硫酸汞溶液200ml；三、显色剂为磷钨酸试剂溶液和缓冲溶液按体积比1:1的混合物，4000ml。
[0017]1、 磷钨酸试剂溶液的制备，称取钨酸钠80g，溶于蒸馏水700ml中，加85%磷酸80ml，回流煮沸2小时，然后，冷却至室温, 加入硫酸铁18g，充分溶解，加蒸馏水定容至2000ml。最后加入硫酸锂65g、0.5%海藻胶65ml，摇匀，置2℃
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8℃冷藏保存备用。
[0018]2、缓冲溶液pH5.8，按pH值要求，配制磷酸盐缓冲溶液（磷酸二氢钠溶液/磷酸氢二钠溶液）2000ml，将0.2mol/l磷酸二氢钠溶液1840ml加0.2mol/l磷酸氢二钠溶液160ml混
合，置2℃
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8℃冷藏保存备用。
[0019]以上“一”至“三”配制好的溶液，分别按对照试剂1支*0.2ml，测试试剂1支*0.2ml，分别分装到1ml安瓿；显色试纸2000张（使用定性慢速滤纸，做成直径1cm的圆形试纸）浸泡在显色剂溶液中3
‑
5分钟，取出置26℃恒温箱干燥1小时，用塑料袋封装，每袋2片。可制作试剂盒共1000盒。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种尿液中巯基类代谢物检测试剂盒的制备方法，所述检测试剂盒包括对照试剂和测试试剂各一支，用安瓿分装，两片相同的显色试纸，测试试剂的溶液为蒸馏水，其特征在于：其具体步骤如下：所述对照试剂的溶液为氯化汞溶液或硫酸汞溶液，浓度为0.2mol/l
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0.5mol/l；显色试纸的制备：（1）、磷钨酸试剂溶液，称取钨酸钠60g
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80g，溶于蒸馏水300ml
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500ml中，加85%磷酸30ml
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50ml，回流煮沸2小时，然后，冷却至室温；加入硫酸铁10g
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20g，充分溶解，加蒸馏水定容至1000ml；再加入硫酸锂...

【专利技术属性】
技术研发人员：李润慈，蔡云，
申请(专利权)人：梅宗泉，
类型：发明
国别省市：