基于熵驱动信号放大与无标记荧光探针的阿尔茨海默病相关ApoE基因检测方法技术

本发明专利技术提出了一种基于熵驱动信号放大与无标记荧光探针的阿尔茨海默病相关ApoE基因检测方法，属于生命分析技术的领域。通过磁珠表面核酸外切酶Ⅲ(EXOⅢ)介导的靶标循环和熵驱动两步信号放大，并以无标记的银纳米簇荧光探针为信号输出方式实现了对ApoE基因的检测。靶标基因与磁珠表面的识别双链探针特异性结合，形成EXOⅢ的酶切位点；在EXOⅢ作用下，产生大量激活链；磁珠分离提取上清液，已存在的激活链触发银纳米簇形成的三链复合物模板，产生链的分支迁移和链取代，使得银纳米簇结构产生改变，荧光信号下降。本发明专利技术具有免标记、成本低的优点，能够实现对ApoE基因的灵敏检测。能够实现对ApoE基因的灵敏检测。

【技术实现步骤摘要】
基于熵驱动信号放大与无标记荧光探针的阿尔茨海默病相关ApoE基因检测方法


本专利技术属于生命分析化学
，具体涉及一种基于熵驱动信号放大与无标记荧光探针的阿尔茨海默病相关ApoE基因检测方法。

技术介绍

阿尔茨海默病(Alzheimer
’
s disease,AD)是一种严重的神经退行性疾病，发病隐匿、进展缓慢，主要临床表现为记忆力进行性下降伴其他认知功能减退。随着人口老龄化形势的加剧，阿尔茨海默病的患病人数也在逐年增加。目前AD病因未明，尚没有有效的治疗途径来阻止甚至延缓痴呆病程的进展。近些年来，寻找特异性的生物标志物用于早期诊断和预防是AD研究领域的重要目标。有相关文献指出，载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因是影响散发型AD发病最确切的风险基因，其通过参与Aβ的生成、促进老年斑的沉积，使AD发病年龄提前，并加快轻度认知功能障碍至阿尔茨海默病的转变进程。因此ApoE基因的灵敏和特异性检测对AD的早期诊断具有一定的临床意义。一直以来，聚合酶链式反应(PCR)是基因分析和微量(DNA)检测最常用的技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于熵驱动信号放大与无标记荧光探针的阿尔茨海默病相关ApoE基因检测方法，其特征在于主要包括几个方面：整个方法中核酸序列的设计；磁珠与双链识别探针(CP)的连接；以三链核酸复合物为模板的银纳米簇的合成；DNA银纳米簇荧光探针对阿尔茨海默病相关ApoE基因的检测。2.根据权利要求1所述的基于熵驱动信号放大与无标记荧光探针的阿尔茨海默病相关ApoE基因检测方法，其特征在于所用核酸序列为：Target:5
’‑
ATG GAG GAC GTG TGC GGC CG
‑3’
CS:5
’‑
Biotin
‑
TTTTTTTTTT GGC CAC GTA GGG TAT TGC ACA CGT CCT C
‑3’
TS:5
’‑
CGA TTC AAT ACC CTA CGT GG CC TTTTTTT
‑3’
SS:5
’‑
GGC CAC GTA GGG TAT TGA ATG CGA TTT CGT ATA GTC TGA CCC CCT AAT TCC C
‑3’
OS:5
’‑
TTT TTT TTT TAT CGC ATT CAA TAC CCT A
‑3’
AS:5
’‑
GGG GTG GGT GGG TGG GGT CGG GTC AGA CTA TAC GAA
‑3’
FS:5
’‑
GGG TCA GAC TAT ACG AAA TCG CAT TCA ATA CCC TA
‑3’
M1:5
’‑
ATG GAG GAC GTG CGC GGC CG
‑3’
M2：5
’‑
ATG GAG GAC CTG CGC GGC CG
‑3’
NC：5
’‑
ACT GCT AGA GAT TTT CC...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨晓燕，向华，
申请(专利权)人：重庆医科大学国际体外诊断研究院，
类型：发明
国别省市：