一种蜂花粉酵素的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种适合蜂花粉酵素的制备方法，a制备种子液：将植物乳杆菌322Hp、嗜酸乳杆菌322Ha及罗伊氏乳杆菌322Hr进行活化；b制备酵素发酵培养基：将巴氏灭菌后的蜂蜜加入至无菌水中，然后添加经机械破壁后的蜂花粉，混合均匀；c制备酵素发酵液：将种子液接种至蜂花粉酵素发酵培养基中，经过摇床振荡培养发酵得到发酵产物；d制备酵素成品；本发明专利技术采用机械破壁与三种乳酸菌混合发酵相结合的方法处理蜂花粉，提高了花粉的破壁率，使花粉内容物得到更充分的释放，有效增加蜂花粉的营养价值和活性成分的同时还能去除花粉中的主要过敏源，大大扩增了蜂花粉酵素的市场受众。大扩增了蜂花粉酵素的市场受众。大扩增了蜂花粉酵素的市场受众。

【技术实现步骤摘要】
一种蜂花粉酵素的制备方法


[0001]本专利技术涉及微生物或酶或其组合物的
，尤其涉及一种适 合蜂花粉酵素的发酵方法。

技术介绍

[0002]蜂花粉是指蜜蜂从被子植物雄性花药和裸子植物小孢子叶上的 小孢子囊采集的花粉粒，并经过蜜蜂加工而成的花粉团状物。蜂花粉 是一种天然的自然资源，含有丰富的营养物质，它不仅含有人体必需 的糖类、蛋白质、游离氨基酸、核酸、不饱和脂肪酸、维生素、矿物 质、微量元素和酚类等多种活性成分，而且营养物质全面均衡，被誉 为“微型营养库”。蜂花粉既是很好的天然营养食品，又具有抗氧化、 抗菌消炎、抗肿瘤、抗过敏和提高机体免疫力等功效，一直备受消费 者的青睐。
[0003]市场上常见的蜂花粉有油菜花粉、荷花粉、荞麦花粉、玉米花粉 以及茶花粉等。其中，油菜花粉中含有大量的多糖和一定量的脂肪及 蛋白质，以及丰富的维生素B和维生素A、维生素D、维生素E、维 生素K及各种必需氨基酸和非必需氨基酸等物质，还含有铁、锌、 钙、镁、钾等十多种无机盐和三十多种微量元素以及淀粉酶、过氧化 氢酶、肠肽酶、纤维素酶、胃蛋白酶、脂酶、胰酶等重要酶类。此外， 油菜花粉中还含有一定量的黄酮、甾醇、多酚及不饱和脂肪酸等物质， 这些活性成分不仅可以提高人体的功能，还能抑制前列腺增生、治疗 男性不育症。
[0004]荷花粉作为一种新兴花粉保健品，黄酮类含量高、种类多，富含 蛋白质、氨基酸、维生素、脂肪酸、矿物质、核酸及酶类等活性物质， 而维生素尤其是B族维生素的含量也是首屈一指，还含有丰富的铜、 镁、铁、锌、钙等矿物质成分，在蜂花粉系列中属于名贵产品，可用 来治疗痢疾、肠胃炎、小便不利、水肿肝炎，具有防止动脉硬化、增 强心肌收缩、加快心率、改善心肌功能、消减脂肪、抗氧化、降血脂、 护血管、预防癌症和润肤美容的功效，备受广大消费者尤其是女性消 费者的青睐。
[0005]然而，由于蜂花粉外壁较厚、较坚硬、缺乏弹性，其主要成分为 孢粉素，具有很强的抗水、抗渗透性、抗腐蚀性、抗酸碱性、抗生物 分解性能，与绝大多数的化学物质不发生反应，使其丰富的内容物不 能直接被人体利用，而且其中的部分蛋白质易使部分人群发生过敏反 应，因此需要通过破壁将花粉内部的营养物质释放出来。
[0006]目前，国内外的破壁方法主要包括机械破壁、物理破壁和生物破 壁。机械破壁主要有旋风粉碎法和超微粉碎法；物理破壁主要有温差 法、辐射法、水合破壁法、超声波法、渗透压破擘法、超低温加微波 破壁法和液氮淬冷破壁法；生物破壁主要有发酵破壁和酶解破壁，考 虑到工艺、成本及安全性等问，目前主要的破壁方法是机械破壁或生 物破壁或这两种方法联合破壁。
[0007]生物破壁主要是通过利用了酵母菌、曲霉菌、乳酸菌等有益菌发 酵过程中产生的各种酶以及花粉内部含有的各种酶的作用打通了花 粉内外壁的部分通道，从而使得花粉内壁中的营养成分溶出，经该方 法破壁的花粉有较好的色泽风味，并且有利于维生素、酶、
蛋白质、不饱和脂肪酸、黄酮、多酚等功能成分的保存。蜂花粉经过发酵破壁后会产生并积累大量代谢产物，生成有机酸、酶类、多酚类、多糖类、黄酮类等多种有益物质，而且可以将花粉中致敏的大分子蛋白降解为多肽或氨基酸，结合原料和微生物自身所含有的营养及功能成分，具有抗菌、抗过敏、抗发炎、抗病毒以及舒张血管、抑制脂质过氧化、促进肠胃消化、提高免疫力、增强抗癌抗辐射能力、延缓衰老等，不仅降低了人体对花粉过敏的风险而且对人体有多种有益功效，其中的黄酮类物质更是对抑制前列腺炎和前列腺增生有显著疗效，富含的多酚类物质不仅具有抗氧化、抗衰老的作用，同时还能美容养颜，具备很大的食用价值及药用价值，能带来重大的生态和社会效益。
[0008]传统的蜂花粉酵素发酵往往使用的是单一菌种，由于单菌的发酵能力有限，导致其对蜂花粉的破壁效果较差，发酵后的酵素中功能性成分含量较低、脱敏效果较差；本专利技术使用三种乳酸菌混合发酵来制备蜂花粉酵素，可显著增加蜂花粉酵素的营养功能成分和风味物质，且其中的主要致敏物质大分子蛋白质也被降解地更彻底。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的在于提供一种适合蜂花粉酵素的制备方法，这种适合蜂花粉酵素的制备方法采用气流粉碎破壁与三种乳酸菌混合发酵相结合的方式处理蜂花粉，提高了花粉的破壁率，使花粉内容物得到更充分的释放，有效增加蜂花粉的营养价值和活性成分的同时还能去除花粉中的主要过敏源，大大扩增了蜂花粉酵素的市场受众；最后发酵产物通过冷冻干燥和压片制成固态产品，具有广泛的市场前景。
