一种用于测定雌二醇的检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于测定雌二醇的检测试剂盒，包括免疫磁珠、解离剂和阻断剂；解离剂用于将雌二醇从与其他蛋白的结合状态解离出来进而更好的让样本中的雌二醇与磁珠上的单抗进行反应；阻断剂用于结合样本中其它干扰物质进而消除与雌二醇结构类似的干扰物质影响。本发明专利技术通过将阻断剂和解离剂结合使用，并优化设计了阻断剂和解离剂的种类，利于提高现有技术中免疫测定试剂的准确度和特异度，解决测定临床样本经常出现干扰的问题。临床样本经常出现干扰的问题。临床样本经常出现干扰的问题。

【技术实现步骤摘要】
一种用于测定雌二醇的检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物医学检测
，具体涉及一种用于测定雌二醇的检测试剂盒。

技术介绍

[0002]雌二醇(简称E2)是人体内生物活性最强的一种雌激素,分子量272.3道尔顿，主要由卵巢分泌，肾上腺和男性的睾丸也可少量分泌。血液中大部分的E2与性激素结合球蛋白结合，只有1
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3％的E2是游离的。E2主要促进女性生殖上皮、乳腺、子宫、长骨生长及第二性征发育。E2增高常见于女性各类性早熟、颗粒细胞瘤和卵泡膜细胞瘤等，男性的E2水平异常高表明有女性化综合症，比如男性乳房发育。E2缺乏将导致闭经、生殖器萎缩及骨质疏松和心血管疾病等。可影响女性第二性征的发育。因此E2的测定对于监测排卵、分析性发育状况，无月经病因，不孕和绝经的成因都很有价值。
[0003]现有雌二醇测定试剂盒(化学发光法)在检测临床样本时主要受到两方面的干扰；一方面，雌二醇主要与性激素结合蛋白和白蛋白结合，检测时需要将雌二醇从蛋白中解离出来，但现有技术不易解离，导致检测结果偏低；另一方面，样本中还存在与雌二醇结构类似的干扰物质影响雌二醇的测定，导致检测结果偏高。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是：雌二醇测定过程中，由于雌二醇主要与性激素结合蛋白和白蛋白结合及与雌二醇结构类似的干扰物质影响，导致检测结果不准确，本专利技术提供了解决上述问题的一种用于测定雌二醇的检测试剂盒。
[0005]本专利技术通过下述技术方案实现：
[0006]一种用于测定雌二醇的检测试剂盒，包括免疫磁珠，还包括解离剂和阻断剂；所述解离剂含有美睾酮、睾酮、达那唑中的至少一种；所述阻断剂含有雌酮抗体。
[0007]本专利技术提供的用于测定雌二醇的试剂盒，包括免疫磁珠、解离剂和阻断剂；解离剂用于将雌二醇从与其他蛋白的结合状态解离出来进而更好的让样本中的雌二醇与磁珠上的单抗进行反应；阻断剂用于结合样本中其它干扰物质进而消除与雌二醇结构类似的干扰物质影响。本专利技术通过将阻断剂和解离剂结合使用，并优化设计了阻断剂和解离剂的种类，利于提高现有技术中免疫测定试剂的准确度和特异度，解决测定临床样本经常出现干扰的问题。
[0008]进一步优选，所述美睾酮的浓度为0.05ug/mL；睾酮的浓度为0.05ug/mL；达那唑的浓度为0.05ug/mL。浓度太高会太低均会影响试剂的解离效果。
[0009]进一步优选，所述雌酮抗体的浓度为0.1ug/mL。浓度太高会太低均会影响试剂的抗干扰效果。
[0010]进一步优选，所述解离剂采用一定浓度的睾酮、达那唑或美睾酮，所述阻断剂采用一定浓度的雌酮抗体。
[0011]进一步优选，所述解离剂采用浓度为0.05ug/mL的睾酮、浓度为0.05ug/mL的达那唑或浓度为0.05ug/mL的美睾酮，所述阻断剂采用浓度为0.1ug/mL的雌酮抗体。
[0012]进一步优选，所述免疫磁珠为包被有羊抗人E2单克隆抗体的磁珠与缓冲液的混合液；该混合液作为解离剂和阻断剂的溶剂；缓冲液可采用含有0.1％的牛血清白蛋白缓冲溶液。
[0013]进一步优选，所述包被有羊抗人E2单克隆抗体的磁珠在缓冲液中的质量浓度为：0.1mg/mL
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0.3mg/mL。
[0014]进一步优选，还包括酶工作液。
[0015]进一步优选，所述酶工作液为标记有E2衍生物的酶与缓冲液的混合液；缓冲液可采用含有0.1％的牛血清白蛋白缓冲溶液。
[0016]进一步优选，所述标记有E2衍生物的酶在缓冲液中的质量浓度为：0.05ug/mL
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0.1ug/mL。
