一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法技术

本发明专利技术公开了一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法，属于分子生物学检测技术领域。本发明专利技术以金纳米颗粒为载体，合成AuNP

【技术实现步骤摘要】
一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法


[0001]本专利技术涉及一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法，属于分子生物学检测


技术介绍

[0002]抗生素是一类可以干扰其它细胞发育功能的小分子物质。近年来，抗生素在畜牧业中被广泛使用，以加快生长速度、预防疾病和对抗炎症。然而,由于抗生素的滥用,当前细菌对抗生素产生耐药性的问题变得十分严重,已对全球健康构成威胁。抗生素在杀死病原菌的同时，可能会对人体造成伤害。例如，青霉素会引起过敏反应，甚至对神经系统产生不良影响。因此，监测食品中抗生素残留的对于确保食品安全至关重要。迄今为止，已经开发了多种分析检测方法用于检测抗生素，包括仪器分析法和酶联免疫法(ELISA)。然而，这些方法可能预处理步骤繁琐、需要昂贵的实验设备等缺点。因此，有必要开发一种简单高效的抗生素检测方法。
[0003]AuNP
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DNA
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抗体作为一种高灵敏的检测探针，已被用于各种检测领域。其中抗体用于免疫竞争靶标，Trigger DNA用于核酸扩增。由于可本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测氯霉素的探针，其特征在于，所述探针包含经巯基修饰的Trigger DNA和氯霉素抗体，所述Trigger DNA和氯霉素抗体连接在金纳米颗粒上；所述Trigger DNA的序列为：5
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HS
‑
(T)
28
TCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTGCGT
‑3’
。2.一种制备检测氯霉素的探针的方法，其特征在于，所述方法包括如下过程：(1)合成金纳米颗粒AuNP：将HAuCl4溶液加热至沸腾，加入柠檬酸三钠，保持沸腾直至得到橘红色溶液体系，冷却至室温，即为金纳米颗粒分散液；(2)调节金纳米颗粒分散液的pH至8.5
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9.0，加入氯霉素单克隆抗体孵育，获得AuNP
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抗体分散液；(3)将活化后的巯基修饰的Trigger DNA加入到AuNP
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抗体分散液中，混匀并冷冻，将溶液溶解后，加入PEG20000、PBS进行反应，获得AuNP
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DNA
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抗体分散液；(4)在所得AuNP
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DNA
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抗体分散液中加入BSA进行孵育，孵育结束后，固液分离，得到探针；所述有巯基修饰的Trigger DNA的序列为：5
’‑
HS
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(T)
28
TCTCTTCTCCGAGCCGGTCGAAATAGTGCGT
‑3’
。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每N mL纳米金颗粒分散液中加入20Nμg氯霉素单克隆抗体制备成AuNP
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抗体分散液，再添加N OD的Trigger DNA。4....

【专利技术属性】
技术研发人员：郭亚辉，桑潘婷，沈维韦，陆华进，于航，谢云飞，姚卫蓉，
申请(专利权)人：杭州傲敏生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：