[0010]本专利技术一种蜂花粉酵素的制备方法，包括如下步骤：
[0011]a制备种子液：将植物乳杆菌322Hp(Lactobacillusplantarum322Hp)、嗜酸乳杆菌322Ha(Lactobacillusacidophilus322Ha)及罗伊氏乳杆菌322Hr(Lactobacillusreuteri322Hr)从斜面培养基或甘油保藏管中分别接种至MRS培养基中于37℃、180r/min摇床内振荡培养28
‑
36h；
[0012]b制备酵素发酵培养基：将巴氏灭菌后的蜂蜜添加到无菌水中，蜂蜜(含糖度为78～85Brix)的添加比例为10
‑
20g/L，然后添加经机械破壁后的蜂花粉，蜂花粉添加比例为500
‑
550g/L，混合均匀；
[0013]c制备酵素发酵液：将种子液以10～15％(v/v)的比例接种至步骤b的蜂花粉酵素发酵培养基中，置于37
‑
40℃摇床中以150
‑
210r/min振荡培养48
‑
60h；
[0014]d制备酵素成品：将发酵好的酵素液进行后续处理。
[0015]优选地，在步骤a中，活化三种乳酸菌，控制植物乳杆菌322Hp(Lactobacillusplantarum322Hp)的OD
600
为2.0左右、嗜酸乳杆菌322Ha(Lactobacillusacidophilus322Ha)的OD
600
为2.1左右、罗伊氏乳杆菌322Hr(Lactobacillusreuteri322Hr)的OD
600
为1.5左右。
[0016]具体地，在步骤a中，所述MRS培养基为蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，酵母膏4g/L，葡萄糖20g/L，磷酸氢二钾2g/L，三水合乙酸钠5g/L，柠檬酸氢二铵2g/L，七水合硫酸镁0.2g/L，一水合硫酸锰0.005g/L，所述MRS培养基的pH为6
‑
6.5。
[0017]进一步地，在步骤a中，植物乳杆菌322Hp(Lactobacillusplantarum322Hp)、嗜酸乳杆菌322Ha(Lactobacillusacidophilus322Ha)、罗伊氏乳杆菌322Hr
(Lactobacillus reuteri 322Hr)在MRS 固体培养基上的菌落形态见下表1。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蜂花粉酵素的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a制备种子液：将植物乳杆菌322Hp(Lactobacillus plantarum 322Hp)、嗜酸乳杆菌322Ha(Lactobacillus acidophilus 322Ha)及罗伊氏乳杆菌322Hr(Lactobacillus reuteri 322Hr)从斜面培养基或甘油保藏管中分别接种至MRS培养基中于37℃、180r/min摇床内振荡培养28
‑
36h；b制备酵素发酵培养基：将巴氏灭菌后的蜂蜜添加到无菌水中，然后添加经机械破壁后的蜂花粉，混合均匀；c制备酵素发酵液：将种子液以10～15％的比例(v/v)接种至步骤b的蜂花粉酵素发酵培养基中，置于37
‑
40℃摇床中振荡培养48
‑
60h；d制备酵素成品：将发酵好的酵素液进行后续处理。2.根据权利要求1所述的蜂花粉酵素的制备方法，其特征在于：在步骤a中，所述MRS培养基为蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，酵母膏4g/L，葡萄糖20g/L，磷酸氢二钾2g/L，三水合乙酸钠5g/L，柠檬酸氢二铵2g/L，七水合硫酸镁0.2g/L，一水合硫酸锰0.005g/L，所述MRS培养基的pH为6
‑
6.5。3.根据权利要求1所述的蜂花粉酵素的制备方法，其特征在于：在步骤b中，蜂蜜(含糖度为78～85Brix)添加比例为10
‑
20g/L，蜂花粉添加比例为500
‑
550g/L。4.根据权利要求3所述的蜂花粉酵素的制备方法，其特征在于：在步骤b中，所述的蜂花粉可为油菜花粉、荷花粉、荞麦花粉、玉米花粉及茶花粉中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的蜂花粉酵素的制备方法，其特征在于：机械破壁的方法为气流粉碎机破壁。6.根据权利要求1所述的蜂花粉酵素的制备方...

【专利技术属性】
技术研发人员：张庆华，程网山，
申请(专利权)人：株式会社APlCARE，
类型：发明
国别省市：