[0017]本专利技术具有如下的优点和有益效果：
[0018]本专利技术提供的用于测定雌二醇的检测试剂盒，通过解离剂能够较好的将雌二醇从性激素结合蛋白中解离出来，更有利于雌二醇与免疫磁珠的结合，从而提高了试剂盒的准确度；通过阻断剂，能够与样本中的干扰物质结合，消除了其对于雌二醇检测的干扰作用，从而提高了试剂盒的特异度。同时添加解离剂、阻断剂后测试样本更加的准确，提高了雌二醇的检测效率。
附图说明
[0019]此处所说明的附图用来提供对本专利技术实施例的进一步理解，构成本申请的一部分，并不构成对本专利技术实施例的限定。在附图中：
[0020]图1显示为实验一与罗氏测值对比图。
[0021]图2显示为实验二与罗氏测值对比图。
[0022]图3显示为实验三与罗氏测值对比图。
具体实施方式
[0023]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本专利技术作进一步的详细说明，本专利技术的示意性实施方式及其说明仅用于解释本专利技术，并不作为对本专利技术的限定。
[0024]在以下描述中，为了提供对本专利技术的透彻理解阐述了大量特定细节。然而，对于本领域普通技术人员显而易见的是：不必采用这些特定细节来实行本专利技术。在其他实施例中，为了避免混淆本专利技术，未具体描述公知的材料或方法。
[0025]实施例1
[0026]制备仅添加解离剂的免疫磁珠：
[0027]A、取30mL包被有羊抗人E2单克隆抗体的磁珠，等分为3份，分别量取0.5ug美睾酮、0.5ug睾酮、0.5ug达那唑添加至免疫磁珠中；
[0028]B、将上述添加有0.5ug美睾酮、0.5ug睾酮、0.5ug达那唑的免疫磁珠分别编号为A1、A2、A3组。
[0029]实施例2
[0030]制备仅添加阻断剂的免疫磁珠：
[0031]A、取10mL免疫磁珠，量取1ug雌酮抗体添加至免疫磁珠中；
[0032]B、将上述添加有1ug雌酮抗体的免疫磁珠编号为B1组。
[0033]实施例3
[0034]制备同时添加解离剂、阻断剂的免疫磁珠：
[0035]A、取30mL免疫磁珠，等分为3份，分别量取0.5ug美睾酮+1ug雌酮抗体、0.5ug睾酮+1ug雌酮抗体、0.5ug达那唑+1ug雌酮抗体添加至免疫磁珠中；
[0036]B、将上述添加有0.5ug美睾酮+1ug雌酮抗体、0.5ug睾酮+1ug雌酮抗体、0.5ug达那唑+1ug雌酮抗体的免疫磁珠分别编号为C1、C2、C3组。
[0037]取10mL免疫磁珠不添加解离剂和阻断剂，将其作为空白对照，编号为D组。
[0038]基于实施例1
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3进行如下实验。
[0039]实验一
[0040]添加有0.5ug美睾酮、0.5ug睾酮、0.5ug达那唑的免疫磁珠与空白对照在同等情况下，试剂盒准确度与特异性比较实验。
[0041]实验材料：免疫磁珠，标记有E2衍生物的酶工作液，沃文特生物全自动免疫检验系统用底物液，沃文特生物清洗液，沃文特全自动化学发光免疫分析仪LA2000，美睾酮、睾酮、达那唑、雌酮抗体、E2校准品(S0
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S5)、40例E2新鲜临床样本及第三方临床检验报告(罗氏)。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于测定雌二醇的检测试剂盒，包括免疫磁珠，其特征在于，还包括解离剂和阻断剂；所述解离剂含有美睾酮、睾酮、达那唑中的至少一种；所述阻断剂含有雌酮抗体。2.根据权利要求1所述的一种用于测定雌二醇的检测试剂盒，其特征在于，所述美睾酮的浓度为0.05ug/mL；睾酮的浓度为0.05ug/mL；达那唑的浓度为0.05ug/mL。3.根据权利要求1所述的一种用于测定雌二醇的检测试剂盒，其特征在于，所述雌酮抗体的浓度为0.1ug/mL。4.根据权利要求1所述的一种用于测定雌二醇的检测试剂盒，其特征在于，所述解离剂采用一定浓度的睾酮、达那唑或美睾酮，所述阻断剂采用一定浓度的雌酮抗体。5.根据权利要求4所述的一种用于测定雌二醇的检测试剂盒，其特征在于，所述解离剂采用浓度为0.05ug/mL的睾酮、浓度为0.05ug/mL的达那唑或浓度为0.05ug/mL的美睾酮，所述阻断剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：敬斌媛，李玲，方丽，
申请(专利权)人：四川沃文特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：